抗肽的抗血清制备及从多肽库筛选B细胞和T细胞抗原表位

采用合成肽组合库鉴定 B 细 胞 和 T 细胞的表位实验步骤 基 本 方 案 1 采 用 PS-SCL 筛选抗体抑制剂材 料肽或蛋白质抗原目的抗原的单克隆抗体(M A b )1 % (m/V) BS A / P B S (见附录 1PBS)六 肽 的 PS-SCL ( 表 13. 3.1): 5 m g / m l 的 1 2 0 肽 混 合 物(若 需 详 细 资 料 ,联系C. Pinilla9 cpinilla@tpims.org)辣 根 过 氧 化 物 酶( H R P ) 偶 联 M A b 的 同 种 型 抗 体 的 特 异 性 的 抗 鼠 抗 体(Calbioc h e m ; 按生产商提供的说明书使用)显影液4mol/L 硫酸结合能力较强的聚苯乙烯 9 6 孔 微 量 滴 定 板(如 A / 2 板 , Costar; Immunolon 4 板 ,Dynatech)保湿盒:用湿纸巾密封的 Tupper......阅读全文

抗肽的抗血清制备及从多肽库筛选B细胞和T细胞抗原表位

使用双功能团试剂将合成肽偶联至载体蛋白实验步骤基 本 方 案 使用双功能团试剂将合成肽偶联至载体蛋白材 料家兔肽-载体的连接体(单 元 13. 1)P B S , p H 7. 5弗 氏 完 全 佐 剂(F C A ; Pierce Biotechnology)弗氏不完全佐剂1 . 收 集 血 样(

抗肽的抗血清制备及从多肽库筛选B细胞和T细胞抗原表位

采用合成肽组合库鉴定 B 细 胞 和 T 细胞的表位实验步骤 基 本 方 案 1 采 用 PS-SCL 筛选抗体抑制剂材 料肽或蛋白质抗原目的抗原的单克隆抗体(M A b )1 % (m/V) BS A / P B S (见附录 1PBS)六 肽 的 PS-SCL ( 表 13. 3.1): 5 m

研究揭示2019nCoV的潜在T细胞和B细胞表位

  截至2020年2月26日,2019-nCoV已经感染了超过26个国家的超过77000人,夺走了超过2000条生命。2019-nCoV是一种引起COVID-19的新型冠状病毒,与SARS-CoV有很高的相似性。目前还没有针对2019-nCoV或任何形式的冠状病毒的疫苗被批准。  图片来源:bioR

抗原表位是抗原肽吗

抗原表位,又称抗原决定指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。抗原通过抗原表位与相应的淋巴细胞表面的抗原受体结合,从而激活淋巴细胞,引起免疫应答;抗原也借表位与相应抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合而发挥免疫效应。抗原表位的性质、数目和空间构型决定抗原的特异性。抗原肽具有免疫原性的多肽或抗原衍生肽。

B细胞对T细胞依赖抗原的应答

  一般情况下当大量抗原进入未经免疫的机体后,诱发初次免疫应答时其抗原呈递细胞多由巨噬细胞完成。经Mφ活化TH细胞后再由活化的TH细胞辅助B细胞产生抗体和形成记忆B细胞。但当再次免疫应答发生时,抗原呈递细胞则主要由已扩增的B细胞克隆承担。由于其膜Ig受体亲和力增高故对少量抗原也能摄取,故可取代巨噬细

如何选择合适的单、多克隆抗体及抗原

   多克隆抗体(polyclonal antibody, pAb):用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物,可刺激机体多个B细胞克隆,产生针对多种抗原表位的不同抗体。所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物,即多克隆抗体。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体

如何选择合适的单、多克隆抗体及抗原?

多克隆抗体(polyclonal antibody, pAb):用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物,可刺激机体多个B细胞克隆,产生针对多种抗原表位的不同抗体。所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物,即多克隆抗体。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗

T-细胞及B-细胞的分离

将淋巴细胞悬液通过尼龙棉柱,B 细胞粘附于尼龙棉上,T细胞则不粘附,先用RPMI l640 培基洗脱尼龙棉柱,流下的细胞悬液含有丰富的T 细胞。然后用力反复挤压尼龙柱、挤出粘附在尼龙棉上的B 细胞,并用少量的RPMI l640 培基洗脱,此细胞悬液含有丰富的B 细胞。尼龙柱(塑料管)的长短和尼龙棉的

单克隆抗体的制备(一)

材料1. 免疫原一旦作出制备单克隆抗体的决定后,首先要考虑的问题是使用何种免疫原(第2章)。免疫原(或抗原)可以有多种:全细胞、细胞提取物、纯化蛋白、融合蛋白、多肽、糖 类 、脂类或 D N A 等 。此外,制备单克隆抗体时不需要很纯或单一特异性的抗原,因为在单克隆抗体筛选的过程时,每个克隆

