固体培养基上细菌培养实验_连续稀释法
实验方法原理通过连续稀释法滴定和分离细菌菌落。实验材料噬菌体试剂、试剂盒LB仪器、耗材试管平板实验步骤1. 在3个16~18 mm的无菌培养试管中各加人5 ml LB培养液。2. 吸取5 μl细菌培养液加人1号试管中振荡5 S。 3. 接着从1号试管吸5 μl稀释液加入2号试管振荡摇匀,再从2号试管吸5 μl稀释液加人3号试管振荡摇匀。 4. 从每个试管中分别取100 μl菌液涂布于LB平皿上,并且做好记号,待平板干后于37°C培养过夜。5. 计算每毫升细菌细胞数细菌细胞数/ml = 10X菌落数X稀释倍数。典型的饱和培养液含约109 细胞/ml。噬菌体悬浮液也可以连续稀释;一般存储液含约1011 噬菌体/ml 。6. 包裹好有单个菌落的平板,保存于4 °C以备进一步实验用。展开......阅读全文
小型连续发酵实验——连续培养法
在分批培养中,一次加入所有的培养基,不予补充,不再更换。随着微生物的活跃生长,培养基中营养物质逐渐消耗,有害代谢产物不断积累,细菌的对数生长期不可长时间维持。如果在培养器中不断补充新鲜营养物质,并及时不断地以同样速度排出培养物(包括菌体及代谢产物),理论上讲,对数生长期就可无限延长。实验方法原理在分
液体培养基与半固体培养基
液体培养基与半固体培养基除了在液体培养基中加入凝固剂制备的固体培养基外,一些上、由于天然团体基质制成的培养基同样属于固体培养基。在实验室是固体培养基一般是加入平器皿或是试管中,制成培养微生物的平板斜面,固体培养基为微生物提供一个营养表面,单个微生物细胞在营养表面进行繁殖形成单个菌落。半固体培养中凝固
噬菌体铺平板产生噬斑实验——连续稀释法
实验方法原理这种方法能从单个噬斑中分离出纯的噬菌体部落,而且可以对噬菌体母液进行浓度测定。实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒麦芽糖培养基仪器、耗材平板微波炉试管加热器毛细管实验步骤1. 在含0.2 %麦芽糖和10 mmol/L MgSO4的λ肉汤培养基培养大肠杆菌至饱和。加0.3 ml的大肠杆菌培养液到
细菌培养基
Preparation of LB Plate (Dr. Chastain)prepare LB plate with or without antibioticsBacterial Culture Media Recipes (WUGSC) M9 Plate Supplement (Gottsch
半固体双糖含铁培养基配置实验
实验方法原理该培养基用酚红作指示剂,碱性时呈红色,酸性时呈黄色,上层培养基中的乳糖用于鉴别肠道杆菌,致病菌不分解乳糖而大肠杆菌则能分解乳糖产酸使上层斜面变为黄色。还可检查细菌能否分解含硫氨基酸产生硫化氢,若产生硫化氢则与硫酸亚铁作用形成黑色硫化亚铁。硫代硫酸钠起还原作用,以防止硫化氢被氧化而影响结果
固体培养基的分类
固体培养基可以分为两类:一类是用天然的固体状物质制成的,如用马铃薯块、麸皮、米糠、豆饼粉、花生饼粉制成的培养基,酒精厂、酿造厂等常用这种培养基;另一类是在液体中添加凝固剂而制成的,如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。这种培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观察等。
固体培养基的原理
固体培养基的凝固剂一般不是微生物的营养成分,只起固化作用。理想的凝固剂应具备以下条件:不会被微生物分解利用;不会因高温灭菌而受到破坏;在微生物生长的温度范围内保持固体状态;对微生物及操作人员均无毒害作用;透明度好、凝固力强;价格低廉,配制方便。常用的凝固剂是琼脂。琼脂的主要成分是硫酸半乳聚糖,绝
稀释法克隆培养
实验方法原理 低密度接种细胞,培养至集落形成,细胞染色(用于克隆形成率和存活检测 ) 或用于筛选时分离细胞、然后扩增为细胞株。 实验材料 CHO细胞
稀释法克隆培养
实验方法原理低密度接种细胞,培养至集落形成,细胞染色(用于克隆形成率和存活检测 ) 或用于筛选时分离细胞、然后扩增为细胞株。实验材料CHO细胞 胰蛋白酶
稀释法克隆培养
