补体测定实验——溶血试验(CH50)法
实验材料血清试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液生理盐水NaClNa2HPO4KH2PO4硫酸镁溶液仪器、耗材水平离心机水浴箱分光光度计实验步骤一、材料准备1. 浓度为1×10 g/ml 的绵羊红细胞配制(1)取经稀释洗涤后的绵羊红细胞配成较5%稍浓的细胞悬液。(2)取50%细胞悬液1ml,加于14ml蒸馏水中测值为 。按下式求出于一定体积的5%细胞悬液中应加入稀释液的毫升数。 Vi为配制的50%细胞悬液体积,Vf为于一定量5%细胞悬液中应加入稀释的ml数:Ds为已知标准化的1×100个细胞/ml 悬液的OD540值─0.385。 2. 致敏绵羊细胞取绵羊红细胞悬液(1×102/ml)加等量的溶血素(2 U/ml)。充分混合。置37℃水浴中作用30分钟,每隔10分钟摇动一次以免细胞下降即成5×108/ml致敏羊红细胞。二、操作步骤1. 补体CH50单位测定&nb......阅读全文
补体测定实验——溶血试验(CH50)法
实验材料血清试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液生理盐水NaClNa2HPO4KH2PO4硫酸镁溶液仪器、耗材水平离心机水浴箱分光光度计实验步骤一、材料准备1. 浓度为1×10 g/ml 的绵羊红细胞配制(1)取经稀释洗涤后的绵羊红细胞配成较5%稍浓的细胞悬液。(2)取50%细胞悬液1ml,加于14ml蒸馏水
50%溶血试验(CH50)测定补体实验
50%溶血试验即求得能使50%致敏羊红细胞发生溶血的最小量血清,然后计算出每毫升血清中补体含量。以补体量作为横坐标,溶血百分数作为纵坐标,可得到一个清晰的“S”形曲线。在50%溶血周围,线段近似一条直线。因此当补体用量稍有变动,就可对溶血程度发生很大影响。所以用50%溶血作为终点要比100%溶血更为
血清总补体溶血活性(CH50)测定
绵羊红细胞(SRBC),与相应抗体(溶血素)结合后,可激活待检血清中的补体而导致SRBC溶血。其溶血程度与血清中补体的含量和功能有关。由于补体含量与溶血程度之间呈正相关,但不是直线关系,而呈S曲线关系,故通常取反应曲线中间部位即50%溶血(CH50)为判定终点。由于抗原抗体复合物激活的是补体的经典途
血清总补体溶血活性(CH50)测定
绵羊红细胞(SRBC),与相应抗体(溶血素)结合后,可激活待检血清中的补体而导致SRBC溶血。其溶血程度与血清中补体的含量和功能有关。由于补体含量与溶血程度之间呈正相关,但不是直线关系,而呈S曲线关系,故通常取反应曲线中间部位即50%溶血(CH50)为判定终点。由于抗原抗体复合物激活的是补体的经典途
总补体活性(CH50)的测定
【原理】 补体能使溶血素(抗绵羊红细胞抗体)致敏的绵羊红细胞(SRBC)发生溶血,当致敏的绵羊红细胞浓度恒定时,溶血程度与补体含量和活性呈正比例关系。因此,将新鲜待检血清做不同稀释后,与致敏红细胞反应,测定溶血程度,以50%溶血时的最小血清量判定终点,可测知补体总溶血活性。以50%溶血判断结果比10
血清总补体活性测定(CH50单位测定)
[实验原理] 补体能使抗体致民敏的羊红细胞发生溶血反应,根据溶血程度可测定补体总活性。以溶血百分率作纵坐标,相应的血清补体量为横坐标绘图,可知在 50%溶血附近补体的量与溶血的程度呈直线关系。因此以50%溶血作为终点较以100%溶血作为终点更为敏感。故称为50%溶血试验,即 CH50(5
简述遗传性补体缺陷病的临床表现
当患者反复发生细菌感染,尤其是化脓性细菌感染或萘瑟菌感染时应考虑到补体缺陷的可能。补体溶血试验CH50和CH100可确定是否有C1、C2、C3、C4、C5、C16、C7及C8功能缺陷。缺乏上述任何一种成分,CH50都会降低,CH50是在补体存在时使抗体致敏的羊红细胞发生溶血所致,因而是测定经典途
关于遗传性补体缺陷病的检查介绍
补体溶血试验CH50和CH100可确定是否有C1、C2、C3、C4、C5、C16、C7及C8功能缺陷。缺乏上述任何一种成分,CH50都会降低,CH50是在补体存在时使抗体致敏的羊红细胞发生溶血所致,因而是测定经典途径成分的。应用含唾液酸低的兔红细胞即APH50测定的溶血试验可检测旁路途径成分缺陷
免疫学实验血清总补体活性(CH50)介绍
