胶体金分散颗粒制备实验——鞣酸柠檬酸钠还原法
实验方法原理在鞣酸-柠檬酸钠还原法中,柠檬酸钠是主要的还原剂;而鞣酸则具有双重作用,既起还原作用,也有保护作用,它控制着「晶核」的形成过程,故可改变鞣酸的用童来制备不同颗粒的胶体金。实验步骤A 液(80 ml):1% 氯化金,1 ml;双重蒸馏水,79 ml。B 液(20 ml):1% 柠檬酸钠,4 ml;1% 单宁酸,0.1 ml;25 mmol/L K2CO3,0.1 ml;双重蒸馏水,15.8 ml。将上述 A 液加热到 60℃,然后将 B 液快速加入到 A 液中,继续搅拌,在极短的时间内加热到煮沸(大约 10 min),此时颜色由黑-蓝-亮红(近似红葡萄酒颜色)变化。pH 调到所需要求(根据所标记蛋白质种类的不同,所需的 pH 也不一样)。上述用量合成的胶体金为 10nm,根据所加入鞣酸(或称单宁酸)量的不同,可合成 3~17 nm 颗粒大小的胶体金。展开......阅读全文
胶体金分散颗粒制备实验——鞣酸柠檬酸钠还原法
实验方法原理在鞣酸-柠檬酸钠还原法中,柠檬酸钠是主要的还原剂;而鞣酸则具有双重作用,既起还原作用,也有保护作用,它控制着「晶核」的形成过程,故可改变鞣酸的用童来制备不同颗粒的胶体金。实验步骤A 液(80 ml):1% 氯化金,1 ml;双重蒸馏水,79 ml。B 液(20 ml):1% 柠檬酸钠,4
胶体金分散颗粒制备实验——柠檬酸钠还原法
实验方法原理柠檬酸钠还原法(Frens,1973)制备过程十分简单,制备出的金颗粒均匀一致,因此广为采用。大量研究已表明该法制备胶体金时,颗粒的大小是柠檬酸钠用量的函数,即在一定的范围内任意给定一个柠檬酸钠的量,总有一定大小的胶体金颗粒与它相对应,因而这种方法可很好地满足电镜双重标记和多重标记的要求
胶体金分散颗粒制备实验——白磷还原法
胶体金可用多种方法制备,其中应用较为广泛的是化学还原法。这一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的还原剂,使金离子还原为金原子,可用于制备胶体金的还原剂有 50 余种,但在生物医学领域内最为常用的还原剂是白磷、柠檬酸三钠以及鞣酸等,因此将重点介绍这三种还原剂制备胶体金分散颗粒的具体方法和步骤。
胶体金分散颗粒制备实验——白磷还原法(改进)
实验方法原理白磷还原法一般只能制备出单一颗粒直径的胶体金。因此,用于电镜双重标记或多重标记时此法显得有些不足,还需结合其他方法。Henegouwen 等(1986)发展了传统的白磷还原法,可制备出多种不同直径的胶体金,取得了良好的效果。这一方法的特点是通过循环还原的引入使原白磷还原法的适用范围得到扩
白磷还原法制备胶体金分散颗粒
胶体金可用多种方法制备,其中应用较为广泛的是化学还原法。这一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的还原剂,使金离子还原为金原子,可用于制备胶体金的还原剂有50余种,但在生物医学领域内最为常用的还原剂是白磷、柠檬酸三钠以及鞣酸等。 白磷还原法的建立已有近百年的历史,由于此法操作较
白磷还原法制备胶体金分散颗粒
胶体金可用多种方法制备,其中应用较为广泛的是化学还原法。这一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的还原剂,使金离子还原为金原子,可用于制备胶体金的还原剂有50余种,但在生物医学领域内最为常用的还原剂是白磷、柠檬酸三钠以及鞣酸等。白磷还原法的建立已有近百年的历史,由于此法操作较为简便,制备出来的
胶体金分散颗粒制备实验——硼氢化钠还原法
实验步骤1. 取 0.6 ml 1% 氯化金水溶液,加入 40 ml 预冷(4℃)双蒸馏水。2. 再加入 0.2mol/L K2CO3 0.2 ml。3. 边搅拌边加入新鲜配制的硼氢化钠水溶液(0.5 mg/ml)2 ml,至溶液由蓝紫色变为橙红色为止。然后继续搅拌 5 min,获得的金颗粒直径在
胶体金分散颗粒制备实验——乙醇超声波还原法
实验步骤1. 取 1% AuCl3 • HCl 水溶液 1 ml 加入 100 ml 双重蒸馏水。2. 用 0~2mol/L K2CO3 调 pH 至 7.2,再加入 1 ml 无水乙醇。3. 用 20 KC、135 W 超声波探头浸入溶液内进行超声振荡,此法制备的颗粒为 6~10 nm。
胶体金分散颗粒制备实验
实验步骤1. 取 0.01% AuCl3 • HCl 水溶液 100 ml,加热至沸腾。2. 加入 4 μl 195Au。 3. 迅速加入 4 ml 1% 柠檬酸三钠水溶液,搅拌 5~7 min,至出现透明的橙红色。4. 其含量为脉冲数 1×106/min。胶体金可用多种方法制备,其中应用较为广泛的
胶体金分散颗粒制备实验
实验方法原理 白磷还原法的建立已有近百年的历史,由于此法操作较为简便,制备出来的胶体金颗粒大小较一致,因而应用较为广泛,现以 Faulk 和 Taylor(1971)的报道为基础介绍这一方法。试剂、试剂盒 氯化金K2CO3双蒸水实验步骤 1. 取 1% 氯化金 1.5 ml、0.1mol/L K2C
鞣酸枸橼酸钠还原法
A液:1%HAuCl4水溶液1ml加入79ml双馏水中混匀。 B液:1%枸橼酸三钠4ml,1%鞣酸0.7ml,0.1Mol/L K2CO3液0.2ml,混合,加入双馏水至20ml. 将A液、B液分别加热至60℃,在电磁搅拌下迅速将B液加入A液中,溶液变蓝,继续加热搅拌
免疫胶体金技术介绍
一、免疫胶体金技术的基本知识1、胶体金的概念氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。2、免疫金标记技术胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质
免疫胶体金技术1
(一) 原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与
免疫胶体金技术(Immune-colloidal-gold-technique)概述