实验方法原理低密度接种细胞,培养至集落形成,细胞染色(用于克隆形成率和存活检测 ) 或用于筛选时分离细胞、然后扩增为细胞株。实验材料CHO细胞胰蛋白酶仪器、耗材培养基吸管培养皿血细胞计数器实验步骤1. 细胞用胰蛋白酶(胰蛋白酶,0.25 %,1 : 250或相当活性)消化制备单细胞悬液。消化不充分会
关于固体培养基形式—平板培养基的简介
培养平板培养基(culture plate)是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式,它是冷却凝固后的固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面,常被简称为培养平板(plate)。也叫平面培养基、平皿培养基。 平板培养基常用于单孢分离,测定菌丝生长速度,观察菌落的形态,拮抗实验,测定
微生物固体培养实验——涂布法
实验材料细菌仪器、耗材涂布棒培养箱培养皿实验步骤一、实验准备 1. 涂布棒 (1)加热并弯曲一支直径4 mm 的玻璃管或巴斯德吸管制备涂布棒。(2)灭菌,将涂布棒的三角部分浸没于酒精中,从容器中取出后再通过灯焰,点燃其上的乙醇。 (3)待涂布棒上的火焰熄灭后,将其触碰无菌琼脂平板的表面使其冷却。
简介固体培养基的原理
固体培养基的凝固剂一般不是微生物的营养成分,只起固化作用。理想的凝固剂应具备以下条件:不会被微生物分解利用;不会因高温灭菌而受到破坏;在微生物生长的温度范围内保持固体状态;对微生物及操作人员均无毒害作用;透明度好、凝固力强;价格低廉,配制方便。常用的凝固剂是琼脂。琼脂的主要成分是硫酸半乳聚糖,绝
固体培养基的分类介绍
在一般培养温度下呈固体状态的培养基都称固体培养基。在液体培养基中加入1.5%~2.0%左右的琼脂,加热至100℃溶解,40℃下冷却并凝固,使其成为固体状态即为固体培养基。 固体培养基可以分为两类:一类是用天然的固体状物质制成的,如用马铃薯块、麸皮、米糠、豆饼粉、花生饼粉制成的培养基,酒精厂、酿
固体培养基有何用途
固体培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观察等。 固体培养基可以分为两类:一类是用天然的固体状物质制成的,如用马铃薯块、麸皮、米糠、豆饼粉、花生饼粉制成的培养基,酒精厂、酿造厂等常用这种培养基;另一类是在液体中添加凝固剂而制成的,如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基
固体培养基的制作流程
1 加热,将琼脂融化 2 如果是要做试管,就加分装3ml培养基到试管,塞上试管塞,如果是做平板,就将培养基倒入锥形瓶中 3 按照培养基规定的灭菌方式灭菌 4 如果是斜面,则将灭菌后的试管放成一个梯度,是培养基形成一个斜面,如果是平板,就趁培养基凝固前将其倒入平板中,每个大约25ml,平板放
细菌培养基配方
1、细菌培养基配方一 牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克 ,蛋白胨1.0克,氯化钠 0.5克,琼脂 1.5克,水 100毫升在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸
有鞭毛的细菌在半固体培养基内的生长现象
(一)知识目标 1、掌握 细菌生长繁殖的条件、方式和速度。 2、熟悉 细菌群体生长繁殖的规律、细菌在培养基中的生长现象、细菌代谢产物及医学意义。 3、了解常用培养基的类型。 (二)能力目标 1、具备在生活中学习并对生活现象进行分析思考以及将书本知识与生活和临床实际结合的能力; 2、具
细菌的人工培养――培养基
培养基是人工配制的适合于细菌生长繁殖的营养基质。培养基按其理化性状可分为液体、半固体和固体三大类。液体培养基可供细菌增菌及鉴定使用;在液体培养基中加入0.2%~0.5%的琼脂即成为半固体培养基,可用于细菌动力的观察及保存菌种;如琼脂量为2%~3%时,即为固体培养基,可供细菌的分离培养、保存菌种等使
微生物固体培养实验——平板划线法
