溶血空斑实验——小室液相法

溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell, PFC)试验,是一种体外检测抗体形成细胞的方法。(来源:免疫学实习指导--北京大学医学部基础医学院免疫学系)实验方法原理溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell, PFC)试验,是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔,四天后将小鼠杀死,取脾脏制成脾细胞悬液,内含抗体形成细胞。然后将脾细胞、绵羊红细胞,补体混合孵育。由于PFC 所分泌的抗体和绵羊红血球结合形成抗原抗体复合物,在补体作用下可使红细胞溶解,于特制的小室内形成肉眼可见的溶血空斑。一个空斑即代表一个抗体形成细胞。实验材料ICR小鼠试剂、试剂盒绵羊红血球补体仪器、耗材解剖器械试管吸量管载玻片石蜡盘酒精灯微量加样器实验步骤1. 小鼠免疫及脾细胞悬液的制备 将5 %SRBC0.4 ml注射于小鼠腹腔,4 天后拉脱颈椎处......阅读全文

关于溶血空斑试验的基本信息介绍

  溶血空斑试验又称体外抗体形成细胞测定技术。是一种体外检测单个抗体形成细胞(浆细胞)的方法。其基本 原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合,在补体参与下, 使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏 的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空 斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空

空斑的概念

空斑( lacuna)在将产生大肠杆菌素的细菌和对该种大肠杆菌素敏感的指示菌与软琼脂混合涂在琼脂面上培养时,即可见到单个细胞产生的大肠杆菌素对指示菌起生长抑制作用的小形抑制斑,这就是空斑。初看似如细菌噬菌体形成的噬菌斑,但它没有感染性,为了与噬菌斑相区别,H.Ozeki(1959)将之命名为空斑。

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验_蚀斑试验法

实验方法原理空斑形成单位 (plaque forming units, PFUs)试验,是将不同稀释倍数的动物病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合,当病毒颗粒在一大片宿主细胞上引发感染时,会造成细胞被溶解而形成空斑,每个空斑系由一个病毒颗粒所造成,计算空斑数目再乘以稀释倍数,即可得知原来的病毒感染单位

杆状病毒表达系统的空斑纯化法介绍

  由于在重组病毒中多角体基因被外源基因所取代,因此形成的子代病毒不含有包含体,为包含体阴性病毒。包含体阴性病毒与包含体阳性病毒(由野生型病毒形成)在平板中形成的空斑形态是不同的。因此,可在光学显微镜下,利用这一特征筛选出含外源基因的重组病毒并加以纯化[12]。这正是目前使用最普遍的有效方法。  1

液相色谱流动相走空

泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完,否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环,最终产生漏液。

CWLM高效液液萃取机顶空液相微萃取气相色谱法

采用CWL-M高效液液萃取机液相微萃取与气相色谱联用技术测定阿奇霉素中二氯甲烷和丙酮的残留量。以苯乙酮为萃取溶剂,萃取时间30 min,萃取温度60℃,萃取液滴体积2μL。在浓度为20.0μg/g~120. 0μg / g范围内,二氯甲烷的外标曲线为Y =0.009 9X -0. 088 2,相关系

XSF1-防火涂料/小室法

XSF-1 防火涂料/小室法厂家:绍兴市容纳测控技术有限公司一、产品介绍本仪器适用于在实验室条件下定量测试涂覆于基材表面防火涂料的阻燃性能,以其燃烧失重,炭化体积来评定防火涂料的优劣。二、执行标准GB12441-2005《饰面型防火涂料防火性能分级及试验方法—小室法》 三、产品特点机箱材质采用304

体液免疫的B细胞的基本内容

  原发性免疫缺陷和继发性免疫缺陷均可导致体液免疫功能下降。原发性体液免疫功能缺陷可能由于B细胞分化障碍,细胞内合成Ig功能紊乱或由于抑制性细胞功能过强。继发性体液免疫功能降低可能由于蛋白质大量丢失,蛋白质吸收障碍、营养不良、免疫抑制治疗的副作用,病毒感染(艾滋病)等。在诊断原发性体液免疫功能缺损中

关于B细胞数目及功能的检测的介绍

  原发性免疫缺陷和继发性免疫缺陷均可导致体液免疫功能下降。原发性体液免疫功能缺陷可能由于B细胞分化障碍,细胞内合成Ig功能紊乱或由于抑制性细胞功能过强。继发性体液免疫功能降低可能由于蛋白质大量丢失,蛋白质吸收障碍、营养不良、免疫抑制治疗的副作用,病毒感染(艾滋病)等。在诊断原发性体液免疫功能缺损中

