脂肪干细胞培养和扩增实验_脂肪干细胞的原代培养
实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒ASC培养基仪器、耗材组织培养瓶 25cm2实验步骤(a)待细胞贴壁生长2〜4天后换液。(b)换液时通过弃去培养基,从而去除未贴壁的细胞。(c)以后每周更换培养基2次。......阅读全文
脂肪干细胞培养和扩增实验_脂肪干细胞的原代培养
实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒ASC培养基仪器、耗材组织培养瓶 25cm2实验步骤(a)待细胞贴壁生长2〜4天后换液。(b)换液时通过弃去培养基,从而去除未贴壁的细胞。(c)以后每周更换培养基2次。
脂肪干细胞培养和扩增实验
脂肪干细胞的原代培养脂肪干细胞的传代培养实验方法原理实验材料脂肪干细胞 试剂、试剂盒ASC培养基
脂肪干细胞培养和扩增实验
脂肪干细胞的原代培养 脂肪干细胞的传代培养 实验方法原理 实验材料 脂肪干细胞
脂肪干细胞培养和扩增实验_脂肪干细胞的传代培养
分离获得ASC后,可以通过连续传代使其生长和扩增。原代培养后,传代2〜3次,ASCs呈现单层,大而扁的细胞形态,其直径在25〜30μm。待细胞达到汇合时,它们形态上呈纺锤体形,类似于成纤维细胞。来源:《人干细胞培养》实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒ASC培养基PBSA胰蛋白酶仪器、耗材组织培养瓶 25
简述脂肪干细胞和脂肪细胞的共培养
将准备好的脂肪干细胞和脂肪细胞分别置于Transwell 的上室和下层中,脂肪干细胞与脂肪细胞的个数之比分别为1:5,1:1,2:1 和5:1(4 组分别命名为A、B、C 和D 组)进行共培养,其中每孔中脂肪细胞的数量均为1×105 个。以上每组均做平行实验(n=3)。
脂肪干细胞培养
吸脂术时用无菌针管从臀上方吸取深层脂肪组织20 mL. 在1 h内将其移至离心管内,加入等量PBS缓冲液,充分振荡后低速离心800 r/min×10 min. 反复冲洗3次后加入等量15 g/L I型胶原酶. 37℃水浴中充分振荡30 min,再加入等量胎牛血清(FBS)中止. 低速离心10
脂肪源干细胞的培养
(1)吸脂术时用无菌针管从臀上方吸取深层脂肪组织20 mL。(2) 在1 h内将其移至离心管内,加入等量PBS缓冲液,充分振荡后低速离心800 r/min×10 min。(3)反复冲洗3次后加入等量15 g/L I型胶原酶,37℃水浴中充分振荡30 min,再加入等量胎牛血清(FBS)中止。(4)低
脂肪干细胞实验细胞培养的介绍
将吸脂来源的脂肪组织用D-Hanks 冲洗,去除残留的血细胞和组织碎片,把脂肪组织放入离心管中,记录原始体积。向组织中加入等体积的0.1%Ⅰ型胶原酶,放入37℃气浴振荡器中消化30 min。然后将消化好的组织静置5 min,待其分层后,用吸管吸取位于悬液上层的脂肪细胞,将含有脂肪细胞的悬液以10
关于脂肪干细胞的分离和培养介绍
将脂肪组织冲净,称重后消化。当消化完成后,弃掉上层未消化的脂肪组织,将下层的细胞悬液以1500 r/min(375g),离心10 min 后弃上清,得到离心管底部的脂肪干细胞团,将其重悬,密度调整到1×105mL-1,然后接种在培养面积为25 cm2 的细胞培养瓶中。 当干细胞长满培养瓶后按一
脂肪细胞的原代培养
实验方法原理 从脂肪组织中分散的细胞用25txm筛网过滤,可以排除成熟脂肪细胞,过滤下来的基质血管(stromal-vascular,SV)细胞在化学限定性无血清培养液中培养,可使前脂肪细胞得到优势生长,并逐渐积聚脂肪,发育为成熟脂肪细胞。
脂肪细胞的原代培养
实验方法原理从脂肪组织中分散的细胞用25txm筛网过滤,可以排除成熟脂肪细胞,过滤下来的基质血管(stromal-vascular,SV)细胞在化学限定性无血清培养液中培养,可使前脂肪细胞得到优势生长,并逐渐积聚脂肪,发育为成熟脂肪细胞。实验材料雄性 Sprague-Dawley 大鼠试剂、试剂盒K
脂肪细胞的原代培养
实验材料 DMEM-ADMEM-B胶原蛋白酶雄性 Sprague-Dawley 大鼠试剂、试剂盒 KRBH缓冲液KRBH-A缓冲液仪器、耗材 Petri培养皿锥形离心管聚丙烯管低密度聚丙烯瓶尼龙滤网尖解剖剪Perry镊塑料箱铡刀移液器实验步骤 一、切除附睾脂肪垫1. 在充有 70 % CO2 和 3
