抗原呈递细胞的选择和制备
实验步骤基本方案 过 利 斯 特 氏 菌 刺 激 制 备 腹 腔 巨 噬 细 胞材 料单核细胞增多性利斯特氏菌无 菌 PBSH -2 相 合 小 鼠(见 表 A .2A .1),包括正常和提前 3 周注射了利斯特氏菌的小鼠V冰浴的 D M E M 培养基3 % (V A O 乙酸0.4% (m /V ) 台盼蓝染液V D M E M -1 0 完 全 培 养 基(室温以及 37°C )7 0 % (V7 V ) 乙醇IOml 和 30m l 的注射器以及 23 G 针头离心机9 6 孔培养板移液器显微镜1 . 在 50m l 离心管内将利斯特氏菌用 P B S 稀释至合适浓度,此 时 0.5〜1.0m l 菌液中含半数致死量 5 % 〜1 0 % 的 细 菌(一 般 情 况 下 C B A /J 小 鼠 或 C 57B L / 6 小 鼠 需 IO5 个细菌/m l , B A L B /c 小鼠需 IO4 ......阅读全文
抗原呈递细胞的选择和制备
实验步骤基本方案 过 利 斯 特 氏 菌 刺 激 制 备 腹 腔 巨 噬 细 胞材 料单核细胞增多性利斯特氏菌无 菌 PBSH -2 相 合 小 鼠(见 表 A .2A .1),包括正常和提前 3 周注射了利斯特氏菌的小鼠V冰浴的 D M E M 培养基3 % (V A O 乙酸0.4% (m /V
抗原呈递细胞的选择和制备(二)
备 选 方 案 2 Con A 刺激的腹腔巨噬细胞的制备此方案中不使用致病菌,但巨噬细胞获得率较低。将 Con A 溶 解 于 PBS (200ul/ml) ,用 0.22/xm 的滤器过滤,然后保存于 一 20°C 。 每只小鼠腹腔注射 500ul (IOOug)C o n A (附录 2
抗原呈递细胞的选择和制备(一)
基本方案 过 利 斯 特 氏 菌 刺 激 制 备 腹 腔 巨 噬 细 胞材 料单核细胞增多性利斯特氏菌无 菌 PBSH -2 相 合 小 鼠(见 表 A .2A .1),包括正常和提前 3 周注射了利斯特氏菌的小鼠V冰浴的 D M E M 培养基3 % (V A O 乙酸0.4% (m /V ) 台
制备色谱柱的选择
色谱分离模式的选择 对于色谱分离模式的选择应采用多种分析柱对分离条件进行测试,当有多种模式可以选择时,应着重考虑下列因素,包括:分辨率:即色谱填料对被测组分的选择性上样量:即色谱填料对被测样品的承载容量分析速度:即对被测样品的分离时间色谱柱规格的选择 下表提供了色谱柱规格选择的一般规律,在选择时应考
抗原呈递细胞的简介
抗原呈递细胞(Antigen-presenting cells, APC)是指能够摄取、加工处理抗原,并将处理过的抗原呈递给T细胞的一类免疫细胞。APC主要包括单核-吞噬细胞、树突状细胞、B细胞、朗格汉斯细胞以及肿瘤细胞的病毒感染的靶细胞等(其中树突状细胞的抗原呈递能力最强)。
抗原呈递细胞的外源性抗原
外源性抗原经吞噬或吞饮作用,被APC摄入胞内形成吞噬体,后者与溶酶体融合形成吞噬溶酶体。抗原在吞噬溶酶体内酸性环境中被蛋白水解酶降解为小分子多肽,其中具有免疫原性的称为抗原肽。内质网中合成的MHC-Ⅱ类分子进入高尔基体后,由分泌小泡携带,通过与吞噬溶酶体融合,使抗原肽与小泡内MHC-Ⅱ类分子结合
抗原呈递细胞的种类介绍
可分为专职APC和非专职APC.专职APC是指一类特化的细胞,它们具有摄入、加工、处理、提呈胞外抗原,激活CD4+T细胞,诱导免疫应答的能力。这类细胞必须表达MHC-Ⅱ类分子、协同刺激信号分子和各种粘附分子。专职APC包括单核-巨噬细胞、树突状细胞和B细胞。通常情况下不表达MHC-Ⅱ类分子、协同
其他抗原呈递细胞介绍
除了MPS细胞外,体内还有其它某些细胞具有原呈递功能。 一、树突状细胞 树突状细胞(dendritic cell,DC)是体内不同于MPS细胞的另一类重要的抗原呈递细胞,其共同的生物学特性是细胞表面有许多树枝状突起,胞内具有丰富的线粒体,但粗面内质网、溶酶体与核糖体不发达,细胞表面无
抗原呈递细胞的基本信息
抗原呈递细胞(antigen-presenting cell、APC)也称为抗原提呈细胞、辅佐细胞或抗原呈现细胞,是指在免疫反应过程中,能将抗原物质提呈给T细胞的一类辅佐细胞。APC是一群异质性细胞,白细胞中主要有巨噬细胞、B细胞及树突状细胞,一些非白细胞在细胞因子的影响下,也可呈现提呈细胞的功能(
制备液相的条件如何选择
制备液相的目的是为了分离纯化,但是制备液相的液相条件是从分析来的,分析改变液相条件,是谱图分离度最佳,峰型最好,然后根据产量决定制备柱的规格。
制备RNA样品的方法如何选择?