体液免疫功能检查B细胞数目及功能的检测

  原发性免疫缺陷和继发性免疫缺陷均可导致体液免疫功能下降。原发性体液免疫功能缺陷可能由于B细胞分化障碍,细胞内合成Ig功能紊乱或由于抑制性细胞功能过强。继发性体液免疫功能降低可能由于蛋白质大量丢失,蛋白质吸收障碍、营养不良、免疫抑制治疗的副作用,病毒感染(艾滋病)等。在诊断原发性体液免疫功能缺损中

实验室分析方法气相色谱顶空分析法顶空固相微萃取法

顶空固相微萃取是将固相微萃取和顶空进样相结合的一种分析技术。顶空固相微萃取的装置由手柄和萃取头组成,通过萃取头的涂层对顶空中的有机挥发性物质的吸附和随后的解吸脱附分析来完成分析。顶空固相微萃取分析原理的示意见图4图4顶空固相微萃取原理示意顶空固相微萃取分析中萃取头具有一定的预浓缩作用,分析的灵敏度高

实验室分析方法气相色谱顶空分析法的静态顶空分析法

静态顶空分析法是顶空分析法发展中所出现的最早形态,其原理的示意图见图1。它是在一定的温度条件下,样品中挥发性物质在气液(或气固)两相间分配,达到平衡时,取液(固)上蒸气相进行分析,被测组分的浓度遵循c2=co(K+β)。图1静态顶空示意静态顶空分析法在仪器模式上可以分为三类:顶空气体直接进样模式、平

实验室分析方法气相色谱顶空分析法的动态顶空分析法

动态顶空分析法是一种连续的顶空技术,该方法是利用气体把样品中挥发性物质吹扫出来,通过固体吸附柱或冷冻捕集等方法将吹扫出来的组分进行分离富集,然后用反吹法把吸附的化合物吹脱出来直接进入色谱仪进行分析。这种分析方法不仅适用于复杂基质中挥发性较高的组分,对较难挥发及浓度较低的组分也同样有效。动态顶空分析可

空斑形成细胞检测方法有哪些

  是体外检测B细胞功能的一种方法。该法最早用于实验动物的PFC测定。是以SRBC作为抗原免疫小鼠,从免疫小鼠脾脏分离淋巴细胞或直接用脾细胞,将其与高浓度SRBC混合于琼脂中,经37℃,5%CO2温育后,在补体参与下抗体形成细胞周围的SRBC溶解而形成溶血小区,即溶血空斑(plaque)。一个空斑代

气相法液相法固相法优缺点

气相法液相法固相法优点:分离效率高,分析速度快,样品用量少和检测灵敏度高。选择性好,可分离、分析恒沸混合物,沸点相近的物质,某些同位素,顺式与反式异构体邻、间、对位异构体,旋光异构体等。气相法液相法固相法缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维护费用贵,分析时间一般比气相长。检测器气相色谱法中可以使

顶空液相微萃取技术原理

顶空液相微萃取顶空液相微萃取(Headspace Liquld-phase Microextractionhs,HS-LPME)是将有机溶剂液滴悬于样品之上,顶空吸附样品中的挥发性组分。目标组分由样品基质挥发至气态,再被有机溶剂萃取。对于挥发性较强的目标组分,这一传质过程可以很快完成,而且可以有效消

transwell小室清洗方法

先用清水洗干净,然后用胰酶消化1小时,最后用75%的酒精浸泡过夜,使用前,在紫外灯下面照射1小时即可。Transwell小室这项技术的主要材料是Transwell小室(Transwell chamber,Transwell insert),其外形为一个可放置在孔板里的小杯子,不同厂家对Transwe

transwell小室清洗方法

先用清水洗干净,然后用胰酶消化1小时,最后用75%的酒精浸泡过夜,使用前,在紫外灯下面照射1小时即可。Transwell小室这项技术的主要材料是Transwell小室(Transwell chamber,Transwell insert),其外形为一个可放置在孔板里的小杯子,不同厂家对Transwe

Transwell小室的应用

(1)共培养体系:小于3.0um孔径条件下,细胞不会迁徙通过,因此,若研究不涉及细胞运动能力,不需要细胞穿过聚碳酸酯膜,则应选择3.0µm以下孔径。常用0.4、3.0µm。常用的是0.4µm。将细胞A种于上室,细胞B种于下室,可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的影响。(2)趋化性实验:可用5