利用现代生物技术进行多肽类药物的生产和改进

  目前我国的生物技术药物研究已开始步入自主创新时期,尤其是利用现代生物技术生产多肽类药物将成为我国今后多肽类药物生产和改进的主要途径,具体有以下几个方面。     1、利用组合化学与药物高通量筛选相结合的技术开发多肽类药物组合化学技术使一次合成成千上万的多肽成为可能,药物高通量筛选又可从成千上万的

利用现代生物技术进行多肽类药物的生产和改进

    目前我国的生物技术药物研究已开始步入自主创新时期,尤其是利用现代生物技术生产多肽类药物将成为我国今后多肽类药物生产和改进的主要途径,具体有以下几个方面。    1、利用组合化学与药物高通量筛选相结合的技术开发多肽类药物组合化学技术使一次合成成千上万的多肽成为可能,药物高通量筛选又可从成千

靶向禽流感病毒的保守家禽T细胞表位获揭示

近日,华南农业大学教授廖明、副教授代曼曼团队解析了鸡抗性MHC B2 class I类分子的肽结合基序及其递呈抗原表位的分子机制,并新鉴定出靶向禽流感病毒(AIV)的4条鸡CD8+T细胞保守抗原表位。相关成果在线发表于《生物化学》杂志(Journal of Biological Chemistry)

载体蛋白(KLH,BSA,OVA)偶联多肽修饰简介

肽-载体蛋白偶联多用于制备抗多肽类抗体,单独的多肽通常太小不足以激起充分的免疫反应,而带有很多抗原表位的载体蛋白有利于刺激辅助性T细胞,进一步诱导B细胞免疫反应。请记住,免疫系统是将肽-蛋白作为一个整体来激起免疫反应的,因而产生的抗体中有针对多肽的,有针对链接剂的,也有针对载体蛋白的。 其中最常见的

最常见的载体蛋白及其偶联方式

载体蛋白KLH,BSA,OVA偶联-多肽修饰肽-载体蛋白偶联多用于制备抗多肽类抗体,单独的多肽通常太小不足以激起充分的免疫反应,而带有很多抗原表位的载体蛋白有利于刺激辅助性T细胞,进一步诱导B细胞免疫反应。请记住,免疫系统是将肽-蛋白作为一个整体来激起免疫反应的,因而产生的抗体中有针对多肽的,有针对

关于T-细胞及B-细胞的分离介绍

  将淋巴细胞悬液通过尼龙棉柱,B 细胞粘附于尼龙棉上,T细胞则不粘附,先用RPMI l640 培基洗脱尼龙棉柱,流下的细胞悬液含有丰富的T 细胞。然后用力反复挤压尼龙柱、挤出粘附在尼龙棉上的B 细胞,并用少量的RPMI l640 培基洗脱,此细胞悬液含有丰富的B 细胞。尼龙柱(塑料管)的长短和尼龙

抗原和免疫血清制备实验—抗红细胞抗体(溶血素)制备

实验材料家兔试剂、试剂盒红细胞悬液生理盐水阿氏液仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1.  红细胞悬液的制备(1) 采血采取的绵羊血与灭菌的保存液等量混合,置冰箱中,可保存数周,也可用抗凝方法(2) 洗涤血球先将抗凝血液离心沉淀(2000 cpm×5分钟)吸去上清。加入2~3倍的生理盐水并用毛细滴管反复吹

关于合成肽疫苗的分子组成介绍

  合成肽疫苗分子是由多个B细胞抗原表位和T细胞抗原表位共同组成的,大多需与一个载体骨架分子相耦联。合成肽疫苗的研究最早始于口蹄疫病毒(FMDV)合成肽疫苗,主要集中在FMDV 的单独B细胞抗原表位(VPI 环)或与T 细胞抗原表位结合而制备的合成肽疫苗研究。虽然取得了一定的进展,但仍未获得一种具有

合成肽疫苗的分子组成

合成肽疫苗分子是由多个B细胞抗原表位和T细胞抗原表位共同组成的,大多需与一个载体骨架分子相耦联。合成肽疫苗的研究最早始于口蹄疫病毒(FMDV)合成肽疫苗,主要集中在FMDV 的单独B细胞抗原表位(VPI 环)或与T 细胞抗原表位结合而制备的合成肽疫苗研究。虽然取得了一定的进展,但仍未获得一种具有理想

合成肽疫苗的分成组成

  合成肽疫苗分子是由多个B细胞抗原表位和T细胞抗原表位共同组成的,大多需与一个载体骨架分子相耦联。合成肽疫苗的研究最早始于口蹄疫病毒(FMDV)合成肽疫苗,主要集中在FMDV 的单独B细胞抗原表位(VPI 环)或与T 细胞抗原表位结合而制备的合成肽疫苗研究。虽然取得了一定的进展,但仍未获得一种具有

