用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验_蚀斑试验法
实验方法原理空斑形成单位 (plaque forming units, PFUs)试验，是将不同稀释倍数的动物病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合，当病毒颗粒在一大片宿主细胞上引发感染时，会造成细胞被溶解而形成空斑，每个空斑系由一个病毒颗粒所造成，计算空斑数目再乘以稀释倍数，即可得知原来的病毒感染单位的浓度。病毒空斑（又叫蚀斑）如同噬菌体的噬斑，一个空斑为一个病毒体的繁殖后代品系。在细胞培养中做空斑是一种较精确地测定病毒感染力的方法，将病毒各稀释度种入单层细胞瓶，吸附1 h 后，在单层细胞上覆以营养琼脂培养基，病毒在细胞中繁殖使细胞死亡。但由于琼脂的限制只能感染邻近的细胞，形成「空斑」的退化细胞区，经中性红活细胞染料着色后，活细胞显红色，而空斑区细胞已退化不着色，形成不染色区域。凡是能在细胞培养物中产生细胞病变效应 (Cytopathic Effect, CPE) 的病毒都可采用空斑技术来测定其滴度。实验材料病毒试剂、试剂盒台盼蓝......阅读全文
用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验_蚀斑试验法
实验方法原理空斑形成单位 (plaque forming units, PFUs)试验，是将不同稀释倍数的动物病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合，当病毒颗粒在一大片宿主细胞上引发感染时，会造成细胞被溶解而形成空斑，每个空斑系由一个病毒颗粒所造成，计算空斑数目再乘以稀释倍数，即可得知原来的病毒感染单位
用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验
实验方法原理 空斑形成单位 (plaque forming units, PFUs)试验，是将不同稀释倍数的动物病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合，当病毒颗粒在一大片宿主细胞上引发感染时，会造成细胞被溶解而形成空斑，每个空斑系由一个病毒颗粒所造成，计算空斑数目再乘以稀释倍数，即可得知原来的病毒感
用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验4
在细胞培养板内做病毒空斑形成单位试验实验材料病毒试剂、试剂盒95% 酒精胰酶含 5%小牛血清的 Eagle仪器、耗材细胞培养板实验步骤(1) 用细胞培养板 (6孔)，若用旧板，洗净后浸于 95% 酒精中5 min, 再用紫外线照射 2-4 h备用，新板可直接使用。(2) 将传代细胞系经胰酶消化分散后
用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验3
用传代细胞系平皿法测量病毒空斑形成单位实验材料病毒细胞系试剂、试剂盒含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培养液仪器、耗材培养皿实验步骤(1) 将单层细胞 (2X 106/ml, 6 ml)培养在直径 60 mm 的平皿上，生长液为含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培养液，加
用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验2
虫媒病毒在鸡胚成纤维细胞中的空斑形成单位试验实验方法原理病毒常杀死被病毒感染的细胞 即产生致细胞病变作用。用只染活细胞（如中性红）或只染死细胞（如台盼兰）的染料对单层细胞染色以检测空斑。也可以使用活性染料溴化二苯基四氮唑(MTT) 进行染色，使用 MTT 的优点是黄色的 MTT 能将活细胞染成深蓝色
病毒蚀斑技术介绍
1952年，Dulbecco把噬菌体空斑技术应用于动物病毒学，从而使病毒蚀斑技术（Virus plaque formation）成为许多病毒的滴定和研究方法。 1、原理 病毒感染细胞后，由于固体介质的限制，释放的病毒只能由最初感染的细胞向周边扩展。经过几个增殖周期，便形成一个局限性病变细胞区，此
病毒蚀斑技术（2）
(三) 操作实例1.赤羽病病毒(AKV)的滴定或纯化 (1) 于55mm直径的灭菌塑料培养皿中培养绿猴肾细胞(Vero)，使形成单层。细胞培养时间约3－4天，接种量约为2 000 000/ml个细胞。选取单层细胞全部覆盖，不留有空洞的培养皿用作试验。 (2) 用细胞培养液对AKV病毒作10倍
