核纤层和富含核纤层组分的制备实验——哺乳动物组织细胞

实验材料组织试剂、试剂盒溶液 H仪器、耗材尼龙网匀浆器实验步骤组织制备1. 切碎组织,用加 250 mmol/L 蔗糖的 H 溶液清洗组织/组织培养物:溶液 H:15 mmol/L PIPES,pH 7.280 mmol/L KCl15 mmol/L NaCI0.5 mmol/L 精咪0.2 mmol/L 精胺1 mmol/L DTT1 mmol/L PMSF细胞匀浆2. 清洗后,在二倍体积的含 250 mmol/L 蔗糖的溶液 H 中机械破碎细胞。纯化细胞核组分粗品3. 将细胞匀浆粗品用几层(例如 4 层)溶液 H 浸透的 eheesecloth 或 120 μm 尼龙网过滤。4. 过滤后,加入 6 倍体积含 2.3 mol/L,蔗糖的溶液 H(加入溶液的蔗糖终浓度为 1.62 mol/L,一共为 9 倍体积的含蔗糖的溶液 H),然后用 Sorvall SS34 转头在 15000 r/min 离心 30 分钟从稀释的滤液粗品......阅读全文

纤溶酶原的概念和作用

纤溶酶原是血浆纤维蛋白水解酶无活性的前体。由组织激活物t-PA、尿激酶或凝血接触阶段多种酶激活,外源性激活物如链激酶也可起激活作用。纤溶酶降解纤维蛋白和纤维蛋白原,保持血管和分腺管通畅,进一步研究发现,纤溶酶功能还包括促胶原酶活性及在营养及细胞移动方面起辅助作用。

纤溶系统α2纤溶酶抑制抗原

α2-纤溶酶抑制抗原介绍: 2纤溶酶抑制物主要由肝脏合成,一种单链糖蛋白,是体内特异的抑制活性的丝氨酸蛋白酶,有限时性抑制纤溶酶的作用和抑制纤溶酶原与纤维蛋白结合,防止纤维蛋白被抗纤溶酶水解的作用。α2-纤溶酶抑制抗原正常值: 1-12ng/ml。α2-纤溶酶抑制抗原临床意义: (1) t-PA含量

研究揭示核纤层蛋白塑造三维基因组空间秩序机制

核纤层是紧贴内核膜内侧的蛋白网状结构,主要由核纤层蛋白(lamins)及其结合蛋白构成。人类的lamins在发育、衰老及疾病过程中扮演关键角色,分为由LMNA基因编码的A型和分别由LMNB1和LMNB2编码的B型。目前,在LMNA基因中已鉴定出超600种致病突变,这些突变可导致儿童早衰症、扩张型心肌

核被膜的定义

  外核膜胞质面附有核糖体,并与内质网相连,核周隙与内质网腔相通,可以说是内质网的一部分。外核膜上附着10nm的中间纤维(intermediate filament),可见核是被内质网和中间纤维相对固定的。  核周隙宽20~40nm,腔内电子密度低,一般不含固定的结构。  内核膜的内表面有一层网络状

Nature研究首次证明自噬可介导核内蛋白降解

        "自噬"这个词从字面意思来看就是自己吃自己,对于细胞来说就是不需要的细胞内成分被细胞自身降解的过程,关于自噬的研究已经有很多,但是最近一项发表在国际学术期刊Nature上的最新研究首次发现自噬可以介导细胞核内物质的降解,并且细胞核内发生的自噬在对抗癌症发生方面发挥一定作用,该项工作由

癌细胞能够快速修复细胞核破裂

  当不同的细胞穿过组织内部的狭窄空间时,它们经常变形,导致它们的细胞核在相关的压力下发生破裂。在一项新的研究中,来自美国康奈尔大学、德州大学MD安德森癌症中心以及荷兰癌症基因组中心和内梅亨大学的研究人员发现癌细胞有一种自我修复的快速恢复能力,但是细胞核变形和破解会破坏这些癌细胞的基因组完整性,这可

Nature:真核生物细胞核中染色质分离新机制

  在细胞核中基因组的活性部分与它的非活性部分在空间上分隔开来对于基因表达控制至关重要。在一项新的研究中,来自德国慕尼黑大学、美国麻省理工学院和马萨诸塞大学医学院的研究人员揭示了这种分离的主要机制,并颠覆了我们对细胞核的认识。相关研究结果近期发表在Nature期刊上,论文标题为“Heterochro

核基质的基本介绍

  核基质是核中除染色质与核仁以外的成分,包括核液与核骨架两部分。核液含水、离子和酶等无形成分。核骨架是由多种蛋白质形成的三维纤维网架,并与核被膜核纤层相连,对核的结构具有支持作用。核基质与DNA复制,RNA转录和加工,染色体组装及病毒复制等生命活动密切相关。  呈网络状的核基质纤维充满核空间,与核