您在进行科研工作的时候,是否经常遇到过以下问题:我的RNA样本量很少,我不想要总RNA;2.我想检测RNA上m6A甲基化水平,我不想用复杂的液相色谱质谱联用(LC-MS)方法;3.我想研究退行性神经疾病,我不想使用传统的镀银染色法。【解决方案一】:在某些情况下,研究者们更希望能够提取特定分馏的RNA
制备液相的条件如何选择
制备液相的目的是为了分离纯化,但是制备液相的液相条件是从分析来的,分析改变液相条件,是谱图分离度最佳,峰型最好,然后根据产量决定制备柱的规格。
制备液相的条件如何选择
制备液相的目的是为了分离纯化,但是制备液相的液相条件是从分析来的,分析改变液相条件,是谱图分离度最佳,峰型最好,然后根据产量决定制备柱的规格.
制备型色谱柱选择指南
制备的目的是从混合物中得到纯物质,即分离—纯化—目标物,制备柱则是完成这一过程的一个工具。其固定相种类和分析柱相似,有硅胶、键合固定相(如C18/C8等)、离子交换树脂 、聚酰胺、 氧化铝、 凝胶等(对填料可以进一步处理提高了分离效果,如:对硅胶进行的硝酸银(或缓冲液)处理)。 其装柱方法,根
抗原呈递细胞的抗原呈递作用
细胞在其表面以能被T细胞受体(TcR)特异性识别的方式表达抗原的过程称为抗原呈递。APC以MHC-Ⅱ分子限制的方式将抗原递给辅助性T细胞(TH);各种靶细胞心以MHC-Ⅰ限制的方式将抗原呈递给细胞毒性T细胞(TC)。APC的抗原呈递作用是一个涉及抗原摄取、处理与呈递的复杂过程。各类APC呈递抗原
抗原呈递细胞的内源性抗原
内源性抗原是指细胞自身合成的抗原,如肿瘤抗原和病毒蛋白抗原等。内源性抗原在细胞内生成后,可被存在于胞质中的蛋白酶体,即小分子聚合多肽体(LMP)降解成小分子多肽;小分子多肽与热休克蛋白70/90在胞质内结合后,经抗原肽转运体(TAP)转运到内质网中,通过加工修饰成为具有免疫原性的抗原肽;抗原肽与
半制备色谱和制备色谱的区别
1.制备与半制备的差异是流速与色谱柱;半制备一般会选择直径为10mm的色谱柱;而制备选择的是直径为20的色谱柱;同样,流速也会相应提升,半制备的流速一般为1.0ml/min,而制备一般会设置为8ml/min。液相色谱仪有分析型以及制备型,分析型一般用来分析多个化学成分,可以进行定性以及定量,而制备型
正确使用标准物质四个要点:选择、保存、制备和上机测试
由于标准物质的研制投入非常巨大,研发周期长,而且大多数标准物质的使用都是消耗性的,不可能生产出满足化学测量所需要的全部类型的标准物质。因此,必须正确使用标准物质,以使有限的标准物质资源充分发挥其作用。正确使用包括选择、保存、制备和上机测试四个关键步骤。 1.如何正确选择标准物质: 正确选择
试样的处理和制备
要获得一张高质量红外光谱图,除了仪器本身的因素外,还必须有合适的样品制备方法。一、红外光谱法对试样的要求红外光谱的试样可以是液体、固体或气体,一般应要求:(1)试样应该是单一组份的纯物质,纯度应>98%或符合商业规格才便于与纯物质的标准光谱进行对照。多组份试样应在测定前尽量预先用分馏、萃取、重结晶或
胶原的分离和制备
1. Remove one or two rat tails and greeze at -80C overnight 2. Thaw the tails (about 1/2 hour) and scrub the tail with septisol to kill any bacteria.
