PCR测定支原体

实验材料Taq DNA多聚酶引物阳性对照DNA脱氧核苷三磷酸混合物三磷酸琼脂糖1.3%TAE胶试剂、试剂盒磷酸缓冲盐溶液液Tris醋酸EDTA6×加样缓冲液引物储备液仪器、耗材DNA抽提和纯化系统基质的DNA抽提试剂盒热循环仪实验步骤一、DNA 标本的收集和制备1. 需要检测支原体污染的细胞系,在收集样品前数天或至少在解冻后两周内,不能加任何抗生素。应保证支原体在培养上清中的效价在 PCR 测定范围之内。2. 收集 1 ml 贴壁细胞或悬浮细胞的培养上清液。这样收集的标本包含活的或死的细胞,其优点是一些支原体会明显地黏附在真核细胞上,甚至侵入细胞中。上清液可贮存在4°C 数天或 -20°C 数周。在样品溶化后,应立即操作。3. 上清液在 13000 g 离心 5 min,将沉淀用 1 ml D-PBSA (D-PBSA (磷酸缓冲盐溶液液):137 mmol/L NaCl,2.7 mmol/L KCl,8.1 mmol/L Na......阅读全文

PCR-测定支原体

实验材料 Taq DNA多聚酶引物阳性对照DNA脱氧核苷三磷酸混合物三磷酸琼脂糖1.3%TAE胶试剂、试剂盒 磷酸缓冲盐溶液液Tris醋酸EDTA6×加样缓冲液引物储备液仪器、耗材 DNA抽提和纯化系统基质的DNA抽提试剂盒热循环仪实验步骤 一、DNA 标本的收集和制备1. 需要检测支原体污染的细胞

PCR-测定支原体

实验材料Taq DNA多聚酶引物阳性对照DNA脱氧核苷三磷酸混合物三磷酸琼脂糖1.3%TAE胶试剂、试剂盒磷酸缓冲盐溶液液Tris醋酸EDTA6×加样缓冲液引物储备液仪器、耗材DNA抽提和纯化系统基质的DNA抽提试剂盒热循环仪实验步骤一、DNA 标本的收集和制备1. 需要检测支原体污染的细胞系,在收

PCR法检测支原体

实验方法原理PCR法的基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA链扩增延伸。实验材料细胞样品试剂、试剂盒dNTPTapDNA聚合酶琼脂糖矿物油支原体检测试剂盒仪器、耗材超净工作台PCR仪电泳仪凝胶成像分析系统台式离心机旋涡混悬器实验步骤1.

PCR法检测支原体

PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪器设

PCR法检测支原体

PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪

细胞支原体污染的PCR检测

支原体菌株来源:       M.Arginini ATCC23838 精氨酸支原体       M.FermentaneATCC19989发酵支原体       M.SalivariumATCC23064唾液支原体       M.HominisATCC23114人型支原体       M.Ora

细胞支原体污染的PCR检测

支原体菌株来源:M.Arginini ATCC23838 精氨酸支原体M.FermentaneATCC19989 发酵支原体M.SalivariumATCC23064唾液支原体M.HominisATCC23114人型支原体M.OraleATCC23714口腔支原体M.HyorhinisATCC290

支原体CCU测定

丁香园网友“园中木”要做支原体CCU,而不知道这个初始菌液的浓度如何选,因缺少标准的0.5麦氏浓度,所以比较困惑,看了相关文献有说将其定量到10的6次方左右,但又是如何定量的呢?网友“ljksbs”问答:这个我以前做过,只能用倍比稀释法:取12只无菌试管,每管预先加入1.8ml支原体选择性液体培养基

支原体(UU/MH)药敏测定方法

近来在zyh43所在的医院检验科做支原体检测中,遇到一些问题:用支原体(UU/MH)培养、药敏、定量检测试剂盒测得阳性的病人,用这种试剂盒测定的药敏中敏感的抗生素进行临床治疗,但是经过几个疗程的治疗,没有任何效果,支原体感染仍为阳性,因此对他的药敏检测结果产生怀疑,想用一种方法检测这种试剂盒的药敏是