病毒蚀斑技术（1）
1952年，Dulbecco把噬菌体空斑技术应用于动物病毒学，从而使病毒蚀斑技术 (Virus plaque formation)成为许多病毒的滴定和研究方法。(一) 原理 病毒感染细胞后，由于固体介质的限制，释放的病毒只能由最初感染的细胞向周边扩展。经过几个增殖周期，便形成一个局限性病变细胞区
蚀斑减少中和实验
选择国内外具有代表性的毒株10株，其中HTN型6株(76-118、A9、A16、A537、陈株和LR1)和SEO型4株(UR、沟3、R22和湖北-1)，沟3株病毒免疫家兔，采血分离血清，分别与上述病毒株进行PRNT，测定血清中和抗体滴度。
蚀斑法可用于慢病毒吗
可用。根据查询蚀斑法资料显示，蚀斑法可用于慢病毒，使病毒在细胞单层上形成局限性病灶的方法，又称空斑技术，蚀斑产生机制将稀释的病毒悬液接种于良好的细胞单层上，使细胞与病毒吸附一定时间后，再于单层细胞上覆盖以营养琼脂培养基进行培养。
什么是蚀斑啊
钙化、蚀斑和蛀孔——辩别出土古玉真伪的自我心得对出土古玉真伪的辨别，尤如学习打拳，得有三十六招、七十二式。钙化、蚀斑和蛀孔，仅能作为判断古玉真伪的二、三个要点。不过，根据笔者的体会，学好这“三扳斧”，对于刚入“山门”的古玉收藏爱好者来说，还是挺管用的，而且相对来说它还比较容易掌握。首先谈谈本人对钙化
什么叫蚀斑挑选
一般这还是指对能形成CPE的病毒的操作。CPE：致细胞病变效应。蚀斑挑选：病毒感染单层贴壁细胞后，用牙签、枪头等挑取单个蚀斑（这决定了必须有比较明显的CPE），然后稀释后再重复感染新的单层细胞，再进行挑选，经几轮筛选，可以得到比较纯的病毒。菌种里面是直接挑菌落，不需要看CPE。
什么叫蚀斑挑选
一般这还是指对能形成CPE的病毒的操作。CPE：致细胞病变效应。蚀斑挑选：病毒感染单层贴壁细胞后，用牙签、枪头等挑取单个蚀斑（这决定了必须有比较明显的CPE），然后稀释后再重复感染新的单层细胞，再进行挑选，经几轮筛选，可以得到比较纯的病毒。菌种里面是直接挑菌落，不需要看CPE。
重组杆状病毒的纯化实验
实验材料 杆状病毒试剂、试剂盒 琼脂牛血清仪器、耗材 培养瓶冻存管实验步骤 1. 制备病毒上清的系列稀释液，该病毒上清获得自在无血清完全培养液中转染 pAC360β-gal DNA的细胞。在含150 μg/ml X-gal 的琼脂糖顶层覆盖物下病毒形成蚀斑。 2. 当蚀斑形成后，用灭菌巴斯德吸管
溶血空斑试验——小室液相法
一、基本原理 溶血空斑试验，又称空斑形成细胞（Plague Forming Cell, PFC）试验，是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔，四天后将小鼠杀死，取脾脏制成脾细胞悬液，内含抗体形成细胞。然后将脾细胞、绵羊红细胞，补体混合孵育。由于PFC
Celigo技术在基因治疗和病毒研究中的应用（一）
Biogen于1978年由几位著名的生物学家，包括爱丁堡大学的Kenneth Murray、麻省理工学院的Phillip Allen Sharp，以及哈佛大学的Walter Gilbert和Charles Weissmann在日内瓦成立。后来，Walter Gilbert和Phillip A
重组病毒的蛋白质分析实验
实验材料 Sf细胞试剂、试剂盒 胎牛血清PBSSDS蛋白酶抑制剂裂解缓冲液仪器、耗材 培养瓶培养箱离心机转子水浴锅实验步骤 1. 接种2.5×108 Sf9细胞于含5 ml 完全培养液/10%胎牛血清的25 cm2 培养瓶中，27℃温育≥ 2 h。从含无血清完全培养液和重组蚀斑的1 ml
重组病毒的蛋白质分析实验
实验材料Sf细胞试剂、试剂盒胎牛血清PBSSDS蛋白酶抑制剂裂解缓冲液仪器、耗材培养瓶培养箱离心机转子水浴锅实验步骤1. 接种2.5x108 Sf9细胞于含5 ml 完全培养液/10%胎牛血清的25 cm2 培养瓶中，27℃温育≥2 h。从含无血清完全培养液和重组蚀斑的1 ml 病毒贮液中取0.5
Celigo技术在基因治疗和病毒研究中的应用（二）
蚀斑实验流程示例见下图：经典的病毒感染滴度就是通过蚀斑实验来测定的。通常，将细胞接种在多孔培养板中形成汇合的单细胞层。在第二天，将细胞用稀释的病毒样品接种一段特定的时间（时间取决于滴定的辅助病毒）。除去接种物并用新鲜培养基换液，再将细胞孵育若干天，直到形成大到足以通过肉眼观察和计数的蚀斑。传统的蚀斑
Celigo技术在基因治疗和病毒研究中的应用（三）
Disucssion这里所介绍的使用荧光检测的自动蚀斑计数方法有助于加快蚀斑检测的速度。但是，有几种类型的感染性病毒滴度实验不会形成蚀斑。半数组织培养感染剂量（TCID50）就是另一种常用的病毒滴定方法。TCID50是终点稀释测定法，用于确定感染50％接种细胞所需的病毒样品稀释度。由于蚀斑和TCID
