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1、原理补体能使抗体致敏的羊红细胞发生溶血反应，根据溶血程度可测定补体总活性。以溶血百分率作纵坐标，相应的血清量为横坐标绘图，可知在50%溶血附近补体的量与溶血程度呈直线关系。因此以50%溶血作为终点较以100%溶血作为终点更为敏感。故称为50%溶血试验，即 CH50（50%complementhemolysis）。 2、主要试剂 （1）绵羊红细胞（sheepredbloodcell，SRBC） 自绵羊颈静脉采血，注入装有等量或二倍量阿氏（Alsever）液的无菌三角烧瓶中，轻摇3-5min，分装，4℃保存，可用2-3周左右。试验时，取一定量的SRBC用生理盐水洗涤3次，最后1次洗涤离心的条件每次试验要保持一致。试验时一般配成1×109SRBC/ml。为使每次试验时SRBC的浓度标准化，可根据经细胞计数器校准的浓度为1×109SRBC/ml的细胞悬液，用分光光度计测定其OD541nm值，以后每次试验均......阅读全文
一、补体测定1、血清总补体活性测定当兔抗羊红细胞血清与羊红细胞结合后，遇到补体即可使羊红细胞发生溶血，依据这一特点可建立测定血清中总补体活性的方法。当血清的效价和绵羊红细胞浓度保持一定的情况下，在规定的反应温度和时间内，溶血程度与补体量呈正相关。因此，通过测定溶血程度，即可测知补体的含量。目前常用的
可溶性抗原，如蛋白质、多糖、类脂质和病毒等，与相应抗体结合后，抗原抗体复合物可以结合补体，但这一反应肉眼不能察觉，如再加入红细胞和溶血素，即可根据是否出现溶血反应来判定反应系统中是否存在相应的抗原或抗体。这个反应就是补体结合反应。 补体结合反应是一种古老的血清学技术，Bordet和Geng
[实验原理] 补体能使抗体致民敏的羊红细胞发生溶血反应,根据溶血程度可测定补体总活性。以溶血百分率作纵坐标,相应的血清补体量为横坐标绘图,可知在 50%溶血附近补体的量与溶血的程度呈直线关系。因此以50%溶血作为终点较以100%溶血作为终点更为敏感。故称为50%溶血试验,即 CH50（5
四、荧光抗体的保存 以0～4℃或-20℃低温保存，防止抗体活性降低和蛋白变性。最好加入浓度为1：5000～10000的硫柳汞或1：1000～5000的叠氮钠防腐，小量分装如0.1～1ml，真空干燥后更易长期保存。[NextPage] 第三节 免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片
【原理】 补体能使溶血素（抗绵羊红细胞抗体）致敏的绵羊红细胞（SRBC）发生溶血，当致敏的绵羊红细胞浓度恒定时，溶血程度与补体含量和活性呈正比例关系。因此，将新鲜待检血清做不同稀释后，与致敏红细胞反应，测定溶血程度，以50%溶血时的最小血清量判定终点，可测知补体总溶血活性。以50%溶血判断
一、前言近百年来，“特效试剂”一直是分析化学家追求的目标。所谓“特效试剂”，就是指的是只与一种待测物质反应的试剂。事实上，目前使用的所谓的“铜试剂”、“铁试剂”、“硝酸试剂”等等，都是“盛名之下，其实难副”的。20世纪40-50年代追求合成特效试剂的狂热，早已降温。正在分析化学家心灰意冷之际，人们从
人血清补体含量相对稳定，只在患某些疾病时，血清补体总量或各成分含量才可能发生变动。目前可以根据补体的溶血活性测定其总含量，亦可用免疫扩散法定某些补体成分的含量。 恶性肿瘤等少数疾病病人血清补体总量可较正常人高2～3倍，对其意义并不清楚。在某些传染病中亦可见到代偿性增高。医
ELISA即酶联免疫吸附试验，是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和Perlmann于1971年最先应用该法进行了IgG定量测定，并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。 ELISA的基本原理是： &
