蛋白酶的测定实验——酪蛋白测定法
实验方法原理实验中的氨基酸由蛋白酶从酪蛋白中水解下来。在分离出 TCA 沉淀中未分解的蛋白质后，用分光光度测定的方法对其上清液分析，氨基酸来自于酪蛋白。依据酪蛋白校准曲线，已对其量化。这个鉴定不是很敏感。实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HClNaOH乙酸三氯乙酸L-酪氨酸酪蛋白底物仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.4 ml 酪蛋白底物被恢复到 35℃，并加入 0.2 ml 蛋白酶溶液（含 0.01 mol/L Tris-HCl，pH 8.0，10 mmol/L CaCl2）。混合物在 35℃ 孵育 10 min，加入 1 ml 1.2 mol/L 的 TCA 停止反应。用同样方法处理空白对照，不同的是在加入 TCA 之后向酪蛋白底物中加蛋白酶溶液。样品离心 5 min，并取上清液测量其在 275nm 处的吸收值。一个单位被定义为：35℃ 时，1 min 后，产生相当于校准曲线中 1 umol 的酪......阅读全文
糜蛋白酶测试盒实验操作
糜蛋白酶，又称胰凝乳蛋白酶，是胰腺分泌的一种蛋白水解酶，能迅速分解变性蛋白质。糜蛋白酶的功能与 胰蛋白酶相似，但是具有分解能力强、毒性低和不良反应小等优点。临床上糜蛋白酶用于痰液稀化，对脓性和非 脓性痰液均有效；也用于创伤或手术后伤口愈合，如白内障摘除。糜蛋白酶催化 BTEE 水解，产物在 256
木瓜蛋白酶的酶活性的测定
本方法仅适用于木瓜蛋白酶。 基本原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（底物）水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸，其释出量可用氢氧化钠液滴定，以此确定酶活力。酶活单位在25℃下，每分钟内能催化分解1umol底物的酶量，称为1单位。试液制备1、底物溶液：准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.
蛋白质浓度测定－FolinPhenol－(Lowry)测定法
目的要求(1)学习Folin-phenol法测定蛋白质含量的原理及方法。(2)制备标准曲线，测定未知样品中蛋白质含量。原理目前蛋白质含量测定有两类方法，一类是利用蛋白质的物理化学性质，如折射率、比重、紫外吸收等测定得知;另一类是利用化学方法测定蛋白质含量，如微量凯氏定氮、双缩脉反应、Folin-ph
蛋白酶的作用及蛋白酶的种类
蛋白酶是一种活性酶，它分为很多种，每种都可以用作不同的地方。下面我为大家带来了蛋白酶的作用，仅供参考，谢谢阅读。 蛋白酶的种类 1.木瓜蛋白酶 木瓜蛋白酶，是一种蛋白水解酶，可将抗体分子水解为3个片段。是番木瓜中含有的一种低特异性蛋白水解酶，活性中心含半胱氨酸，属巯基蛋白酶，应用于啤酒及
关于糜蛋白酶的效价测定介绍
1、底物溶液的制备 取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯23.7mg，置100ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液（取0.067mol/L磷酸二氢钾溶液38. 9ml与0.067mol/L磷酸氢二钠溶液61.1ml，混合，pH值为7.0）50ml，温热使溶解，冷却后再稀释至刻度，摇匀。冰冻保存，但不得反复冻融。
角蛋白酶的活性测定方法介绍
角蛋白不溶于水及大部分有机溶剂，使得角蛋白酶活性测定比一般蛋白酶困难。常用测定角蛋白酶的原理是以底物水解后释放的氨基酸的量来确定角蛋白酶的活性。目前测定角蛋白酶的方法主要有三种，一种是直接用角蛋白粉作为底物进行测定，涂国全等（1998）曾以羽毛粉作为测定角蛋白酶的底物[59]。第二种是使用经过修
木瓜蛋白酶的酶活测定方法
25℃恒温条件下，取25mL烧杯装在pH自动滴定仪上，加底物溶液3.75mL、3mol/L氯化钠溶液2.50mL、重蒸馏水1.25mL，混合后加入待测酶液后立即计时，用0.1mol/L氢氧化钠在电磁搅拌下连续滴定以保持pH6.2，记下每分钟所耗0.01mol/L氢氧化钠毫升数。同时进行空白校正。
胃蛋白酶片的效价测定方法
照紫外可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品5片,置研钵中,加盐酸溶液适量研磨均匀,全量转移至250m量瓶中,用盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,精密量取适量,用盐酸溶液定量稀释制成每1ml中约含0.2~0.4单位的溶液。盐酸溶液、对照品溶液与测定法见胃蛋白酶效价测定项下
维生素B2－(核黄素)－荧光测定法实验_荧光测定法1
实验方法原理核黄素能形成一种具有黄绿色荧光的黄色溶液。它在稀溶液中，440～500 nm波长下测定的荧光强度与核黄素的浓度成正比。根据其在还原后的荧光差数，可测定核黄素的含量。实验材料核黄素试剂、试剂盒高锰酸钾溶液 荧光红钠 硫代硫酸钠 冰醋酸仪器、耗材荧光分光光度计 玻璃器实验步骤溶液配制：1.
