银染核仁形成区的标本制备及观察实验
近年来发现,虽然人的端着丝粒染色体短臂是28S、18S、和5.8S rRNA基因存在部位,称核仁形成区,但银染的物质不是rDNA和rRNA,而是与活性的rDNA转录有关的一类酸性蛋白质,容易将Ag离子还原为Ag的颗粒,从而在核仁形成区镀上银、呈棕黑色,称为银染核仁形成区。实验方法原理生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I,其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁,因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活性。实验材料HL-60细胞HeLa细胞试剂、试剂盒Carnoy固定液HCl甲酸AgNO3蛋白胶硫代硫酸钠戊二醛乙醇丙酮醋酸铀柠檬酸铅染液仪器、耗材显微镜电子显微镜超薄切片机水浴箱离心机天平染色缸平皿乳头吸管离心管擦镜纸实验步骤一、中期染色体核仁形成区的银染和观察1. 取制备好的正常或肿瘤细胞染色体标本,直接放入装有5 N HCl溶液中,常温处理5分钟。2. 用自来水反复冲洗几次,甩干,标本面朝上......阅读全文
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
近年来发现,虽然人的端着丝粒染色体短臂是28S、18S、和5.8S rRNA基因存在部位,称核仁形成区,但银染的物质不是rDNA和rRNA,而是与活性的rDNA转录有关的一类酸性蛋白质,容易将Ag离子还原为Ag的颗粒,从而在核仁形成区镀上银、呈棕黑色,称为银染核仁形成区。实验方法原理生化和免疫化学研
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I,其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁,因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活性。实验材料 HL-60细胞HeLa细胞试剂、试剂盒 Carnoy固定液HCl甲酸AgNO3蛋白胶硫代硫酸钠戊二醛乙醇丙酮醋酸铀柠檬酸铅染液仪器、耗材
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I,其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁,因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I,其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁,因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活
银染核仁形成区的光镜和电镜标本制备及观察
实验原理 在细胞分裂中期核型中,人的端着丝粒染色体短臂区和在间期细胞核的核仁中有与银离子特异亲合物质,通过银染可以显示它们的致量,因此一直被人们所关注。近年来发现,虽然人的端着丝粒染色体短臂是 28S、18S、和 5.8S rRNA 基因存在部位,称核仁形成区(Nucleolar organizer
核酸染色实验——核仁组成区嗜银蛋白
实验方法原理核仁组成区是 DNA 的襻,具有核糖体基因(rDNA),在一定条件下可用银反应法进行定位,是通过银的聚合物沉积于胱氨酸和半胱氨酸的双硫键位置上,所以在镜下能够清楚可见颗粒状的核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水明胶粉双蒸水硝酸银仪
银染实验
试剂、试剂盒 甲醇(50% 和5%v v)二硫苏糖醇 AgNO3柠檬酸(固态)显影液实验步骤 试剂甲醇(50% 和5%v/v)10umol/L二硫苏糖醇(DTT)AgNO3(0.1%w/v)柠檬酸(固态)显影液操作程序此操作程序是根据Merril(1987)的方法修改而成。室温下,凝胶在旋转平台上缓
银染实验
试剂、试剂盒甲醇(50% 和5%v v)二硫苏糖醇AgNO3柠檬酸(固态)显影液实验步骤试剂甲醇(50% 和5%v/v)10umol/L二硫苏糖醇(DTT)AgNO3(0.1%w/v)柠檬酸(固态)显影液操作程序此操作程序是根据Merril(1987)的方法修改而成。室温下,凝胶在旋转平台上缓慢摇动
银染实验
银染实验 试剂、试剂盒 甲醇(50% 和5%v v) 二硫苏糖醇 AgNO3
人核仁形成区嗜银蛋白(AgNORs)试剂盒技术原理
检测范围: 48T 25 ng/L -800 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)水平。用纯化的人核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)抗
人核仁形成区嗜银蛋白(AgNORs)试剂盒技术原理
人核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)试剂盒技术原理 本文由:樊克生物专业技术人员提供!本试剂盒仅供研究使用。 检测范围: 48T 25 ng/L -800 ng/L 使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)含量。
人核仁形成区嗜银蛋白(AgNORs)试剂盒技术原理
人核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)试剂盒技术原理 本文由:樊克生物专业技术人员提供!本试剂盒仅供研究使用。 检测范围: 48T 25 ng/L -800 ng/L 使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)含量。
人核仁形成区嗜银蛋白(AgNORs)试剂盒技术原理
人核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)试剂盒技术原理 本文由:樊克生物专业技术人员提供!本试剂盒仅供研究使用。 检测范围: 48T 25 ng/L -800 ng/L 使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)含量。
银染实验用水指南
SDS聚丙烯酰胺凝胶染色是蛋白质研究的一个基础方法。染色方法有很多,实际应用中,考马斯亮蓝染色(考染)和银染是运用的最多的方法。考马斯亮蓝G250在游离状态下呈红色,它与蛋白质结合后变为蓝色,结合物在595 nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。银染实验中
银染实验的操作流程