ELISA即酶联吸附试验，是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和Perlmann于1971年最先应用该法进行了IgG定量测定，并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。 ELISA的基本原理是：①使抗原（或抗体）结
抗血清的制备 【原理】：用抗原刺激机体可以产生抗体，抗原的性质、纯度和活性影响其免疫动物后获得的抗体的的特异性和效价。在体外有目的的制备抗原，经初次、再次免疫的过程可以获得高质量的抗体。 【注意事项】 ①制备佐剂时，一定要顺着同一方向用劲磨。 ②检查油包水的方法：培养皿内加水，滴入混匀液
血清是常用的标本，血浆一般可视为与血清同等的标本，标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致，ELISA试剂盒分为内源性物质和外源性物质两种： 1． 内源性物质 普遍认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质，可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜
一、常用生化检测项目分析方法举例1．终点法检测 常用的有总胆红素(氧化法或重氮法)、结合胆红素(氧化法或重氮法)、血清总蛋白(双缩脲法)、血清白蛋白(溴甲酚氯法)、总胆汁酸(酶法)、葡萄糖(葡萄糖氧化酶法)、尿酸(尿酸酶法)、总胆固醇(胆固醇氧化酶法)、甘油三酯(磷酸甘油氧化酶酶法)、高密度脂蛋白胆
50%溶血试验即求得能使50%致敏羊红细胞发生溶血的最小量血清，然后计算出每毫升血清中补体含量。以补体量作为横坐标，溶血百分数作为纵坐标，可得到一个清晰的“S”形曲线。在50%溶血周围，线段近似一条直线。因此当补体用量稍有变动，就可对溶血程度发生很大影响。所以用50%溶血作为终点要比100%溶血更为
根据世界卫生组织（WHO）和国际免疫学会报告，30多种补体成分中通常只需检测C3、C4、Clq、B因子和C1酯酶抑制物等5种成分。测定方法大致可分为免疫溶血法和免疫化学法。免疫溶血法主要根据抗原与其特异性抗体（IgM、IgC型）结合可激活补体经典途径，导致细胞溶解。抗原为SRBC，抗体为兔或马抗SR
(2) 血清学诊断：包括补体结合试验、血凝抑制试验以及中和试验。血凝抑制抗体和 中和抗体存在于IgM和IgG两种免疫球蛋白中，而补体结合抗体只存在于IgG部分内。 ① 补体结合试验：特异性较高，是流行病学上确认乙脑的一种常用方法。 但因补体 结合抗体的出现较晚，动物大多于发病后2周左右才呈阳性反应
四种类型超敏反应发生的机制不同，同一抗原也可在不同条件下引起不同类型的超敏反应。四种类型超敏反应的免疫检测方法有所不同。Ⅰ型超敏反应主要检测过敏原和测定血清特异性IgE.Ⅱ型超敏反应的检测重点是抗血细胞抗体。Ⅲ型超敏反应主要检测循环免疫复合物。Ⅳ型超敏反应可用皮肤试验来检测。 一、过敏原皮肤试验
DNA倍体分析及细胞周期分析 在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成，但DNA含量仍为2N，为二倍体细胞,；处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N；正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞
绵羊红细胞（SRBC），与相应抗体（溶血素）结合后，可激活待检血清中的补体而导致SRBC溶血。其溶血程度与血清中补体的含量和功能有关。由于补体含量与溶血程度之间呈正相关，但不是直线关系，而呈S曲线关系，故通常取反应曲线中间部位即50％溶血（CH50）为判定终点。由于抗原抗体复合物激活的是补体的经典途
血清中有免疫复合物存在时，可与其本身的C1（内源性C1）结合。将被检血清56℃加热1h，能破坏结合的C1，空出补体结合位点。当加入豚鼠血清（外源性C1）及指示系统（致敏SRBC）时，CIC又可与外源性C1结合，使致敏SRBC的溶血被抑制。 1、试剂 （1）缓冲生理盐水 NaCl
