电子显微镜生物标本的制备及观察实验_透射电子显微镜
实验方法原理电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具,它以电子束为照明源,利用电子流具有波动的性质,在电磁场的作用下,电子改变前进轨迹,产生偏转、聚焦,因而电子束透过标本后在电磁透镜的作用下可放大成像。高速运动的电子流其波长远比光波波长短,所以电镜分辨率远比光镜高,可达0.14 nm,放大倍率可达80万倍。由热阴极发射的电子在20~100千伏加速龟压作用下,经聚光镜聚焦成束,投射到很薄的标本上,并与标本中各种原子的核外电子发生碰撞,造成电子散射,在细胞质量和密度较大的部位,电子散射度强,成像较暗。在质量、密度较小处电子散射弱,成像较亮,结果在荧光屏上形成与细胞结构相应的黑白图像。实验材料家兔试剂、试剂盒透射电子显微镜超薄切片机解剖镜震荡器恒温箱干燥器离子镀膜机单面刀片铜网解剖器材仪器、耗材乙醚戊二醛二甲砷酸钠缓冲液锇酸乙醇丙酮环氧树脂包埋剂醋酸铀染液柠檬酸铅染液单宁酸乙酸异戊脂实验步骤一、取材1. 取活兔用乙醚麻醉,迅速......阅读全文
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I,其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁,因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
近年来发现,虽然人的端着丝粒染色体短臂是28S、18S、和5.8S rRNA基因存在部位,称核仁形成区,但银染的物质不是rDNA和rRNA,而是与活性的rDNA转录有关的一类酸性蛋白质,容易将Ag离子还原为Ag的颗粒,从而在核仁形成区镀上银、呈棕黑色,称为银染核仁形成区。实验方法原理生化和免疫化学研
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I,其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁,因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活性。实验材料 HL-60细胞HeLa细胞试剂、试剂盒 Carnoy固定液HCl甲酸AgNO3蛋白胶硫代硫酸钠戊二醛乙醇丙酮醋酸铀柠檬酸铅染液仪器、耗材
关于透射电子显微镜的观察室介绍
透射电镜的最终成像结果,显现在观察室内的荧光屏上,观察室处于投影镜下,空间较大,开有1~3个铅玻璃窗,可供操作者从外部观察分析用。对铅玻璃的要求是既有良好的透光特性,又能阻断X线散射和其他有害射线的逸出,还要能可靠地耐受极高的压力差以隔离真空。 由于电子束的成像波长太短,不能被人的眼睛直接观察
培养细胞的电子显微镜观察实验
一、透射观察法透射观察必须切片,根据培养细胞种类和培养方法不同分原位切片和消化分离切片两种。 1. 在用玻璃瓶培养细胞做透射观察时,做原位切片非常复杂。只能采用消化法把细胞制成悬液才能进行包埋和切片。其过程为:消化分离细胞、固定、包埋、切片和观察几
培养细胞的电子显微镜观察实验
实验方法原理做透射电镜观察需进行切片、固定和包埋细胞过程,与一般组织切片法大体相似,其最大的难题是如何把细胞完整无损地从培养瓶皿壁上包埋下来。自从定型产品塑料薄膜问世后,这一困难已被克服。应用无菌塑料薄膜是极其理想的支持物,比用盖玻片、微孔滤纸、云母和卵壳膜等支持物都好。把细胞直接培养在塑料薄膜上,
培养细胞的电子显微镜观察实验
实验方法原理 做透射电镜观察需进行切片、固定和包埋细胞过程,与一般组织切片法大体相似,其最大的难题是如何把细胞完整无损地从培养瓶皿壁上包埋下来。自从定型产品塑料薄膜问世后,这一困难已被克服。应用无菌塑料薄膜是极其理想的支持物,比用盖玻片、微孔滤纸、云母和卵壳膜等支持物都好。把细胞直接培养在塑料薄膜上
透射电子显微镜观察前准备实验——转移支持膜至载网
试剂、试剂盒无菌水仪器、耗材瓷漏斗载网(铜网)支持膜乳胶管止水夹无菌镊子滤纸红外线灯大头针(选用)平皿实验步骤常用方法有二:法一:1. 将洗净的网放入瓷漏斗中,漏斗下套上乳胶管,用止水夹控制水流,缓缓向漏斗内加入无菌水,其量约高 1 cm;2. 用无菌镊子尖轻轻排除铜网上的气泡,并将其均匀地摆在漏斗
扫描电子显微镜观察生物试样叙述