线粒体和细胞核的制备与观察

实验概要本实验介绍了线粒体和细胞核制备的基本原理及操作。对分离得到的细胞核及线粒体进行了活性鉴定,有助于掌握用差速离心技术分离制备动物细胞核及线粒体的方法。实验原理利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来(差速离心技术)。线粒体是真核细胞

心房纤颤的预后和预防介绍

  预后  偶尔短暂发作又无明显不适者预后良好,亦不需治疗。持久房颤心率较快,心脏基础较差如AMI或并发难治性心衰者则预后较差。  预防  房颤与房扑绝大多数发生于冠心病、高血压性心脏病、肺心病、低血钾急性肺部感染或洋地黄中毒等,因此,应首先查清病因积极进行治疗。一般在房颤或房扑发作前,先出现频繁房

HeLa-细胞核提取物的制备实验

在本实验中,基本上是按Dignam等(1983)所述的方法从HeLa细胞制备核提取物的。这一基本方法大概是制备体外转录和DNA结合实验用因子的最常用的方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒甘油液氮MgCl2•6 H2O硫酸铵HeLa 细胞磷酸缓冲盐溶液(PBS)缓冲液

HeLa-细胞核提取物的制备实验

试剂、试剂盒 甘油液氮MgCl2•6 H2O硫酸铵HeLa 细胞磷酸缓冲盐溶液(PBS) 缓冲液 G缓冲液 H 缓冲液 DTM 缓冲液+0.1 ml L KCl实验步骤 材料HeLa 细胞(培养和保存条件见下文。我们也成功地使用过 CellexBiosciences 公司制备并冷冻的 HeLa 细胞

大气边界层和大气边界层厚度的定义

大气最底层,靠近地球表面、受地面摩擦阻力影响的大气层区域。大气流过地面时,地面上各种粗糙物体,如草、沙粒、庄稼、树木、房屋等会使大气流动受阻,这种摩擦阻力由于大气中的湍流而向上传递,并随高度的增加而逐渐减弱,达到某一高度后便可忽略。此高度称为大气边界层厚度,它随气象条件、地形、地面租糙度而变化,大致

纤溶酶的作用

1、降解纤维蛋白和纤维蛋白原2、水解多种凝血因子(Ⅱ.Ⅴ.Ⅶ.Ⅷ.Ⅹ.Ⅺ)3、使纤溶酶原转变为纤溶酶4、水解补体等

心房纤颤的简介

  心房纤颤(AF)是最常见的心律失常之一,是心房呈无序激动和无效收缩的房性节律,是由心房-主导折返环引起许多小折返环导致的房律紊乱,在老年人中十分常见。可见于所有的器质性心脏病患者,在非器质性心脏病患者也可发生房颤,发病率高持续时间长,还可引起严重的并发症,如心力衰竭和动脉栓塞。导致病人残疾或病死

核被膜的结构

  核被膜由内核膜(inner nuclear membrane)、外核膜(outer nuclear membrane)和核周隙(perinuclear space)三部分构成。核被膜上有核孔与细胞质相通。  核被膜(nuclear envelope)包裹在核表面,由基本平行的内层膜、外层膜两构成

高质量InAs(Sb)/GaSb核壳异质结纳米线阵列外延生长获进展

  一维半导体纳米线凭借其优越、独特的电学、光学、力学等特性,在材料、信息与通讯、能源、生物与医学等重要领域展现出广阔的应用前景。尤其是,基于半导体纳米线的晶体管具有尺寸小、理论截止频率高等优点,为未来在微处理器芯片上实现超大规模集成电路开拓了新的方向。在III-V族半导体材料中,InAs具有小的电

Cell解开细胞的程序密码

  来自慕尼黑大学(LMU)的研究人员在一项针对夜行动物视网膜细胞的研究中,取得了关于基因组DNA组装的一些基础认识,揭示了核膜影响细胞核结构和基因调控的机制。这一研究结果发表在1月31日的《细胞》(Cell)杂志上。   构成遗传物质的双链DNA分子缠绕着蛋白质复合物形成致密的“染色质”。

关于纤溶亢进的组成和特性介绍

  (1)纤溶亢进— 组织型纤溶酶原激活物(t-PA):t-PA是一种丝氨酸蛋白酶,由血管内皮细胞合成。t-PA激活纤溶酶原,此过程主要在纤维蛋白上进行。  (2)纤溶亢进— 尿激酶型纤溶酶原激活物(U-PA):u-PA由肾小管上皮细胞和血管内皮细胞产生。U-PA可以直接激活纤溶酶原而不需要纤维蛋白