一、补体分子的组分和命名 进入60年代后，由于蛋白质化学和免疫化学技术的进步，自血液中分离、纯化补体成分成功，现已证明补体是单一成分的论点是不正确的，它是由三组球蛋白大分子组成。即第一组分是由9种补体成分组成，分别命名为C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9
绵羊红细胞（SRBC），与相应抗体（溶血素）结合后，可激活待检血清中的补体而导致SRBC溶血。其溶血程度与血清中补体的含量和功能有关。由于补体含量与溶血程度之间呈正相关，但不是直线关系，而呈S曲线关系，故通常取反应曲线中间部位即50％溶血（CH50）为判定终点。由于抗原抗体复合物激活的是补体的经典途
随着基础医学深入研究，高新科技检测技术在检验医学的广泛应用，使国内血液各项检查项目水平明显提高，但相比之下，先进的技术及方法在体液学常规检查中应用较少，为了提高我国体液学检测水平，现将近年来国内外进展综述如下。 一、尿液沉渣检查及尿液蛋白分析 1.尿沉渣检验方法学进展主要是显微镜检查的标准化和沉
血液与尿液的补体测定： 血清总补体（CH50）增高见于各种炎症，也作为急性阶段的反应物质。某些恶性肿瘤补体活性增高。血清CH50降低常见于急慢性肾小球肾炎、溶血性贫血和系统性红斑狼疮。急性肾小球肾炎血C3下降，尤以链球菌感染后急性肾小球肾炎下降更为明显医学教育网`搜集整理。膜增生性肾小球肾炎、狼疮
免疫复合物在体内存在有两种方式，一是存在于血液中的循环免疫复合物（CIC），一是组织中固定的免疫复合物。免疫复合物的检测技术可分为抗原特异性方法和非抗原特异性方法。在大多数情况下，免疫复合物中的抗原性质不太清楚或非常复杂，所以抗原特异性方法并不常用。一、循环免疫复合物的检测根据免疫复合物的物理学、免
随着现代医学及相关科学技术的发展，各学科相互交叉和渗透，医学微生物学检验技术已深入到细胞、分子和基因水平，许多新技术、新方法已在临床微生物实验室得到广泛应用。医学微生物学实验室的基本任务之一是利用微生物学检验技术，准确、快速检验和鉴定临床标本中的微生物，并对引起感染的微生物进行耐药性监测，为临床对感
第一节 微生物形态学检查 细菌形态学检查是细菌检验的重要方法之一，它是细菌分类和鉴定的基础，可根据其形态、结构和染色反应性等，为进一步鉴定提供参考依据。 一、显微镜检查 由于细菌个体微小，肉眼不能看到，必须借助显微镜的放大才能看到。一般形态和结构可用光学显微镜观察，其内部的超微结构则需用电
补体(complement，C)是由近20种不同血清蛋白组成的多分子系统，约占血清球蛋白总量的10％。补体在血清中的含量相对稳定，不因免疫应答而增加，仅在某些病理情况下才会发生波动。补体系统的基本组成包括9种血清蛋白成分，按发现的先后顺序而分别命名为C1-9。补体是一个复杂的反应系统，除了溶解细胞和
实验材料 血清试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液生理盐水NaClNa2HPO4KH2PO4硫酸镁溶液仪器、耗材 水平离心机水浴箱分光光度计实验步骤 一、材料准备 浓度为1×10 g/ml 的绵羊红细胞配制（1）取经稀释洗涤后的绵羊红细胞配成较5%稍浓的细胞悬液。（2）取50%细胞悬液1ml，加于1
实验材料血清试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液生理盐水NaClNa2HPO4KH2PO4硫酸镁溶液仪器、耗材水平离心机水浴箱分光光度计实验步骤一、材料准备1. 浓度为1×10 g/ml 的绵羊红细胞配制（1）取经稀释洗涤后的绵羊红细胞配成较5%稍浓的细胞悬液。（2）取50%细胞悬液1ml，加于14
病毒或毒素与相应的抗体结合后，失去对易感动物的致病力，谓之中和试验。本试验主要用于：（1）从待检血清中检出抗体，或从病料中检出病毒，从而诊断病毒性传染病；（2）用抗毒素血清检查材料中的毒素或鉴定细菌的毒素类型；（3）测定抗病毒血清或抗毒素效价；（4）新分离病毒的鉴定和分型，中和试验不仅可在易感的实验