实验目的检测聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质。实验原理在碱性条件下,用甲醛将蛋白带上的硝酸银(银离子)还原成金属银,以使银颗粒沉积在蛋白带上。染色的程度与蛋白中的一些特殊的基团有关,不含或者很少含半胱氨酸残基的蛋白质有时候呈负染。银染的详细机制还不是非常清楚。试剂:乙醇、冰醋酸(纯乙酸)、乙酸钠、硫代硫酸钠
洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验
实验方法原理 有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中,细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中
整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份,而保留膜的脂类成分,其结果,细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除,增加了标本的透明度,同时内质
电子显微镜生物标本的制备及观察实验
透射电子显微镜 扫描电子显微镜 实验方法原理 电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具,它以电子束为照明源,利用电子流具有波动的性质,在电磁场的作用下,
整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验
实验方法原理 高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份,而保留膜的脂类成分,其结果,细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除,增加了标本的透明度,同时内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体等生物膜系统被完整地保存下来。高锰酸钾固定剂在固定标本的过程中,能形成二氧化锰,可在细胞的各种膜结构的脂类亲水端形成微细的沉
电子显微镜生物标本的制备及观察实验
透射电子显微镜 扫描电子显微镜 实验方法原理 电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具,它以电子束为照明源,利用电子流具有波动的性质,在电磁场的作用下,
整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份,而保留膜的脂类成分,其结果,细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除,增加了标本的透明度,同时内质
整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验
实验方法原理高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份,而保留膜的脂类成分,其结果,细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除,增加了标本的透明度,同时内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体等生物膜系统被完整地保存下来。高锰酸钾固定剂在固定标本的过程中,能形成二氧化锰,可在细胞的各种膜结构的脂类亲水端形成微细的沉淀
银染
1.将固定液中的凝胶摇动过夜或至少1小时。2.将保温液中的凝胶轻微振荡2小时。3.去离子水清洗凝胶3次,每次20分钟。4.将硝酸银溶液中凝胶轻微振荡30分钟。5.用去离子水快速洗胶30秒。6.将定影液中凝胶摇动5~30分钟,时间由所加的蛋白质量决定。7.如果已经达到所需的颜色深度,将凝胶放到定影液中
PCR-产物电泳银染实验
实验方法原理 聚丙烯酰胺凝胶(PAG)是由丙烯酰胺单体和交联剂亚甲基双丙烯酰胺,在引发剂过硫酸胺(AP)提供自由基和催化剂四甲基乙二胺(TEMED)的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光线诱发聚合,所以其水溶液应贮藏在棕色瓶中,置低温 4℃ 更佳。由于其水溶液稳定性较差,通常 2 个月内用完为好。
PCR-产物电泳银染实验
常用的核酸电泳法有两种。①水平电泳:琼脂糖凝胶,紫外光下判断条带。此法经济省时,但分辨率较低。②垂直电泳:聚丙烯酰胺凝胶,可见光下判断条带。此法相对费力,但分辨率较高。分辨率高是聚丙烯酰胺电泳法被优先用于克隆性基因重排条带判断的关键。在聚丙烯酰胺凝胶上较宽弥散被判断为假阳性(阴性)的条带,在琼脂糖胶
PCR-产物电泳银染实验
实验方法原理聚丙烯酰胺凝胶(PAG)是由丙烯酰胺单体和交联剂亚甲基双丙烯酰胺,在引发剂过硫酸胺(AP)提供自由基和催化剂四甲基乙二胺(TEMED)的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光线诱发聚合,所以其水溶液应贮藏在棕色瓶中,置低温 4℃ 更佳。由于其水溶液稳定性
电子显微镜生物标本的制备及观察实验1
实验方法原理电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具,它以电子束为照明源,利用电子流具有波动的性质,在电磁场的作用下,电子改变前进轨迹,产生偏转、聚焦,因而电子束透过标本后在电磁透镜的作用下可放大成像。高速运动的电子流其波长远比光波波长短,所以电镜分辨率远比光镜高,可达0.14 nm,放大倍率可达80万
电子显微镜生物标本的制备及观察实验2
实验方法原理电子枪发射出的热电子,在加速电压作用下,形成高速电子流,经聚光镜和物镜的作用形成一极细的电子束,扫描于标本表面。入射电子与标本中的原子相互作用产生二次电子,二次电子的数量和每个电子的能量随标本表面形状及元素成分的不同而变化。二次电子被接收并经过放大,即可在荧光屏上显现出被放大的标本表面图
洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验_压片法
实验方法原理有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中,细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。 分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中
银染实验的操作注意事项
1.固定时间较长,则加一步水洗30min,以免胶太脆而破碎。2.甲醛在使用前加入。3.最好多配制一份显色液,第一次显色到溶液变混浊时换一份显色液,显色到点清晰。4.显色过程很快,要注意把握时间,避免染色过度。5.银染液和显色液需要预冷。6.所用器皿要很洁净,不用手直接接触,以免杂蛋白污染!7.清洗用