套式PCR检测非淋球菌性尿道炎中生殖支原体和解脲支原体

[摘要] 目的:采用nPCR技术,对在本院确诊的非淋球菌性尿道炎(NGU)患者的泌尿生殖道分泌物标本进行检测,以探讨套式PCR(nPCR)技术在生殖支原体(Mg)和解脲支原体(Uu)检测中的作用和地位。方法:深圳市福田区NGU患者98例,宫颈或尿道口内拭子分泌物标本用nPCR进行DNA扩增,并与对照

关于血支原体抗体测定的简介

  血支原体抗体测定用于支原体感染性疾病的诊断和鉴别诊断。  本检验适应于肺炎的病因学诊断。  1.补体结合试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验:恢复期血清抗体呈4倍以上升高,滴度在1:32以上才有诊断意义。  2.冷凝集试验:恢复期血清补体结合抗体滴度大于或等于1:64,或前后两份血清滴度增加达4

微生物学技术:PCR法检测支原体

PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪

血支原体抗体测定的临床意义

  本检验适应于肺炎的病因学诊断。  1.补体结合试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验:恢复期血清抗体呈4倍以上升高,滴度在1:32以上才有诊断意义。  2.冷凝集试验:恢复期血清补体结合抗体滴度大于或等于1:64,或前后两份血清滴度增加达4倍以上可考虑支原体感染。  3.滴度轻度增高:可见于流行性

血支原体抗体测定的注意事项

  1.可采用补体结合试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验、间接免疫荧光试验、肺炎支原体膜蛋白抗体检测等方法进行检查,不同方法同时检测可提高阳性率。  2.补体结合试验所检测的抗体主要是IgM,抗体一般在发病1周升高,1个月达高峰,以后逐渐下降,再感染时阳性率低。  3.间接血凝试验主要检测血清肺炎

抗人型支原体抗体测定的概述

  支原体是泌尿生殖道中常见的微生物和条件致病菌,通过临床分析,解脲脲原体和人型支原体感染可导致非淋病性尿道炎(NGU)、宫颈炎、前列腺炎等疾病,并与男性不育、女性不孕、习惯性流产等有关。

肺炎支原体总抗体测定的概述

  肺炎支原体(myoplasma pneumonae,MP)是呼吸道感染的常见病原,尤其多见于儿童。可引起多种呼吸系统疾病,如支原体肺炎、咽炎、气管炎、支气管炎等。肺炎支原体感染还可引起全身多系统损害:①泌尿系统疾病,如急性肾炎、肾炎性肾病等;②神经系统疾病,如脑膜脑炎、无菌性脑膜炎、周围神经炎、

肺炎支原体总抗体测定的基本介绍

  肺炎支原体(myoplasma pneumonae,MP)是呼吸道感染的常见病原,尤其多见于儿童。可引起多种呼吸系统疾病,如支原体肺炎、咽炎、气管炎、支气管炎等。肺炎支原体感染还可引起全身多系统损害:  ①泌尿系统疾病,如急性肾炎、肾炎性肾病等;  ②神经系统疾病,如脑膜脑炎、无菌性脑膜炎、周围

免疫学实验血支原体抗体测定介绍

  血支原体抗体测定介绍:  血支原体抗体测定用于支原体感染性疾病的诊断和鉴别诊断。  血支原体抗体测定正常值:  阴性。  血支原体抗体测定临床意义:  本检验适应于肺炎的病因学诊断。  1.补体结合试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验:恢复期血清抗体呈4倍以上升高,滴度在1:32以上才有诊断意义

临床化学检查方法介绍血支原体抗体测定介绍

血支原体抗体测定介绍:  血支原体抗体测定用于支原体感染性疾病的诊断和鉴别诊断。血支原体抗体测定正常值:  阴性。血支原体抗体测定临床意义:  本检验适应于肺炎的病因学诊断。  1.补体结合试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验:恢复期血清抗体呈4倍以上升高,滴度在1:32以上才有诊断意义。  2.冷

肺炎支原体总抗体测定的临床意义

  肺炎支原体抗体滴度≥1∶160为阳性,提示肺炎支原体近期感染。肺炎支原体感染宿主后与免疫系统相互作用,能产生广泛的异常免疫反应,并可刺激B细胞产生特异性IgG和IgM类抗体。IgM抗体出现较早,一般在感染后1周左右出现,3~4周达高峰。由于肺炎支原体感染的潜伏期一般为2~3周,当患者出现症状而就