脂肪细胞的原代培养
实验方法原理 从脂肪组织中分散的细胞用25txm筛网过滤,可以排除成熟脂肪细胞,过滤下来的基质血管(stromal-vascular,SV)细胞在化学限定性无血清培养液中培养,可使前脂肪细胞得到优势生长,并逐渐积聚脂肪,发育为成熟脂肪细胞。
关于脂肪干细胞共性培养的分析介绍
为脂肪细胞与脂肪干细胞经过20d 共培养后脂肪干细胞的Hoechst/PI 死活染色结果。Hoechst 染料对活的细胞具有特异性染色的特点,PI 则对死细胞特异性染色。从中可以看到,两组中的细胞均呈明亮的蓝色,说明细胞的活性很好。基本上看不到PI 染成红色的死细胞的存在。表明,本实验中,经过共
牙髓干细胞的分离培养——牙髓干细胞/乳牙干细胞原代培养
实验材料牙髓组织试剂、试剂盒灭菌PBSAMSC培养基胶原酶中性蛋白酶免疫磁珠分选时所需试剂:含1%BSA的PBSA与DPSC反应的一抗用STRO-I(小鼠抗人MSC;IgM)CC9(小鼠抗人CD146 MUC-18;IgG2a)或3G5(小鼠抗人外膜细胞;IgM)仪器、耗材羊抗小鼠IgG-结合或大鼠
脂肪来源干细胞ASCs特征及分化实验—脂肪干细胞脂肪分化
实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒脂肪诱导培养基脂肪细胞生长培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加入脂肪诱导培养基,将培养瓶放回温箱。(d)三天后,将诱导培养基更换成脂肪细胞生长培养。注意事项其他培养基配方:成脂诱导培养基:DMEM/F12 1×、胎
脂肪干细胞培养_吸脂术法
实验材料深层脂肪组织试剂、试剂盒PBS缓冲液蒸馏水I型胶原酶氯化铵青霉素DMEM仪器、耗材离心管针管灭菌锅离心机水浴锅培养箱培养瓶流式细胞仪脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是近年来从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。研究发现ADSCs细胞
脂肪间充质干细胞原代分离
实验概要本实验方法介绍了脂肪间充质干细胞原代分离所需试剂及操作流程。主要试剂所用试剂盒:小鼠脂肪干细胞分离和培养试剂盒 货号:MADS-000-001大鼠脂肪干细胞分离和培养试剂盒 货号:RADS-000-001兔子脂肪干细胞分离和培养试剂盒
脂肪来源干细胞ASCs特征及分化实验——脂肪干细胞软骨分化
实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒成软骨诱导培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a) 吸去培养基(b) 加人PBSA润洗细胞。(c) 加人成软骨诱导培养基,将培养瓶放回温箱注意事项其他培养基配方:成软骨诱导培养基:DMEM(低糖)1×、丙酮酸钠110 mg/L、ITS+ 1%、抗坏血酸-2-磷酸盐0
脂肪来源干细胞ASCs特征及分化实验—脂肪干细胞神经分化
在培养过程中,ASCs 可在很长时间内保持未分化状态。ASCs 具有成纤维细胞样形态,胞内缺乏脂肪细胞中所见的脂滴。体外扩增后,ASCs 的表型会发生改变,主要体现在细胞表面蛋白和细胞因子表达的变化。ASCs 的表型与骨髓和骨骼肌来源的干细胞相似。免疫组化染色发现,诱导的 ASCs 可以表达神经细胞
培养脂肪干细胞一定要用无血清培养基吗
不一定要无血清培养基培养。无血清培养的目的只是适合将来临床使用或者排除其他不确定成分因子影响基础研究的判断。你可以用含10%FBSDMEM:F12培养基培养好原代(0.1%gelatin包被,I型胶原酶至少消化40min以上),然后使用Sciencell的MSCM进行培养,效果还不错。
脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验—脂肪干细胞骨分化
实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒成骨诱导培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加人成骨诱导培养基,将培养瓶放回温箱。注意事项其他培养基配方:成骨诱导培养基:DMEM(高糖)1×、胎牛血清10%、β-甘油磷酸10 mmol/L、抗坏血酸-2-磷酸盐0.