维生素B2－(核黄素)－荧光测定法实验_荧光测定法2
实验方法原理核黄素在pH 4～9 的条件下，用450 nm波长的光激发，可发出波长为520 nm的荧光。在核黄素的含量为0.1～10 μg范围内，荧光的强度，与核黄素浓度成正比，硫代硫酸钠可消除核黄素的荧光性。实验材料核黄素试剂、试剂盒荧光红钠 硫代硫酸钠 盐酸仪器、耗材荧光分光光度计 容量瓶实验步
什么是蛋白酶？及蛋白酶的用途
蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称。按其降解多肽的方式分成内肽酶和端肽酶两类。前者可把大分子量的多肽链从中间切断,形成分子量较小的朊和胨;后者又可分为羧肽酶和氨肽酶,它们分别从多肽的游离羧基末端或游离氨基末端逐一将肽链水解生成氨基酸。
测定尿胰蛋白酶有哪些意义？
（1）胰蛋白酶原的分子量比较小（25kd），很容易由肾小球滤出，但是肾小管对胰蛋白酶原－2的回吸收低于胰蛋白酶原－1，尿中前者的浓度较大。（2）在急性胰腺炎时尿中胰蛋白酶原－2的浓度明显升高。有报道急性胰腺炎时尿胰蛋白酶原－2的特异性为95%，敏感性为94%，说明其优于淀粉酶，是一个比较敏感而特异的
牛乳中制备酪蛋白的原理和方法
酪蛋白定义：牛奶中的主要蛋白质，由α、β、γ和κ酪蛋白组成，其氨基酸组成和电泳行为有所不同。营养价值较高，经酸化或凝乳酶处理后沉淀。α和β酪蛋白有较多的丝氨酸被磷酸化，形成钙结合位点。原理牛乳和羊乳中含丰富的蛋白质，其中主要是酪蛋白。酪蛋白在羊乳罩中约占总蛋白量3/4，牛乳中约占总蛋白量的5/6。酪
利福平的测定法
临用新制或存放于2～8℃条件下6小时内使用。取本品适量，精密称定，加乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液；精密量取适量，用乙腈-水（1：1）定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取利福平对照品适量，精密称定，同法测定。按
尿胰蛋白酶的测定的临床意义
（1）胰蛋白酶原的分子量比较小（25kd），很容易由肾小球滤出，但是肾小管对胰蛋白酶原－2的回吸收低于胰蛋白酶原－1，尿中前者的浓度较大。 （2）在急性胰腺炎时尿中胰蛋白酶原－2的浓度明显升高。 有报道急性胰腺炎时尿胰蛋白酶原－2的特异性为95%，敏感性为94%，说明其优于淀粉酶，是一个比较
胰蛋白酶的制备及活力的测定1
目的要求1．学习胰蛋白酶的纯化及其结晶的基本方法。2．了解酶的活性与比活性的概念。实验原理胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中，在Ca2+的存在下，被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活，从肽链N端赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开，失去一段六肽，分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶。胰
胰蛋白酶的制备及活力的测定(1)
实验原理胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中，在Ca2+的存在下，被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活，从肽链N端赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开，失去一段六肽，分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶原的分子量约为24000，其等电点约为pH8.9，胰蛋白酶的分子量与其酶原接
胰蛋白酶的制备及活力的测定(2)
三、仪器食品加工机和高速分散器；研钵；大玻璃漏斗；布氏漏斗；抽滤瓶；纱布；恒温水浴；紫外分光光度计；秒表；pH试纸。操作方法一、猪胰蛋白酶制备（一）猪胰蛋白酶原的提取猪胰脏1.0Kg（新鲜的或杀后立即冷藏的），除去脂肪和结缔组织后，绞碎。加入2倍体积预冷的乙酸酸化水（pH2.5）于10～15℃搅拌提
胰蛋白酶的制备及活力的测定2
（9）0.8 mol/L pH9.0硼酸缓冲液：取20ml 0.8 mol/L硼酸溶液，加80ml 0.2 mol/L四硼酸钠溶液，混合后，用pH计检查校正。（10）0.4 mol/L pH9.0硼酸缓冲液（用0.8 mol/L稀释1倍即可）；（11）0.2 mol/L pH8.0硼酸缓冲液：取70