细胞核的组成物质

  前言  在HE染色切片上,细胞核以其强嗜碱性而成为细胞内最醒目的结构。由于它含有DNA--遗传信息,因此,借DNA复制与选择性转录,细胞核成为细胞增殖、分化、代谢等活动中关键环节之一。人体绝大多数种类的细胞具有单个细胞核,少数无核、双核或多核。核的形态在细胞周期各阶段不同,间期核的形态在不同细胞

细胞核的组成物质

  核被膜  核被膜使细胞核成为细胞中一个相对独立的体系,使核内形成一相对稳定的环境。同时,核被膜又是选择性渗透膜,起着控制核和细胞质之间的物质交换作用。  核被膜(nuclear envelope)包裹在核表面,由基本平行的内膜、外膜两层膜构成。两层膜的间隙宽10~15nm,称为核周隙(perin

酵母细胞核制备实验——差速离心法

细胞核(nucleus)是细胞中最大、最重要的细胞器(初中老教材认为细胞核不是细胞器,大学细胞生物学则认为是细胞器,这里以大学教材为准),它是由核膜(nuclear membrane)、核骨架(nuclear scaffold)、核仁(nucleolus) 几部分组成。实验材料酵母菌试剂、试剂盒细胞

继发性纤溶亢进实验室检查

  由于此期血浆FDP含员增多,凝血酶原时间延长(>25,);血浆鱼精蛋白副凝试验(31-试验)阳性;优球蛋自溶解时间缩短(< 120min),Fi试验效价大于I: 16,因DIC为一个动态的发生发展过程,各期之问并无明确的界限。可有部分吹叠与交叉。上述典型的DIC的发展过程常在慢性DI(:时出现。

CIGS薄膜太阳电池吸收层制备和性能研究

黄铜矿相铜铟镓硒(CuInxGa1-xSe2, CIGS)多晶化合物半导体以其极高的光吸收系数、可调的禁带宽度和低廉的制备成本作为薄膜型太阳电池的吸收层备受光伏研究工作者的青睐。但是当前研究大部分采用真空方法作为薄膜制备的主要手段,该类方法虽然可以使太阳电池获得较高的光电转换效率,但较高的生产成本依

继发性纤溶亢进的实验室检查

  由于此期血浆FDP含员增多,凝血酶原时间延长(>25,);血浆鱼精蛋白副凝试验(31-试验)阳性;优球蛋自溶解时间缩短(< 120min),Fi试验效价大于I: 16,因DIC为一个动态的发生发展过程,各期之问并无明确的界限。可有部分吹叠与交叉。上述典型的DIC的发展过程常在慢性DI(:时出现。

酵母细胞核制备

实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 细胞核缓冲液Ficoll缓冲液仪器、耗材 匀浆机实验步骤 1.  将酵母菌接种于YPD培养基(100 ml 到20 L),剧烈摇动或强制通气条件下培养至对数中期(OD600≈1~5)。培养物在预称重的离心瓶中于4℃, 1 500 g 离心5 min。 2.  确定酵母细

原代细胞核基质的制备

试剂和器材: 1. 硫酸铵(含10mmol/L Tris-HCl,(pH7.4)及0.2mmol/L MgCl2的1mol/L与0.2mol/L硫酸铵溶液);2. 氯化镁(1mol/L储存液);3. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(无水乙醇配制的1mol/L储存液);4. 纯化的细胞核保存于含0.25mo

如何诊断心室纤颤?

  根据患者的临床表现和心电图,可明确诊断。心室扑动和颤动是快速导致患者死亡的心律失常,而且极少能自行中止,因此应尽快做出诊断,使患者能得到及时的救治。  1.心室扑动典型的心电图特点  连续而规则、宽大、畸形的QRS波,即心室扑动波。QRS波的时限长,在0.12s以上,QRS波呈向上向下的波幅似正

纤溶活性测定汇总

   纤溶活性的测定主要有:血浆鱼精蛋白副凝固试验(3P试验)、血浆D-二聚体测定、血清纤维蛋白降解产物(FDP)测定、凝血酶时间(TT)及甲苯胺兰纠正试验、血浆纤溶酶原、血浆组织纤溶酶原活化剂测定、血浆纤溶酶原活化抑制物测定、血浆α2纤溶酶抑制物测定等几种。临床上较长应用的有3P试验、FDP测定和

怎样诊断心房纤颤?

  1.病史  心悸可为阵发性也可为持续性,或仅有胸闷、疲劳感。  2.体征  心律绝对不齐,心音强弱不等和脉搏短绌。  3.心电图  (1)P波消失代之以振幅、形态、节律不一的f波;频率350~600次/min,f波可以相当明显类似不纯房扑;也可以纤细而难以辨认。  (2)R-R间距绝对不规则。患