合成肽疫苗的结构特点和应用原理

合成肽疫苗分子是由多个B细胞抗原表位和T细胞抗原表位共同组成的,大多需与一个载体骨架分子相耦联。合成肽疫苗的研究最早始于口蹄疫病毒(FMDV)合成肽疫苗,主要集中在FMDV 的单独B细胞抗原表位(VPI 环)或与T 细胞抗原表位结合而制备的合成肽疫苗研究。虽然取得了一定的进展,但仍未获得一种具有理想

磁珠法分离T细胞和B细胞

基 本 方 案 1 用 AUTOMACS 系 统 进行 总 T 细胞、 CD4 + 细 胞 或 CD8+T细胞的自动分离材 料小鼠HBSS 洗涤缓冲液基 本 方 案 2 使 用 AUTOMACS 系 统 进 行 B 细胞的自动分选材 料小鼠HBSS 洗涤缓冲液MACS 缓冲液CD45R (B2 2

肽厉害SARSCoV2多肽池在新冠疫苗研发的多种应用

     周末结束了,享受了周末的狂欢,周一又要步入学习和工作了。临出门还反复查看手机、钥匙,光速跑下楼,OMG,口罩没带,天啦,这可是比没带手机还让人绝望的事情,怎么办,只能折返。。。。。。谁能想到2020年男女老少必备的单品是口罩,没有口罩,出门感觉像是在裸奔。这全是SARS-CoV-2惹的祸,

B细胞表位数据库简介与预测方法

抗原表位预测适用于已知一级结构的蛋白质或多肽抗原的线性表位的预测。人们通过观察抗原表位与已知氨基酸序列的蛋白质某些结构特征关系,发现一些蛋白质的序列或结构特征与抗原表位有关。在抗原抗体的结合反应中,抗原参与结合的部位称为 B 细胞抗原决定簇或者表位。从空间结构上看,B 细胞表位可分为线性表位(也

抗原表位的分类

根据抗原表位中氨基酸的空间结构特点,可将其分为顺序表位和构象表位。顺序表喂由连续线性排列的氨基酸构成,又称线性表位,而构象表位有不连续排列、但在空间上彼此接近形成特定构象的若干氨基酸组成

MHC-四聚体助力细胞治疗基础研究:CTL-表位筛选

据统计,2015 年,我国癌症新发人数为 429.2 万。死亡人数 281.4 万,平均 5 年生存率 36.9%。肺癌、胃癌、肝癌、食管癌占到总数的 57%。细胞治疗,治疗病人的个体化差异较大。细胞治疗大有向精准发展趋势。从临床角度,目前所开展的细胞治疗大多以 T 细胞为基础。血液肿瘤治疗,利

磁珠法分离小鼠T细胞和B细胞

PriCells: 磁珠法分离小鼠T细胞和B细胞 基本方案用AUTOMACS系统进行总T细胞、CD4+细胞或CD8+T细胞的自动分离 实验材料1、小鼠2、HBSS洗涤缓冲液3、MACS缓冲液4、磁珠5、RPMI-10完全培养基6、AUTOMACS系统和分选柱7、30μm尼龙网或40μm预分离滤膜 实

噬菌体展示技术的原理及应用

将编码多肽的外源DNA片段与噬菌体表面蛋白的编码基因融合(插入信号肽与衣壳蛋白基因间)后,以融合蛋白的形式呈现在噬菌体的表面,每个噬菌体只含1个外源基因,被展示的多肽或蛋白可保持相对的空间结构和生物活性,展示在噬菌体的表面。导入了各种各样外源基因的一群噬菌体,就构成一个展示各种各样外源肽的噬菌体展示

科学家发现与HIV控制相关的患者特异性抗原表位序列

  1月15日,德国马普所科研人员在PNAS上发表了题为“HIV peptidome-wide association study reveals patient-specific epitope repertoires associated with HIV control”的文章,通过HIV多肽

T细胞抗原受体

  1、在外周淋巴器官中大多数成熟T细胞(95%)的TCR分子,由α链和β链经二硫键连接的异二聚体分子,也称TCR-2.T细胞特异性免疫应答主要是这一类T细胞完成。  2、少数成熟T细胞的TCR分子是由γ链和δ链组成的异二聚体分子,结构与TCRαβ相似,也称TCR-1.它可直接识别抗原(多肽、类脂分

建立用于抗原表位精细作图的肽生物合成法

  上海市计划生育科学研究所研究员徐万祥和复旦大学生命科学院谢毅课题组合作,建立了专门用于线性表位精细鉴定的生物合成肽法。相关成果日前发表于美国《科学公共图书馆·综合》期刊。   据介绍,新改良法仍使用截短谷胱甘肽巯基转移酶(GST188)作为基因工程表达任意短肽的载体,但通过在pXXGST-1质