血清总补体活性(CH50)介绍: 补体具有溶解靶细胞、促进吞噬、参与炎症反应等功能,同时补体还在免疫调节、清除免疫复合物、稳定机体内环境、参与变态反应及自身免疫性疾病起关键性作用。总补体活性和单个补体成分含量的变化,对某些疾病的诊断和疗效观察具有重要意义。总补体的测定主要反映补体经传统途径
遗传性补体缺陷病的诊断
当患者反复发生细菌感染,尤其是化脓性细菌感染或萘瑟菌感染时应考虑到补全缺陷的可能。补体溶血试验CH50和CH100可确定是否有C1、C2、C3、C4、C5、C16、C7及C8功能缺陷。缺乏上述任何一种成分,CH50都会降低,CH50是在补体存在时使抗体致敏的羊红细胞发生溶血所致,因而是测定经典途
血清补体总活性测定
1、原理补体能使抗体致敏的羊红细胞发生溶血反应,根据溶血程度可测定补体总活性。以溶血百分率作纵坐标,相应的血清量为横坐标绘图,可知在50%溶血附近补体的量与溶血程度呈直线关系。因此以50%溶血作为终点较以100%溶血作为终点更为敏感。故称为50%溶血试验,即 CH50(50%complement
CH50测定方法
CH50测定方法:1.红细胞浓度的调整2.溶血素滴定3.稀释缓冲液:磷酸缓冲液或巴比妥缓冲液等均可用于溶血试验。4.50%溶血标准管:做CH50试验时,应同时配制50%溶血标准管。5.50%溶血总补体值的计算
溶血素的实验原理
免疫溶血试验的原理是补体能使已被抗体致敏了的红细胞发生溶血。免疫溶血试验所参与的成分有补体,抗原(SRBC)及抗体(溶血素),这三种成分中如有两种是已知的就可测知第三个成分,稀释该成分可测定其效价或含量。如溶血素的滴定,溶血空斑试验,CH50试验,补体结合试验,抗补体试验等。
遗传性补体缺陷病的诊断及治疗措施
诊断 当患者反复发生细菌感染,尤其是化脓性细菌感染或萘瑟菌感染时应考虑到补全缺陷的可能。补体溶血试验CH50和CH100可确定是否有C1、C2、C3、C4、C5、C16、C7及C8功能缺陷。缺乏上述任何一种成分,CH50都会降低,CH50是在补体存在时使抗体致敏的羊红细胞发生溶血所致,因而是测
小儿免疫缺陷疾病的补体和吞噬细胞功能测定
1.补体测定 包括血清总补体溶血活性(CH50)、单个补体成分(如Clq、r、s,C2-9)和补体调节因子(如D因子、H因子、I因子、备解素和C1抑制因子)的测定。 2.吞噬细胞功能测定 包括周围血中性粒细胞计数和形态观察,以单克隆抗CD14抗体标记计数巨噬细胞,用硝基四唑氮蓝(NBT)还
微量补体溶血敏感试验的临床意义
异常结果 检查结果大于15,可确诊阵发性睡眠性血红蛋白尿。常以贫血或血红蛋白尿为首发症状,血红蛋白尿发作常在睡眠后明显,轻者尿呈葡萄酒色,重者呈酱油色。血红蛋白尿发作间歇长短不一,有的始终无血红蛋白尿发作,但常有含铁血黄素尿,发作时可有发热、黄疸、腰腹痛等急性溶血症状。皮肤粘膜可有轻度出血,部
微量补体溶血敏感试验的检查过程
用末梢血主要有耳垂取血和指尖取血两个部位,婴儿可在脚后跟取血。耳垂取血痛感较轻,但取血量较少,特别是耳垂较小的人比较难于取血。指尖取血痛感较明显,但采血量较多,特别是对于血常规化验,可得到较为稳定的测定结果。采血前应将皮肤清洗干净。在冬季寒冷的室外进到室内后不要立即取血,应使身体暖和以后,特别是
微量补体溶血敏感试验的注意事项
检查前禁忌:注意休息,保持空腹抽血。不要穿袖口过小、过紧的衣服,以避免在抽血时衣袖卷不上来或抽血后衣袖过紧,引起手臂血管血肿。 避免剧烈运动。 检查时要求:检查繁琐,可能需要时间较长,需要耐心等待结果。
血清补体检测之总补体溶血活性测定与血清C3测定
补体是血清中具有酶活性的一组不耐热的球蛋白,是抗体发挥溶细胞作用的必要补充条件。它由参与补体激活经典途径的9种成分C1(C1q、C1r、C1s)~C9、旁路途径的3种成分及其衍生物、B、D、P和H等因子组成。补体广泛参与机体灭活病原体的免疫反应,也参与破坏自身组织或细胞的免疫损伤。 总补体溶血
关于血清总补体活性(CH50)的简介
补体具有溶解靶细胞、促进吞噬、参与炎症反应等功能,同时补体还在免疫调节、清除免疫复合物、稳定机体内环境、参与变态反应及自身免疫性疾病起关键性作用。总补体活性和单个补体成分含量的变化,对某些疾病的诊断和疗效观察具有重要意义。总补体的测定主要反映补体经传统途径活化的活性程序。
体液免疫(humoral-immunity)功能的检测
一、补体测定1、血清总补体活性测定当兔抗羊红细胞血清与羊红细胞结合后,遇到补体即可使羊红细胞发生溶血,依据这一特点可建立测定血清中总补体活性的方法。当血清的效价和绵羊红细胞浓度保持一定的情况下,在规定的反应温度和时间内,溶血程度与补体量呈正相关。因此,通过测定溶血程度,即可测知补体的含量。目前常用的
