细胞表面抗原检测实验_免疫荧光抗体法
细胞表面有糖蛋白，这种蛋白质上有多糖，起到识别作用，当无法识别的糖蛋白进入血液就会引起身体的免疫反应引来严重后果，直接输血才会引起，如果喝就不会，因为胃都将其降解成氨基酸了，进入身体合成自身蛋白质就不会有事故。实验方法原理用人结肠癌细胞为免疫原，免疫小鼠，制得鼠抗人结肠癌细胞表面抗原（Ag）的单克隆抗体 IgG（第一抗体），二者可以发生特异性的抗原抗体反应，形成抗原抗体复合物，再加入市售（也可自制）的荧光标记的羊抗鼠IgG抗体（第二抗体），可以与复合物进一步发生抗原抗体反应（二次抗体反应），这样就可以在光显微镜下观察到这种抗原在结肠癌细胞表面的存在。实验材料HeLa细胞试剂、试剂盒1640培养液小牛血清甲醛固定液PBS液体石蜡仪器、耗材盖片载片培养瓶培养皿滤纸镊子吸管倒置显微镜荧光显微镜微量加样器实验步骤1. 将培养瓶中的结肠癌细胞接种到装有盖片的培养皿中，培养2~3天。2. 在倒置镜下观察到盖片上的细胞......阅读全文
如何进行免疫荧光三标？
做免疫荧光实验中，经常要进行免疫荧光的双标记实验，也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时，可以选择不同来源的一抗，然后再选择分别针对一抗的二抗，同时二抗上标记有不同的荧光团。 一般的双标记实验里，都会选择一个绿色的（如FITC、Cy2、Dylight 488等）荧光标
免疫资料——免疫学常用简称介绍
1：抗体查询常用名词Reactivity （物种与抗体反应）：Species with which the antibody reactsHost Species （宿主）：Host in which the antibody was generatedApplications（应用） ：Speci
亚细胞定位的免疫荧光法介绍
1、直接法 将标记的特异性荧光抗体，直接加在抗原标本上，经一定的温度和时间的染色，用水洗去未参加反应的多余荧光抗体，室温下干燥后封片、镜检。 2、间接法 如检查未知抗原，先用已知未标记的特异抗体（第一抗体）与抗原标本进行反应，用水洗去未反应的抗体，再用标记的抗抗体（第二抗体）与抗原标本反应
FCM对外周白细胞的免疫荧光分析
外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来，由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现，以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现，使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更
免疫荧光组织（细胞）化学染色方法：间接法
一、原理与意义 免疫荧光组织（细胞）化学染色方法——间接法，是一种荧光抗体染色法。该方法只需制备一种荧光抗体可以检出多种抗原，敏感性较高，操作方法较易掌握，而且能解决一些不易制备动物免疫血清的病原体（如麻疹）等的研究和检查，所以已被广泛应用于自身抗体和感染病人血清的试验。 二、操作流程 （一）双层法
FCM对外周白细胞的免疫荧光分析
外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来，由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现，以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现，使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更
流式细胞技术免疫荧光结果怎么判读
做单个细胞内蛋白质表达，或者单细胞多因子测定的实验还是FLOW方便，比如细胞周期蛋白表达和细胞周期的关系，免疫细胞PHENOTYPING，BCL-2在凋亡细胞内的表达等等。WB只能看一个细胞群体的蛋白表达量，因此精细度难以和FLOW相比。FLOW的缺点是仪器比较贵，而且要专门的技术人员来操作。
FCM对外周白细胞的免疫荧光分析
外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来，由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现，以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现，使得利用FCM的荧光组织化学
细胞核蛋白的免疫荧光染色方法
细胞免疫荧光的详细操作步骤1，取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里，PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小，因此夹取的时候要小心。2，4%多聚甲醛固定20分钟，PBS洗三遍。3，0.2%TritonX100通透10分钟，PBS洗三遍。4，与二抗相同宿主的血清封闭30分钟，P
怎么计数免疫荧光镜下的细胞数
阳性细胞计数为单位面积下阳性细胞数，你所说的是平均个数，还要计算面积（如1个高倍视野面积是多少平方），个/平方毫米，这样数据才有可比性。imagej可以计数，不过我不大会用，如果数量不多可以数，多了还是得用软件。imagej很强大，很有用，希望大家共同学习，共同提高。
流式细胞技术免疫荧光结果怎么判读
做单个细胞内蛋白质表达，或者单细胞多因子测定的实验还是FLOW方便，比如细胞周期蛋白表达和细胞周期的关系，免疫细胞PHENOTYPING，BCL-2在凋亡细胞内的表达等等。WB只能看一个细胞群体的蛋白表达量，因此精细度难以和FLOW相比。FLOW的缺点是仪器比较贵，而且要专门的技术人员来操作。
细胞核蛋白的免疫荧光染色方法
细胞免疫荧光的详细操作步骤1，取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里，PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小，因此夹取的时候要小心。2，4%多聚甲醛固定20分钟，PBS洗三遍。3，0.2%TritonX100通透10分钟，PBS洗三遍。4，与二抗相同宿主的血清封闭30分钟，P
微生物与免疫学表面抗原实验报告
细胞表面抗原检测实验实验原理用人结肠癌细胞为免疫原，免疫小鼠，制得鼠抗人结肠癌细胞表面抗原（Ag）的单克隆抗体 IgG（第一抗体），二者可以发生特异性的抗原抗体反应，形成抗原抗体复合物，再加入市售（也可自制）的荧光标记的羊抗鼠IgG抗体（第二抗体），可以与复合物进一步发生抗原抗体反应（二次抗体反应）
病原微生物染色实验——乙型肝炎表面抗原
实验方法原理乙型肝炎表面抗原（HBsAg）是由多肽组成的脂蛋白，由于抗原内含有丰富的二硫键成分，经过氧化剂而转变为磺酸，然后再与染色液产生较强的亲和力进行着色。通过地衣红（Orcein）染色法，能够较好地显示乙型肝炎表面抗原（HBsAg）。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水
免疫学实验乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）介绍
乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）介绍： 乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）指乙型肝炎病毒外壳部分所含的小球形颗粒与管型颗粒，现分为八种不同亚型和两种混合亚型。 乙型肝炎病毒表面抗原在乙型肝炎病毒感染早期出现于病人血循环中，可持续数月、数年乃至终身，是诊断乙型肝炎病毒感染最常用的指标。但在所谓乙
流式细胞仪检测细胞凋亡实验protocol
40年来，流式细胞术一直由多色流式主导。 尽管Fulwyler发明的初代仪器基于库尔特体积，但荧光在短短几年内成为流式细胞仪主导技术。 从20世纪80年代初到现在，技术开发人员一直致力于构建能够测量更多荧光参数（我们通常将其称为“颜色”）的仪器。 最开始，Göhde在1968年首次发表关于荧光
抗小肠杯状细胞抗体检测的注意事项
检查前禁忌：检验前请告知医生近期用药情况及特殊生理改变。 1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。 2、体检前一天的晚八时以后，应开始禁食12小时，以免影响检测结果。 3、抽血时应放松心情，避免因恐惧造成血管的收缩，增加采血的困难。 检查
抗小肠杯状细胞抗体检测的临床意义
阳性：高滴度的抗小肠杯状细胞抗体主要见于溃疡性结肠炎，阳性率达28%~39%。部分克罗恩病患者也可检出抗小肠杯状细胞抗体。在炎症性肠病患者的近亲中检出抗小肠杯状细胞抗体，预示易患炎症性肠病。 需要检查人群结肠炎患者。
自身抗体检测项目介绍抗中性粒细胞胞浆
抗中性粒细胞胞浆介绍: 抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)是存在于血液中的一种自身抗体,当中性粒细胞受抗原刺激后,胞浆中的α-颗粒释放蛋白酶-3、髓过氧化物酶物质及白细胞抗原生成,刺激机体而产生ANCA,现已证实该抗体是一组系统性坏死性血管炎的血清标志抗体,对血管炎的诊断、分类、鉴别诊断以及预后评估都