生化检测项目唾液富酪蛋白介绍
唾液富酪蛋白介绍： 富酪蛋白是唾液中一族富含酪氨酸和脯氨酸的磷酸蛋白，其分子量为5.38kD，等电点为pH4.22。唾液富酪蛋白正常值： 2-6μmol/L。唾液富酪蛋白临床意义： 富酪蛋白能够维持唾液为一种过饱和的钙和磷酸盐溶液，这种唾液可防止釉质脱矿，刺激脱矿的牙釉质再矿化，使新萌出的牙齿
中性蛋白酶测试盒实验原理
中性蛋白酶测试盒实验原理 测定意义：NP在一定的温度和中性pH条件下，催化水解蛋白质。由于其安全无毒、水解能力强、作用范围广等特点，中性蛋白酶常用于食品、饲料、化妆品和营养保健品生产。 测定原理：中性条件下，NP催化酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在680nm有特
氰化高铁血红蛋白测定法的概述
血红蛋白测定常用的方法按原理大致分为4类：全血铁法，比重法、折射仪法，血气分析法，比色法。 临床常用比色法，有HiCN测定法、十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法、碱羟血红蛋白测定法、叠氮高铁血红蛋白测定法、溴代十六烷基三甲胺血红蛋白测定法等。 [2] 为统一Hb测定方法，1966年国际血液学标准化
熔点测定法的测定原理
熔点是指一种物质按照规定的方法测定,由固相熔化成液相(有时会伴随分解)时的温度范围,是物质的一种物理常数。依法测定熔点可以鉴别药物,也可以检查药物的纯杂程度。根据被测物质的不同性质,《中国药典》二部附录“熔点测定法”项下列有3种不同的测定方法:第一法,用于测定易粉碎的固体药物;第二法,用于测定不易粉
余氯测定法
沉淀滴定法（氯离子的测定）1、所用试剂氯化钠标准溶液：（1毫升=1毫克Cl¯）：取基准试剂或优级纯氯化3—4克至于瓷坩埚中，于高温炉升温至500℃灼烧10分钟，然后在干燥器内内冷却至室温；准确称取1.649克氯化钠，现用少量蒸馏水溶解，再用蒸馏水稀释至1000毫升。硝酸银标准溶液（1毫升=1毫克Cl
馏程测定法
馏程系指一种液体照下述方法蒸馏,校正到标准压力[101.3kPa(760mmHg)]下，自开始馏出第5滴算起，至供试品仅剩3~4ml或一定比例的容积馏出时的温度范围。某些液体药品具有一定的馏程，测定馏程可以区别或检查药品的纯杂程度。用国产19标准磨口蒸馏装置一套。A为蒸馏瓶;B为冷凝管，馏程在130
熔点测定法
依照待测物质的性质不同，测定法分为下列3种。各品种项下未注明时，均系指第一法。折叠第一法测定易粉碎的固体药品取供试品适量，研成细粉，除另有规定外，应按照各药品项下干燥失重的条件进行干燥。若该药品为不检查干燥失重、熔点范围低限在135℃以上、受热不分解的供试品，可采用105℃干燥;熔点在135℃以下或
氰化高铁血红蛋白测定法操作
一、器具和试剂 采血工具，分光光度计，HiCN转化液。二、步骤 准备：打开分光光度计预热（预热时间由仪器类型决定），取5ml HiCN转化液与试管中；采血：一般为采用皮肤采血法，采血20μl后立即溶于含有转化液的试管中，充分震荡混匀，静置5分钟；测定：使用分光光度计测定混合液的吸光度A；计算：根据公
蛋白质含量测定法双缩脲法
本法系依据蛋白质分子中含有的两个以上肽键在碱性溶液中与Cu2+形成紫红色络合物，在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比，以蛋白质对照品溶液作标准曲线，采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。 本法快速、灵敏度低，测定范围通常可达1～10mg。本法干扰测定的物质主要有硫酸铵、三羟甲基氨基甲烷缓冲液
胃蛋白酶测定的临床意义是什么
胃蛋白酶分泌减少见于胃癌、萎缩性胃炎、慢性胃炎。胃扩张、慢性十二指肠炎、恶性贫血以及甲状腺功能减退等。 结果偏低可能疾病： 慢性胃炎
注射用胰蛋白酶的含量测定方法
照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品5支,分别加适量0.001mol/L盐酸溶液溶解,并全量转移至同一100ml量瓶中,用上述盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,精密量取适量,用上述盐酸溶液定量稀释制成每1ml中约含50~60单位的溶液。底物溶液与测定法见胰蛋白酶效价测定项下。