补体测定
实验材料 血清试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液生理盐水NaClNa2HPO4KH2PO4硫酸镁溶液仪器、耗材 水平离心机水浴箱分光光度计实验步骤 一、材料准备 浓度为1×10 g/ml 的绵羊红细胞配制(1)取经稀释洗涤后的绵羊红细胞配成较5%稍浓的细胞悬液。(2)取50%细胞悬液1ml,加于14ml蒸馏
蔗糖溶血试验测定
蔗糖溶血试验(Sucrose hemolysis test) 静脉血1ml,以枸橼酸钠抗凝 【正常参考值】 阴 【异常结果分析】 阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)患者因红细胞膜有缺陷对补体敏感,在低离子强度的蔗糖溶液中发生溶血,呈阳性反应。部分再生障碍性贫血、自身免疫性溶血性
溶血反应(hemolytic-reaction)与补体结合试验(2)
凡最高稀释度的溶血素可呈现完全溶血者为一个单位。依上表结果第10管(即1:4000倍稀释)0.5毫升溶血素为一个单位,在溶血反应中常用 0.5毫升中含有2个溶血素单位的溶液,所以试验时应取1:2000倍稀释的溶液。 (2)补体单位滴定 依下表加入各试剂:
临床化学检查方法介绍微量补体溶血敏感试验
微量补体溶血敏感试验介绍: 微量补体溶血敏感试验是测定阵发性睡眠性血红蛋白尿患者红细胞对补体的敏感度,将红细胞分群。是阵发性睡眠性血红蛋白特异性检查。微量补体溶血敏感试验正常值: 检查结果小于15。微量补体溶血敏感试验临床意义: 异常结果:检查结果大于15,可确诊阵发性睡眠性血红蛋白尿。常以贫
溶血反应(hemolytic-reaction)与补体结合试验(1)
一、溶血反应 免疫血清与其相应的抗原细胞(血球、细菌及其组织细胞)相遇,并在补体的参与下可出现溶细胞反应。依抗原、抗体的种类不同可有溶血反应、溶菌反应等。 溶菌反应只在某些细菌中出现(如霍乱弧菌)。应用溶血反应是补体结合反应中不可少的因素。溶血反应是由于抗
小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒
小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 CH50 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 CH50与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠CH50,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的S
小鼠总补体(CH50)说明书使用目的
本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T20U/ml -500 U/ml使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中总补体(CH50)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠总补体(CH50)水平。用纯化的小鼠总补体(CH50)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被
大鼠总补体(CH50)酶联免疫分析(ELISA)
大鼠总补体(CH50)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中总补体(CH50)的活性。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠总补体(CH50)水平。用纯化的大鼠总补体(CH50)抗体包被微孔板,制成
简述血清总补体活性(CH50)临床意义
增高见于急性炎症感染、组织损伤、风湿热急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗死、伤寒、多发性关节炎、癌肿等。 降低见于急性肾小球肾炎、膜增殖性肾小球肾炎、系统性红斑狼疮(SLE)活动期、类风湿关节炎、病毒性肝炎、慢性肝病、亚急性细菌性心内膜炎、遗传性血管神经性水肿等。