砷斑法的原理

砷斑法也就是马氏试砷法Zn、盐酸和试样混在一起,将生成的气体导入热玻璃管,若试样中有砷的化合物存在,就会生成AsH3,因生成的AsH3在加热部位分解产生As,As积集而成亮黑色的“砷镜”(能检出0.007mgAs)。“砷镜”如果能用次氯酸钠溶液洗涤而溶解,则证明是砷。化学方程式:As2O3+6Zn+

溶血实验在研究中应用的可能性

1 溶血空斑实验溶血空斑实验是体外检测单个抗体形成细胞(B淋巴细胞)的一种方法,即将经绵羊红细胞(SRBC)免疫过的家兔淋巴结或小鼠脾脏制成细胞悬液,与一定量的SRBC结合,于37℃作用下,免疫活性淋巴细胞能释放出溶血素,在补体的参与下,使抗体形成细胞周围的SRBC溶解,从而在每一个抗体形成细胞周围

溶血实验在研究中应用的可能性

1 溶血空斑实验溶血空斑实验是体外检测单个抗体形成细胞(B淋巴细胞)的一种方法,即将经绵羊红细胞(SRBC)免疫过的家兔淋巴结或小鼠脾脏制成细胞悬液,与一定量的SRBC结合,于37℃作用下,免疫活性淋巴细胞能释放出溶血素,在补体的参与下,使抗体形成细胞周围的SRBC溶解,从而在每一个抗体形成细胞周围

溶血实验在研究中应用的可能性

1 溶血空斑实验溶血空斑实验是体外检测单个抗体形成细胞(B淋巴细胞)的一种方法,即将经绵羊红细胞(SRBC)免疫过的家兔淋巴结或小鼠脾脏制成细胞悬液,与一定量的SRBC结合,于37℃作用下,免疫活性淋巴细胞能释放出溶血素,在补体的参与下,使抗体形成细胞周围的SRBC溶解,从而在每一个抗体形成细胞周围

高效液相层析法

高效液相层析法(HPLC)是近二十年来发展起来的一项新颖快速的分离技术。它是在经典液相层析法基础上,引进了气相层析的理论具有气相层析的全部优点。由于HPLC分离能力强、测定灵敏度高,可在室温下进行,应用范围极广,无论是极性还是非极性,小分子还是大分子,热稳定还是不稳定的化合物均可用此法测定。对蛋白质

气相色谱技术之顶空进样法

顶空进样法是气相色谱特有的一种进样方法。适用于挥发性大的组分分析。测定时,精密称取标准溶液和供试品溶液各3-5 ml分别置于容积为8 ml的顶空取样瓶中。将各瓶在60摄氏度的水浴中加热30-40 min,使残留溶剂挥发达到饱和,再用在同一水浴中的空试管中加热的注射器抽取顶空气适量(通常为1 ml)。

溶血实验

  溶血试验是对人体内的红细胞进行红细胞破裂溶解检测。主要用于溶血性贫血的病因诊断。溶血是指红细胞破裂溶解现象。很多理化因素都可以引起溶血。

B细胞功能的检测

一、体内试验   B细胞受抗原或促有丝分裂原刺激后,可行分裂增殖并分化成熟为抗体生成细胞,且分泌相应的Ig。B细胞功能减低或缺陷,可表现为体内Ig和血型抗体量下降或缺如,患者对外源性抗原的应答能力减弱或缺如,仅产生极低或不能产生特异性抗体,故临床定量测定受检者血清中各种Ig量和相应血型抗体,可判断B

B细胞功能检测介绍

一、体内试验 B细胞受抗原或促有丝分裂原刺激后,可行分裂增殖并分化成熟为抗体生成细胞,且分泌相应的Ig。B细胞功能减低或缺陷,可表现为体内Ig和血型抗体量下降或缺如,患者对外源性抗原的应答能力减弱或缺如,仅产生极低或不能产生特异性抗体,故临床定量测定受检者血清中各种Ig量和相应血型抗体,可判断B细胞

补体测定实验——溶血试验(CH50)法

实验材料血清试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液生理盐水NaClNa2HPO4KH2PO4硫酸镁溶液仪器、耗材水平离心机水浴箱分光光度计实验步骤一、材料准备1.  浓度为1×10 g/ml 的绵羊红细胞配制(1)取经稀释洗涤后的绵羊红细胞配成较5%稍浓的细胞悬液。(2)取50%细胞悬液1ml,加于14ml蒸馏水

实验室分析方法气相色谱顶空分析法的分类

顶空分析法主要可分为三类:静态顶空分析法,动态顶空分析法(或称吹扫捕集)和顶空固相微萃取法。