制备色谱分离纯化之流动相选择
制备色谱的目的,是从混合物中得到高纯单组份,和分析色谱不同,在选用流动相时,还要考虑后续溶剂去除等分离操作(旋蒸、冻干等方法)。一般来说,不宜采用高毒性溶剂,对多元溶剂要尽可能的少用,另溶剂的纯度也要考虑在其中。这里小编介绍下制备色谱做分离纯化的流动相选择。 一般常用的正相,反相流动相 制备色谱纯
常用培养基的选择、制备、灭菌与消毒
选择基本培养基时,除待培养植物的基因型外,通常应考虑培养基的种类,其总离子浓度、总氮水平及氮源种类(硝态氮和铵态氮)与比例、钙和氯化物的含量等。草本植物组织培养广泛使用的MS培养基,而木本植物组织培养通常采用低盐基本培养基如1/2或1/4MS或WPM(Woody Plant Medium,木
Western-Blot中蛋白样品的制备与试剂选择
"良好的开始是成功的一半",尤其对于生物学实验,如果没有高质量的实验样本,等待我们的很可能是失败的实验结果。优质特异的蛋白样品对Western Blot实验至关重要。下面将从蛋白样品制备的方法和试剂选择上给大家一些建议,同时也和大家分享一些因蛋白样品制备不当而导致Western Blot实验失败的案
突变和选择
1.突变率及其表达方式突变有其分子基础。因为自然界中普遍存在着突变,每个基因都有一定的突变率(mutation rate)。一般用每代中每一百万个基因中发生的突变数来表示,即n×10-6/基因/代。突变对遗传平衡的影响有正负两个.如一对等位基因A(显性)和a(隐性),由显性基因(A)突变
抗体的选择和保存
当我们要检测目的蛋白在组织中表达情况的时候,如何选择适合我们实验需要的抗体,并恰当保存使用,是每个科研人员需要细心考虑的。抗体种类繁多,品牌众 多,技术参数不一,价格和质量更是相差甚大,如何购买到高质量价格合适的抗体,并准确地做出我们想要的结果,其中有很多细节需要注意。一、怎样选择适合你实验需要的抗
PBS的清洗方式选择、次数和时间的选择
(1)单独冲洗,防止交叉反应造成污染。临床上每天检测的病例很多,所用的抗体种类及项目也多,如果在加入一抗孵育完后,将它们在一个缸内洗,这样就会造成交叉污染,影响最后的结果。正确的做法是单独地进行冲洗,冲洗的PBS为一次性,保证切片没有相互交叉污染的机会。(2)温柔冲洗,防止切片的脱落。冲洗切片,取出
如何选择基因敲除动物模型制备技术?
动物模型是现代生命科学研究的重要工具,特别是基因工程小鼠和大鼠,在基因功能研究、人类生理病理机制研究及新药研发中起着不可替代的作用。近几年来,制 备动物模型的基因修饰技术层出不穷,这不仅包括传统ES打靶、TALEN、CRISPR/Cas9, 还有TetraOne基因敲除新技术。如此繁 多的技
组织和细胞RNA的制备
一、 组织和细胞总RNA提取:异硫氰酸胍法(一)试剂准备1.CSB缓冲液:42mM柠檬酸钠;0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基,N甲基甘氨酸钠);0.2 mM β-巯基乙醇。2.变性液:异硫氰酸胍(终浓度 4 M)25g、CSB缓冲液 33ml,混合直至完全溶解,可在65℃助
土壤样品的制备和保存
从野外取回的土样,经登记编号后,都需经过一个制备过程——风干、磨细、过混匀、装瓶,以备各项测定之用。样品制备目的是:①剔除土壤以外的侵入体(如植物残茬、昆虫、石块等)和新生体(如铁锰结核和石灰结核等),以除去非土壤的组成部分;②适当磨细,充分混匀,使分析时所称取的少量样品具有较高的代表性,以减少称样
质粒DNA的制备和纯化
实验概要质粒(plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1~200kb不等,为双链、闭环的DNA分子,并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中,它具有自主复制和转录能力,能在子代细胞中保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。质粒在细胞内的复制一般有两种类型: