四膜虫的保存实验—冷冻四膜虫的融解
实验材料细胞仪器、耗材培养基冷冻管实验步骤1. 将 25~50 ml 培养基预热至 30℃。2. 将冷冻管放入 38~40℃ 的热水浴中搅拌,快速温暖细胞,直接加入一些预热的培养基。3. 一旦沉淀层松动,将其倒入装有预热培养基的培养瓶中。4. 30℃ 过夜孵育,中速振摇。5. 次日检测细胞生存力。......阅读全文
性途径(结合)诱导实验
实验材料四膜虫试剂、试剂盒Tris仪器、耗材培养基培养瓶实验步骤培养物准备1. 每种交配型都在装有 100 ml 培养基的 1 L 培养瓶中接种 5 ml 最近转接过的短期贮存的四膜虫,用铝箔或棉絮塞子盖上培养瓶。2. 30℃ 培养至对数后期,通常这一培养为静止培养。在此条件下,细胞将在 24 小时
性途径(结合)诱导实验
性途径(结合)诱导 实验材料 四膜虫 试剂、试剂盒
水生所四膜虫蛋白质磷酸化修饰特征等研究获进展
11月7日,国际蛋白质组学领域刊物Molecular & Cellular Proteomics在线发表了题为Phosphoproteomic analysis of protein phosphorylation networks in Tetrahymena thermophila, a
冷冻保存细胞的方法介绍?
冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C30-0分钟→(-20°C30分钟*)→-80°C16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vaporphase长期储存。*-20°C不可超过1小时
胚胎冷冻保存技术的发展
由于体外受精-胚胎移植的高昂费用、有限成功率和多余胚胎的存在,以及政策和伦理对胚胎移植数目的限制,从最大限度地保护患者利益出发,应尽可能提高每一取卵周期的临床妊娠率,因而胚胎冷冻技术极为重要。胚胎冷冻造成细胞损伤机制胚胎冷冻对活组织和细胞进行冷冻保存时,冷冻过程将可能对细胞造成损伤。主要的损伤机制包
科学家发现“七性生物”:7种性别随机形成
如果你认为两性之间的战争很复杂,那要是有7种性别该怎么办呢? 当覆盖在纤毛上的单细胞生物——四膜虫交配时,其后代的性别可能和其父母的性别都不一样——有7种可能的性别。 目前,研究人员发现了四膜虫中决定其后代性别的复杂DNA特性,并确认了性别形成是随机的。 研究人员将
冷冻保存细胞方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃(30-60 分钟)→-20℃( 30 分钟) → -80℃(16-18 小时或隔夜)→ 液氮罐长期储存。冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80 ℃以下, 再放入液氮中长期储存。注意:-20℃不可超过1 小时,以防止冰晶过大,造
细菌冷冻保存方法
实验概要速冻,是将样品快速用干冰或液氮保存于-70°C或更低的温度中。速冻能够达到和缓慢控速冷冻相同的目的,效果大约为 -10-1000°C/min,但达不到-1°C /分钟。用CoolRack®液速冻样本能够保持样本体积的稳定、组织结构完整、恒定的冻结参数,快速免提样本是能避免丢失或污染的样品
上海生科院揭示四膜虫端粒酶组分p75p45p19
国际学术期刊Nature Structural and Molecular Biology 于11月9日在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所国家蛋白质科学中心(上海)雷鸣研究组的最新研究成果The Tetrahymena telomerase p75–p45–p19
DNA变性的融解温度
对双链DNA进行加热变性,当温度升高到一定高度时,DNA溶液在260nm处的吸光度突然明显上升至最高值,随后即使温度继续升高,吸光度也不再明显变化。若以温度对DNA溶液的紫外吸光率作图,得到的典型DNA变性曲线呈S型(如下图)。可见DNA变性是在一个很窄的温度范围内发生的。通常将核酸加热变性过程中,
纯化产品的冷冻干燥保存
纯化产品的冷冻干燥保存一、冷冻干燥的原理、优点冷冻干燥就是把含有大量水份物质预先冻结成固体,然后在真空条件下适当加热使水蒸气直接从固体中升华出来,而物质本身留在冻结时的冰架子中,因此干燥后的产品体积几乎不变。整个干燥是在较低的温度下进行的。冷冻干燥的优点:1.低温冷冻干燥对许多热敏性物质特别使用。如
纯化产品的冷冻干燥保存
纯化产品的冷冻干燥保存一、冷冻干燥的原理、优点冷冻干燥就是把含有大量水份物质预先冻结成固体,然后在真空条件下适当加热使水蒸气直接从固体中升华出来,而物质本身留在冻结时的冰架子中,因此干燥后的产品体积几乎不变。整个干燥是在较低的温度下进行的。冷冻干燥的优点:低温冷冻干燥对许多热敏性物质特别使用。如蛋白
DNA变性的融解温度介绍
对双链DNA进行加热变性,当温度升高到一定高度时,DNA溶液在260nm处的吸光度突然明显上升至最高值,随后即使温度继续升高,吸光度也不再明显变化。若以温度对DNA溶液的紫外吸光率作图,得到的典型DNA变性曲线呈S型。可见DNA变性是在一个很窄的温度范围内发生的。通常将核酸加热变性过程中,紫外光
实验室模板DNA低温冷冻保存与DNA室温保存系统优劣性能...