进行从高倍到低倍的连续观察。放大倍数的可变范围很宽,且不用经常对焦。扫描电子显微镜的放大倍数范围很宽(从5到20万倍连续可调) ,且一次聚焦好后即可从高倍到低倍,从低倍到高倍连续观察,不用重新聚焦,这对进行事故分析特别方便。 观察生物试样。因电子照射而发生试样的损伤和污染程度很小。同其他方式的
关于透射电子显微镜制备样品要求的介绍
1.粉末样品基本要求 (1)单颗粉末尺寸最好小于1μm; (2)无磁性; (3)以无机成分为主,否则会造成电镜严重的污染,高压跳掉,甚至击坏高压枪; 2.块状样品基本要求 (1)需要电解减薄或离子减薄,获得几十纳米的薄区才能观察; (2)如晶粒尺寸小于1μm,也可用破碎等机械方法制成
洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验
实验方法原理 有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中,细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中
病毒透射电镜病毒标本制备实验——悬滴标本法
实验方法原理病毒等微小颗粒标本可取其培养物经稀释或分离提纯后直接滴于附有支持膜的载网上用电镜观察。实验材料病毒试剂、试剂盒稀释液仪器、耗材透射电镜实验步骤悬液应尽量除去杂质如培养基残渣,细胞碎片、糖类及各种盐类的结晶等,这些杂质的存在会干扰染色及电镜观察。用该法的缺点是由于电子穿透能力很弱,只能观察
关于透射电子显微镜检测的粉末样品的制备
1.透射电子显微镜检测的粉末样品的制备—选择高质量的微栅网(直径3mm),这是关系到能否拍摄出高质量高分辨电镜照片的第一步;(注:高质量的微栅网本实验室还不能制备,是外购的,价格20元/只;普通碳膜铜网免费提供使用。) 2.透射电子显微镜检测的粉末样品的制备—用镊子小心取出微栅网,将膜面朝上(
病毒透射电镜病毒标本制备实验4
直接取材镜检法实验材料病毒试剂、试剂盒磷钨酸仪器、耗材透射电镜实验步骤为了进行天花、水痘、疱疹等病毒的临床快速诊断,可用毛细吸管直接刺入病人皮肤疱疹内吸取少量泡液,立即滴于有膜的铜网上,稍干后即用 1%-2% 的磷钨酸溶液进行负染,待干后立即用电镜观察。于电镜下常可于短时间内发现典型的病毒颗粒。注意
病毒透射电镜病毒标本制备实验1
悬滴标本法实验方法原理病毒等微小颗粒标本可取其培养物经稀释或分离提纯后直接滴于附有支持膜的载网上用电镜观察。实验材料病毒试剂、试剂盒稀释液仪器、耗材透射电镜实验步骤悬液应尽量除去杂质如培养基残渣,细胞碎片、糖类及各种盐类的结晶等,这些杂质的存在会干扰染色及电镜观察。用该法的缺点是由于电子穿透能力很弱
病毒透射电镜病毒标本制备实验3
免疫吸附法实验方法原理有时由于病毒量少,用普通悬滴法在电镜下难以发现稀少散在的病毒粒子,则可用免疫吸附电镜法。主要是利用相应的病毒抗血清来吸附病毒,用本法检测病毒,快速、灵敏、特异性强,是可靠的电镜病毒诊断技术之一,也可用于病毒快速诊断。实验材料病毒试剂、试剂盒磷钨酸仪器、耗材透射电镜实验步骤将抗病
病毒透射电镜病毒标本制备实验2
实验方法原理病毒研究中用磷钨酸染色后发现在黑色背景中病毒粒子如同一个亮晶晶的「空洞」。尔后用磷钨酸对飞噬菌体染色也见到同样的现象,即将这种现象称为「负染色」。负染色是一种反衬染色,即高密度物质如重金属磷钨酸、醋酸铀等在透射电镜下形成黑色的背景反衬低密度的标本如病毒为白色透亮,从而清楚地显示出被衬物的
透射电子显微镜
1、基本原理 在光学显微镜下无法看清小于0.2µm的细微结构,这些结构称为亚显微结构(submicroscopic structures)或超微结构(ultramicroscopic structures;ultrastructures)。要想看清这些结构,就必须选择波长更短的光源,
透射电子显微镜
因电子束穿透样品后,再用电子透镜成像放大而得名。它的光路与光学显微镜相仿,可以直接获得一个样本的投影。通过改变物镜的透镜系统人们可以直接放大物镜的焦点的像。由此人们可以获得电子衍射像。使用这个像可以分析样本的晶体结构。在这种电子显微镜中,图像细节的对比度是由样品的原子对电子束的散射形成的。由于电子需
透射电子显微镜
1、基本原理在光学显微镜下无法看清小于0.2µm的细微结构,这些结构称为亚显微结构(submicroscopic structures)或超微结构(ultramicroscopic structures;ultrastructures)。要想看清这些结构,就必须选择波长更短的光源,以提高显微镜的分辨