免疫荧光－一抗孵育时间37度2小时可以吗
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟3.PBS洗净:3min*34.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS5.PBS洗净:2*5min6.羊血清封闭：37度，20分钟7.一抗，4度过夜
免疫荧光－一抗孵育时间37度2小时可以吗
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟3.PBS洗净:3min*34.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS5.PBS洗净:2*5min6.羊血清封闭：37度，20分钟7.一抗，4度过夜
免疫荧光一抗孵育时间37度2小时可以吗
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟3.PBS洗净:3min*34.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS5.PBS洗净:2*5min6.羊血清封闭：37度，20分钟7.一抗，4度过夜
免疫荧光必备ProLong－Gold－－SlowFade－Gold抗淬灭效果比照明细
如果荧光染色的目标分子丰度比较低或者样本在强激发光下长时间放置，很容易出现明显的光漂白作用，即荧光淬灭作用。Life Technologies公司专门开发了 ProLong 和 SlowFade 两个系列抵抗荧光信号淬灭的试剂。其主要原理是可以有效避免荧光染色后的固定细胞或组织等样品不被氧化，从而防
免疫荧光－一抗孵育时间37度2小时可以吗
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟3.PBS洗净:3min*34.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS5.PBS洗净:2*5min6.羊血清封闭：37度，20分钟7.一抗，4度过夜
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1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟3.PBS洗净:3min*34.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS5.PBS洗净:2*5min6.羊血清封闭：37度，20分钟7.一抗，4度过夜
猪钩端螺旋体病的诊断鉴别
本病需在临诊症状和病理剖检的基础上，结合微生物学和免疫学诊断才能确诊。 1．微生物学诊断 病畜死前可采集血液、尿液。死后检查要在1h内进行，最迟不得超过3h，否则组织中的菌体大部分会发生溶解。可以采集病死猪的肝、。肾、脾和脑等组织，病料应立即处理，在暗视野显微镜下直接进行镜检或用免疫荧光抗体法
细胞凋亡检测实验——Caspase3活性检测法
实验方法原理Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（
免疫学实验抗着丝粒抗体介绍
抗着丝粒抗体介绍： ACA 抗着丝点抗体抗着丝点抗体是一种紧附于染色体着丝点的DNA蛋白结合体，在间期细胞上荧光染色型为散在斑点型。在细胞外染色体上着丝点部位呈现一对亮绿荧光。阴性 正常人无此抗体、系统件硬皮病患者血清中，ACA阳性时有较高的特异性，在ACA阳性的患者中CREST综合征(临
临床化学检查方法介绍抗着丝粒抗体介绍
抗着丝粒抗体介绍： ACA 抗着丝点抗体抗着丝点抗体是一种紧附于染色体着丝点的DNA蛋白结合体，在间期细胞上荧光染色型为散在斑点型。在细胞外染色体上着丝点部位呈现一对亮绿荧光。阴性 正常人无此抗体、系统件硬皮病患者血清中，ACA阳性时有较高的特异性，在ACA阳性的患者中CREST综合征(临床表现为
免疫学实验抗着丝粒抗体介绍
抗着丝粒抗体介绍：ACA 抗着丝点抗体抗着丝点抗体是一种紧附于染色体着丝点的DNA蛋白结合体，在间期细胞上荧光染色型为散在斑点型。在细胞外染色体上着丝点部位呈现一对亮绿荧光。阴性 正常人无此抗体、系统件硬皮病患者血清中，ACA阳性时有较高的特异性，在ACA阳性的患者中CREST综合征(临床表现为软组