实验材料细菌仪器、耗材接种环培养皿实验步骤一、实验准备 1. 接种环 (1)灭菌,将接种环置于本生灯火焰中灼烧直至变红。 (2)冷却,将接种环触碰无菌琼脂平板的表面直至其不发出咝咝声。二、实验步骤1. 采用无菌操作技术,用接种环将接种物从平板的一侧开始划线。 2. 重新消毒接种环,从第一划线处
细菌平板划线分离培养法实验
(1)曲线划线分离法:此法多用于含菌量不多的标本或培养咽拭、棉拭所取的培养物,将标本或咽拭、棉拭培养物直接涂布于培养基的 1/5 处,然后用接种环或直接用咽拭(棉拭)作曲线连续划线接种。(2)分区划线分离法:此法多用于含菌量较多的粪便等标本的细菌分离培养。先用接种环取粪便标本,将其涂布在培养基的
细菌平板划线分离培养法实验
实验步骤(1)曲线划线分离法:此法多用于含菌量不多的标本或培养咽拭、棉拭所取的培养物,将标本或咽拭、棉拭培养物直接涂布于培养基的 1/5 处,然后用接种环或直接用咽拭(棉拭)作曲线连续划线接种。(2)分区划线分离法:此法多用于含菌量较多的粪便等标本的细菌分离培养。先用接种环取粪便标本,将其涂布在培养
简述固体培养基形式—平板培养基的制作方法
平板培养基制作方法如下: ① 将培养皿洗净、干燥,使各培养皿盖方向一致,用牛皮纸包好,或放入特制铁罐内,注明皿盖的方向。高压灭菌或干燥灭菌后备用。 ② 取刚灭菌后尚未凝固的培养基置于无菌箱或超净工作台内,先左手持三角瓶,右手反转手掌用中指和无名指拨出棉塞或硅胶赛(或不翻转手掌用小指和手掌拨出
关于固体培养基的形式—斜面培养基的基本介绍
斜面培养基(agarslantculture-medium ):固体培养基(solid culture medium )的一种形式;制作时应趁热定量分装于试管内,并凝固成斜面的称为斜面培养基,用于菌种扩大转管及菌种保藏。 与斜面培养基相对和并列的概念是:平面培养基、高层培养基。固体培养基倒在培
关于固体培养基的形式—制作斜面培养基和平板培养基的介绍
培养基灭菌后,如制作斜面培养基和平板培养基,须趁培养基未凝固时进行。 (1)制作斜面培养基。在实验台上放1支长0.5~1米左右的木条,厚度为1厘米左右。将试管头部枕在木条上,使管内培养基自然倾斜,凝固后即成斜面培养基。 (2)制作平板培养基。将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台
关于半固体培养基的介绍
半固体培养基,如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中,就制成了半固体培养基。以琼脂为例,它的用量在0.2~0.7%之间。这种培养基有时可用来观察微生物的动力,有时用来保藏菌种。 固体培养基是在培养液中加了琼脂(琼脂,一种凝固剂,在44度以下都呈凝固状)。这种培养基常用于鉴定菌种和计数。 半固体
半固体培养基的基本介绍
半固体培养基,如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中,就制成了半固体培养基。以琼脂为例,它的用量在0.2~0.7%之间。这种培养基有时可用来观察微生物的动力,有时用来保藏菌种。 固体培养基是在培养液中加了琼脂(琼脂,一种凝固剂,在44度以下都呈凝固状)。这种培养基常用于鉴定菌种和计数。 半固体
固体培养基的配置有哪些
一、极限培养基平板 800 ml水加入15 g琼脂,高压灭菌15 min。然后加人200 ml无菌的5 X 极限培养液和碳源。待冷却至50°C,加人补充成分。每个10 cm平板倒入32~40 ml培养基(每升培养基可制作25〜30个平板)。于室温干燥2〜3天,或将平板的上盖稍 微打开,于37°
45种培养基配方(细菌培养基与植物培养基)-(一)
THE COMPOSITION OF MEDIA 培养基及成分 1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g
45种培养基配方(细菌培养基与植物培养基)-(二)
10. Mannitol Agar (甘露醇琼脂) Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3g Mannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml 11. Glu