透射电子显微镜
透射电子显微镜,简称透射电镜,英文名为Transmission Electron Microscope,缩写为TEM,是一种利用高速运动的电子束作为光源,穿透固体样品,再经过电磁透镜成像的显微镜。透射电镜由电子光学系统、观察记录系统、真空和冷却系统以及电源系统等组成。电子光学系统又可分为照明系统和成
扫描电子显微镜样品制备实验
实验方法原理 1. 生物样品的精细结构易遭破坏。因此在进行制样处理和进行电镜观察前必需进行固定。以使其能最大限度地保持其生活时的形态。而采用水溶性、低表面张力的有机溶液如乙醇等对样品进行梯度脱水,也是为了在对样品进行干燥处理时尽量减少由表面张力引起的其自然形态的变化。2. 目前采用最多、效果
扫描电子显微镜样品制备实验
实验方法原理1. 生物样品的精细结构易遭破坏。因此在进行制样处理和进行电镜观察前必需进行固定。以使其能最大限度地保持其生活时的形态。而采用水溶性、低表面张力的有机溶液如乙醇等对样品进行梯度脱水,也是为了在对样品进行干燥处理时尽量减少由表面张力引起的其自然形态的变化。2. 目前采用最多、效果最好的方法
电子显微镜观察肿瘤细胞凋亡——电子显微镜观察法
实验材料肿瘤细胞悬液试剂、试剂盒戊二醛PBS溶液四氧化锇醋酸铀蒸馏水酒精树脂柠檬酸铅仪器、耗材离心机离心管冰箱烧杯洗瓶电子显微镜细胞凋亡与肿瘤发生的关系,其机制目前认为有以下几种可能性。1、基因水平上诱导凋亡基因如P53、bax、c-myc等失活以抑制凋亡基因过度表达。2、机体免疫反应诱导肿瘤细胞凋
扫描电镜生物标本制备实验
实验材料病毒试剂、试剂盒无仪器、耗材扫描电镜实验步骤1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点,在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本,因此,病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求:(1) 标本的预处理要求:①尽可能使标本的形貌和结构保持活体时的近似
扫描电镜生物标本制备实验
实验方法原理 实验材料 病毒试剂、试剂盒 无仪器、耗材 扫描电镜实验步骤 1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点,在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本,因此,病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求:(1) 标本的预处理要求:①尽可能使标
透射电子显微镜原理及结构(一)
透射电子显微镜 透射电子显微镜(英文:Transmission electron microscopy,缩写TEM),简称透射电镜,是把经加速和聚集的电子束投射到非常薄的样品上,电子与样品中的原子碰撞而改变方向,从而产生立体角散射。散射角的大小与样品的密度、厚度相关,因此可以形成明暗不同的影像。
透射电子显微镜原理及结构(二)
2、成像系统该系统包括样品室、物镜、中间镜、反差光栏、衍射光栏、投射镜以及其它电子光学部件。样品室有一套机构,保证样品经常更换时不破坏主体的真空。样品可在X、Y二方向移动,以便找到所要观察的位置。经过会聚镜得到的平行电子束照射到样品上,穿过样品后就带有反映样品特征的信息,经物镜和反差光栏作用形成一次
透射电子显微镜的特点及功能介绍
透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)是利用高能电子束充当照明光源而进行放大成像的大型显微分析设备。1933年,德国科学家卢斯卡(Ruska)和克诺尔(Knoll)研制出了世界上第一台透射电镜(见图1),并在1939年由西门子公司以这台电镜为样机,
透射电子显微镜的工作原理及结构
透射电镜的总体工作原理是:由电子枪发射出来的电子束,在真空通道中沿着镜体光轴穿越聚光镜,通过聚光镜将之会聚成一束尖细、明亮而又均匀的光斑,照射在样品室内的样品上;透过样品后的电子束携带有样品内部的结构信息,样品内致密处透过的电子量少,稀疏处透过的电子量多;经过物镜的会聚调焦和初级放大后,电子束进入下