关于血支原体抗体测定的注意事项介绍

  1.可采用补体结合试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验、间接免疫荧光试验、肺炎支原体膜蛋白抗体检测等方法进行检查,不同方法同时检测可提高阳性率。  2.补体结合试验所检测的抗体主要是IgM,抗体一般在发病1周升高,1个月达高峰,以后逐渐下降,再感染时阳性率低。  3.间接血凝试验主要检测血清肺炎

支原体培养

支原体常用培养基为PPLO,很多公司都有出售.但血清(常用马血清或猪血清)和抗生素(醋酸跎)你要自己加.你可以查查.还有改良的Frey's培养基,常用的微生物实验技术书上都可以查到的。可以自己配制的。在液体培养基中通常要加入酚红做指示剂的,当培养基由红色变为黄色时,即可判定支原体的生长程度。

支原体PCR检测试剂盒的使用说明以及注意事项

1:样品准备:取1毫升细胞培养上清(贴壁和悬浮细胞都可以,最好已培养48小时以上),在16000g离心5分钟,小心弃去上清,避免丢失沉淀(沉淀量有可能很少,目视看不到)。将沉淀用无菌PBS重悬,在16000g离心5分钟,同样小心弃去上清,如此反复用无菌PBS洗三次。最后将获得的沉淀用100微升超纯水

简述肺炎支原体总抗体测定的临床意义

  肺炎支原体抗体滴度≥1∶160为阳性,提示肺炎支原体近期感染。肺炎支原体感染宿主后与免疫系统相互作用,能产生广泛的异常免疫反应,并可刺激B细胞产生特异性IgG和IgM类抗体。IgM抗体出现较早,一般在感染后1周左右出现,3~4周达高峰。由于肺炎支原体感染的潜伏期一般为2~3周,当患者出现症状而就

抗人型支原体抗体测定有哪些注意事项

  健康人也存在支原体阳性的情况,如无临床表现不需特别治疗。

Microsart®-AMP支原体试剂盒的验证测试

引言作为世界上最小的细菌之一,支原体能够独立繁殖。它们属于柔膜菌纲,生长非常缓慢,且为寄生。细胞培养物的污染仍是一个主要问题。一系列生理和生化参数受细胞培养物中支原体的影响。支原体感染会导致细胞的代谢、生长、活力、大分子合成、形态等发生变化,因此对细胞培养物进行灵敏的常规污染检测是必不可少的。传统的

抗人型支原体抗体测定的临床意义是什么

  人型支原体感染可导致非淋病性尿道炎(NGU)、宫颈炎、前列腺炎等疾病,并与男性不育、女性不孕、习惯性流产等有关

血支原体抗体测定的临床意义及注意事项

  临床意义  本检验适应于肺炎的病因学诊断。  1.补体结合试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验:恢复期血清抗体呈4倍以上升高,滴度在1:32以上才有诊断意义。  2.冷凝集试验:恢复期血清补体结合抗体滴度大于或等于1:64,或前后两份血清滴度增加达4倍以上可考虑支原体感染。  3.滴度轻度增高:

支原体的检测

实验材料 细胞仪器、耗材 培养瓶载物片盖片显微镜实验步骤 1.  标本制备用尖镊子从培养瓶中直接取出预先置入的支持物(长形盖片;24 小时前置入),令细胞面向上,置放在载物片上,再覆以24 mmX 36 mm的较大盖片;如不用支持物培养法,也可取少许培养液滴在载物片上,再覆以盖片法观察亦可。2.  

荧光检测支原体

实验方法原理在无抗生素情况下,至少将细胞培养一周,将培养上清转移至处于对数生长早期的指示细胞中,孵育 3~5d ,将细胞固定和染色,寻找细胞核之外的荧光。实验材料来自于7天单层培养的无抗生素的细胞培养上清液或经离心后的上清液指示细胞试剂、试剂盒Hoechst 33258 染料BSS-PRD-PBSA