小鼠脂肪间充质干细胞的原代取材
实验概要小鼠脂肪间充质干细胞的原代取材主要试剂含2% SP的DPBS、1 mg/mL胶原酶Ⅰ、间充质干细胞培养液主要设备眼科剪、眼科镊、摇床、400目细胞筛、15 mL离心管、3.5 cm培养皿实验步骤冰上预冷含2% SP的DPBS。断颈法处死小鼠,取出其腹部脂肪组织,用预冷的含2%SP(Pen S
脂肪干细胞的简介
脂肪组织在人体内储量丰富,通过抽脂从中获得的大量脂肪干细胞(ADSCs),有自我更新增殖及多向分化潜能,可向脂肪细胞、软骨细胞、肌细胞、成骨细胞、神经细胞、神经胶质细胞及胰岛细胞分化,而且可分泌多种促血管生成因子和抗凋亡因子而抗炎、抗氧化,可抵抗氧自由基的损伤,有望成为修复受损的组织和器官的干细
MSCs培养物的扩增和冻存实验_间充质干细胞的传代培养
缩小细胞培养体积试验证明,MSCs最好培养于直径15cm的Nunclon或Corning板中,面积在140cm2和150cm2之间。细胞产率取决于培养皿的数量,一般使用此方法传代,每个培养皿中可收获5X105个细胞。来源:《人干细胞培养》实验材料MSCs试剂、试剂盒无菌完全培养培养基(CCM)、PB
乳腺干细胞的培养实验
实验方法原理 实验材料 组织标本试剂、试剂盒 无菌DMEM F12 50:50 加人1.2 mg ml重碳酸盐CMD3培养基胶原酶 900 IU mlVitrogen解剖刀培养瓶 25cm2Vitrogen包被 8μg cm2仪器、耗材 摇床离心管实验步骤 (a)手术后,立即将组织标本转移至DMEM
乳腺干细胞的培养实验
乳房缩小整形术组织标本中上皮细胞的制备IrECM三维培养乳腺干细胞实验方法原理实验材料组织标本试剂、试剂盒无菌DMEM F12 50:50 加人1.2 mg ml重碳酸盐 CMD3培养基 胶原酶 900 IU ml Vitrogen 解剖刀 培养瓶 625px2 Vitrogen包被 8μg
乳腺干细胞的培养实验
实验材料组织标本试剂、试剂盒无菌DMEM F12 50:50 加人1.2 mg ml重碳酸盐CMD3培养基胶原酶 900 IU mlVitrogen解剖刀培养瓶 25cm2Vitrogen包被 8μg cm2仪器、耗材摇床离心管实验步骤(a)手术后,立即将组织标本转移至DMEM/F12(1:1)。(
胚胎干细胞中饲养层细胞的原代培养实验材料和步骤
实验材料12.5d孕鼠、PBS、DMEM、血清、酒精、双抗、解剖器、培养箱、超净台实验步骤1.性成熟小鼠合笼(♀∶♂=2∶1)2.每天观察小鼠,见阴道栓后确定为怀孕0.5d。3.取12.5d孕鼠,断颈处死,在酒精中泡数秒消毒。控干酒精后置于一个无菌的培养皿中。4.无菌条件下暴露子宫。每打开一层要换一
脂肪来源干细胞的取材与分离实验
实验方法原理 人和小鼠的脂肪组织均可用于分离ASC,可以获得相当数目的ASCs。人脂肪组织通常来源于抽脂。小鼠脂肪组织则取自腹股沟处脂肪垫。实验材料 小鼠 4〜6只试剂、试剂盒 Hank’s缓冲盐溶液(HBSS)ASC培养基胶原酶溶液聚乙烯吡咯酮碘溶液麻醉剂:三溴乙醇 37℃水浴仪器、耗材 Petr