实验室模板DNA低温冷冻保存与DNA室温保存系统优劣性能对比低温冷冻保存占用空间大、保存不安全模板DNA的保存是法医DNA结果溯源的根本,模板DNA保存的普遍方式是低温冷冻保存,但是低温冷冻保存并不像人们理解的那样简单、有效。低温冷冻保存不仅占用的空间大,需要购置超大的低温装置,而且样品量大时需要配
ATCC细胞的冷冻保存与解冻方法!
一、细胞冷冻保存1、材料生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10SeriesII)。2、
正确冷冻保存细胞的方法和步骤
细胞越来越受广大科研者的喜爱,但细胞不像人们想象中那么强大,在培养复苏等过程中稍有不慎就不可能导致它的死亡。而且它必须是是在无污染的条件下培养,复苏才能保证实验效果。在此总结一下细胞的正确冷冻保存方法、保存详细步骤,相关注意事项如下: 一、保存方法(主要有两个): (1)传统方法:冷
通用细胞冷冻保存的优点有哪些
冷冻保存细胞的优点如下:1、减少基因漂移;2、减缓细胞系的衰老;3、稳定表型;4、减少微生物污染及交叉污染机会等。细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成,减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤,从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获稀释,稀释后的细胞浓
细胞冷冻保存时,细胞冷冻管内的细胞浓度如何限定?
冷冻管内细胞数目一般为1x106cells/mlvial,融合瘤细胞则以5x106cells/mlvial为宜。
病毒的保存实验
实验方法原理 含水物质首先经过冷冻,然后在真空中使水分升华,干燥,在这种低温、干燥和缺氧环境下,微生物的生长和代谢暂时停止,因而保存期较长,便于运输。该法需要冻干机等设备,并需保护剂。保护剂一般采用脱脂牛奶或血清等。保护剂的作用机理是在冷冻干燥的脱水过程中稳定病毒结构,防止细胞膜受冷冻或干燥而造成损
冷冻卵子:如何保存女性的生育力?
当人们想到女性冷冻卵子时,通常会认为是一个女人想要在事业上获得成功而推迟做母亲的一种方式,有些公司甚至为其女性员工提供了类似这样的资助。卵子冷冻通常是对没有准备好做母亲的女性进行一项手术,从其卵巢中取出一些健康的卵子以备将来使用。这项技术的支持者指出,有数据显示,使用一种新型的卵子冷冻技术能够有
细胞冷冻保存方法、注意事项
1.1. 欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态,约为80 – 90 %致密度。1.2. 冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma 应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。1.3. 注意冷冻保护剂之品质。DMSO 应为试剂级等级,无菌且无色(以0.
器官冷冻长期保存或成现实
“我们研发了一种给冷冻组织快速加温的独特技术,它不会损害组织细胞的活性。”明尼苏达大学生物医学工程和机械工程系教授约翰·碧绍夫接受科技日报记者采访时表示,这无疑克服了移植医学中的一个重大障碍,或使器官冷冻保存成为现实。 碧绍夫说,因无法在冰上保存超过4个小时,每年有超过60%的心脏和肺脏捐助器
qPCR融解曲线的峰高由什么决定
Tm值相同,而峰高低有差异是表达丰度不同,同样的扩增产物也会出现Tm值有微小差异,一般差异在1度以内都可以接受。融解曲线的纵坐标表示荧光信号对温度的一阶负导数。
qPCR融解曲线的峰高由什么决定
Tm值相同,而峰高低有差异是表达丰度不同,同样的扩增产物也会出现Tm值有微小差异,一般差异在1度以内都可以接受。融解曲线的纵坐标表示荧光信号对温度的一阶负导数。
信使RNA的拼接相关内容
一、转运RNA的拼接:由酶催化,酶识别共同的二级结构,而不是序列。通常内含子插入到靠近反密码子处,与反密码子配对,取代反密码子环。第一步由内切酶切除插入序列,不需ATP;第二步由RNA连接酶连接,需要ATP。 二、四膜虫核糖体RNA的拼接:某些四膜虫26S核糖体RNA基因中有一个内含子,其拼接
动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是什么?
动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethylsulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成。
细胞冷冻保存、冷冻细胞活化以及细胞计数与存活测试
一、细胞冷冻保存 1、材料: 生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等
科学家发现细胞外物质进入细胞核的更简单路径
一直以来,科学家坚信,细胞外物质要经过复杂的过程方能进入细胞核。但是美国纽约城市大学的科学家近日打破了这一传统认识,他们通过研究发现,细胞外物质和细胞核之间存在着更为简单的分子路径。相关论文发表在8月9日的《细胞运动和细胞骨架》(Cell Motility and the Cytoskeleton)
天然的抗冻剂催生新的细菌冷冻保存技术
华威大学化学系和华威医学院的研究人员近日开发出一种新方法,利用极地生物中的天然抗冻蛋白来冷冻保存各种细菌。他们发现这种蛋白模拟物能够减慢冰晶的形成,并防止冰晶破坏细菌细胞。 这种新颖的方法前不久发表在《Biomacromolecules》杂志上。它有望应用于生命科学研究中各种细菌的保存以及食品
脂牛磺酸的基本信息
中文名称脂牛磺酸英文名称lipotaurine定 义脂质与牛磺酸的结合物。见于嗜热四膜虫生物(Tetrahymena thermophilia)中。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),脂质(二级学科)