杆状病毒储液制备实验——噬斑试验测定滴度
实验材料对数生长期单层培养的 Sf 9 细胞试剂、试剂盒杆状病毒储液昆虫细胞培养液仪器、耗材琼脂糖顶层覆盖物台盼蓝顶层覆盖物（选用）60 mm 组织培养皿27℃ 培养箱1.5 ml 带螺口盖的冻存管实验步骤1. 用含 10％ 胎牛血清的 TNM-FH 培养液稀释处于对数生长期的 Sf 9 细胞至约
溶血空斑试验
实验概要本实验介绍了溶血空斑试验即小室液相法(Test of Plague Forming Cell)的基本原理及操作步骤。实验原理溶血空斑试验，又称空斑形成细胞（Plague Forming Cell，PFC）试验，是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔，四
溶血空斑试验
实验概要本实验介绍了溶血空斑试验即小室液相法(Test of Plague Forming Cell)的基本原理及操作步骤。实验原理溶血空斑试验，又称空斑形成细胞（Plague Forming Cell，PFC）试验，是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔，四
重组杆状病毒的纯化实验——编码β半乳糖苷酶
杆状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒，可用于（1）作为基因工程病毒杀虫剂 ,提高害虫防治效率（2）作为超高效的真核基因表达载体 ,生产有用的工程蛋白（3）研究杆状病毒基因组的结构与功能（4）研究真核基因表达的调控机制。实验方法原理由于昆虫杆状病毒环状双链DNA基因组很大 (约 13
斑贴试验的实验注意事项
1.斑贴期间，嘱患者忌剧烈活动，勿洗澡，避免搔抓，减少出汗，并避免日光照射。2.在皮炎急性期最好不要进行斑贴试验。3.多种因素可影响斑贴试验结果的准确性和可重复性，如斑试物剂量和体积、测试部位及皮肤状况、斑试物与皮肤贴的紧密程度、观察时间、抗原浓度和斑试器等。
斑贴试验的实验目的和原理
斑贴试验在临床上用于检测潜在的过敏原或刺激物，多用于临床诊断变态反应性疾病，如接触性皮炎、湿疹等，操作简单、检査较安全，不良反应极少，且试验结果准确、可靠。因背部、上臂和前臂屈侧皮肤有较多树突状细胞，常作为斑贴试验的部位，其中以上背部为最佳部位。斑贴试验的主要目的是寻找致敏原，找出致敏原因，从而对患
溶血空斑实验——小室液相法
溶血空斑试验，又称空斑形成细胞（Plague Forming Cell, PFC）试验，是一种体外检测抗体形成细胞的方法。（来源：免疫学实习指导--北京大学医学部基础医学院免疫学系）实验方法原理溶血空斑试验，又称空斑形成细胞（Plague Forming Cell, PFC）试验，是一种体外检测抗体
溶血空斑形成试验
一、原理： 溶血空斑形成试验的基本原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合，在补体参与下，使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏的绵羊红细胞溶解，形成肉眼可见的溶血空斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空斑试验，间接溶血空斑试验，琼脂固相法，小室液相法，单细胞层法等等。下面介
溶血空斑形成试验
实验方法原理溶血空斑形成试验的基本原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合，在补体参与下，使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏的绵羊红细胞溶解，形成肉眼可见的溶血空斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空斑试验，间接溶血空斑试验，琼脂固相法，小室液相法，单细胞层法等等。实验材料
溶血空斑形成试验
实验方法原理 溶血空斑形成试验的基本原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合，在补体参与下，使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏的绵羊红细胞溶解，形成肉眼可见的溶血空斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空斑试验，间接溶血空斑试验，琼脂固相法，小室液相法，单细胞层法等等。实验材