(一) 原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正
纯水在胶体金制备过程中的应用
胶体金快速诊断试剂在瘦肉精检测中的应用: 瘦肉精是一类动物用药,它可以起到减少脂肪增加瘦肉的作用。目前在中国瘦肉精主要为克仑特罗(clenbuterol),它属于β-兴奋剂(β-agonist)药物。克仑特罗有很危险的副作用,轻则导致心律不整,重则导致心脏病发作。 目前检测瘦肉精的技术
制备胶体金分散颗粒的其他方法
乙醇-超声波还原法(Baigent和Muller,1980)(1)取1%AuCl3·HCl水溶液lml加入100ml双重蒸馏水。(2)用0.2mol/LK2CO3调pH至7.2,再加入lml无水乙醇。(3)用20KC、135W超声波探头浸入溶液内进行超声振荡,此法制备的颗粒为6~10nm。硼氢化钠还
胶体金及金标检测技术研究进展
继三大标记技术(荧光素、放射性同位素和酶)之后,一种固相标记免疫测定技术--免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique, ICG)逐渐发展起来。它是以胶体金作为标记物,利用抗原抗体特异性反应,对抗原或抗体物质进行定性乃至定量研究的标记技术。近年来,该技术因其操作简
柠檬酸三钠还原法制备金溶胶
取0、01%氯金酸水溶液100ml 加热至沸,搅动下准确加入1%柠檬酸三钠水溶液 0.7ml,金黄色的氯金酸水溶液在2分钟内变为紫红色,继续煮沸15分钟,冷却后以蒸馏水恢复到原体积,如此制备的金溶胶其可见光区最高吸收峰在535nm,A1cm / 535 = 1.12 。金溶胶的光
斑点免疫金银染色检测牛结核血清抗体
实验概要本实验应用斑点免疫金银染色(Dot-IGSS)检测了牛结核血清抗体。主要试剂1.抗原牛结核PPD。2.血清待检血清、标准结核阳性血清和结核阴性血清。3.硝酸纤维膜孔径0.45µm。4.氯化金(优质)5.0.2Mol/L PB液6.0.05Mol/L Tris—HCl缓冲液7.硝酸银显影液(现
斑点免疫金银染色检测牛结核血清抗体
实验概要本实验应用斑点免疫金银染色(Dot-IGSS)检测了牛结核血清抗体。主要试剂1.抗原牛结核PPD。2.血清待检血清、标准结核阳性血清和结核阴性血清。3.硝酸纤维膜孔径0.45µm。4.氯化金(优质)5.0.2Mol/L PB液6.0.05Mol/L Tris—HCl缓冲液7.硝酸银显影液(现
免疫胶体金技术的颗粒制备
根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1.枸橼酸三钠还原法 (1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。 (2)15nm胶体金颗粒的制备:取0.
常用来制备胶体金颗粒的方法介绍
根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。1.枸橼酸三钠还原法(1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。(2)15nm胶体金颗粒的制备:取0.01%HAuCl
常用来制备胶体金颗粒的方法
1.枸橼酸三钠还原法(1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。(2)15nm胶体金颗粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液2ml,加热煮沸15min~30m
胶体金免疫层析法对抗幽门螺杆菌相关蛋白A抗体的检测
实验概要本实验建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫层析法(GICA)。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记葡萄球菌A蛋白(SPA),将重组的CagA抗原划线固定于硝酸纤维素膜上,制成免疫层析检测试条。 血清中IgG与测试条上金标记
胶体金免疫层析法对抗幽门螺杆菌相关蛋白...
实验概要本实验建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫层析法(GICA)。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记葡萄球菌A蛋白(SPA),将重组的CagA抗原划线固定于硝酸纤维素膜上,制成免疫层析检测试条。 血清中IgG与测试条上金标记
免疫胶体金技术的使用优点及颗粒制备
使用优点 (1)使用方便快速,便于基层使用和现场使用,所有反应能在15分钟内完成; (2)成本低,不需要特殊的仪器设备; (3)应用范围广,可适应多种检测条件; (4)可嗄以进行多项检测,若阳性样本比较难获得,多项检测可以节省样品,降低成本; (5)标记物稳定,标记样品在4℃贮存两年年
胶体金的制备常用方法
胶体的制备一般采用还原法,常用的还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。2.1柠檬酸三钠还原法制备金溶胶取0.01%氯金酸水溶液100mL加热至沸,搅动下准确加入1%柠檬酸三钠(Na3C6H5O7·2H2O)水溶液0.7mL,金黄色的氯金酸水溶液在2min内变为紫红色,继续煮沸15min
免疫胶体金的制备及其在医学检验中的应用
摘要免疫胶体金技术是四大免疫标记技术之一,问世二十多年来发展十分迅速,在生物医学各研究领域特别是在医学检验中得到了日益广泛的应用。本文从胶体金技术的基本原理、制备方法、标记技术和实际应用等几个方面对胶体金技术作了较系统介绍。 1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学,此
胶体金试纸条的测试原理
胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是
胶体金试纸条的测试原理
胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是