药物对动物腹腔巨噬细胞的影响实验——流式细胞术法

实验方法原理红景天苷不仅具有抗衰老、抗抑郁、抗癌、抗缺氧、保护肝脏、改善心脑血管功能和提高中枢神经系统功能等多种药理作用,还可以起到抗疲劳、抗缺氧、抗肿瘤、抗病毒和增强免疫功能的药理作用。巨噬细胞是机体免疫系统的重要递呈细胞,在特异性和非特异性免疫过程中均发挥着重要的作用。实验材料小鼠试剂、试剂盒Sal刀豆蛋白A四甲基偶氮盐唑L-谷氨酰胺β-二巯基乙醇放线菌酮青霉素链霉素RPM Ⅱ1640培养基胎牛血清羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰亚胺酯2-7-二氯氢化荧光素乙二脂G riess试剂盒仪器、耗材酶标仪流式细胞仪荧光酶标仪实验步骤一、材料准备 1. 小鼠腹腔巨噬细胞悬液的制备(1)将BALB/c小鼠眼球放血处死,用750 mL/L 乙醇消毒小鼠皮肤后。(2)腹腔注射5 mL RPMI1640基础培养基。(3)轻揉小鼠腹部5 min,从侧腹壁小心抽吸出液体,收集细胞到15 mL 的离心管中,......阅读全文

细胞技术专题:小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

小鼠腹腔巨噬细胞培可以:(1)吞噬与清除异物;(2)分泌生物活性物质;(3)对仿生全降解材料,降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。实验方法细胞培养技术实验方法原理取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬

动物的注射方法实验——腹腔注射法

实验材料小鼠试剂、试剂盒灭菌生理盐水仪器、耗材注射器(1 ml)7 号针头消毒煮沸器碘酒棉花75% 酒精棉花消毒干棉花实验步骤1. 注射器的准备与消毒(同「皮下注射法」)。2.腹腔注射2.1 抓取与固定方法同小鼠皮下注射实验。2.2 消毒下腹部皮肤,使鼠头部稍向下,以免针头刺入内脏(图 1,B)。2

流式细胞术实验步骤

流式细胞术实验:1、制备细胞悬液,计数2、分装,按照每个EP(1.5ml)管1-2*10 6个细胞分装,3500rpm,4度离心。3、用100ulPBS重悬,加入10ul大鼠血清封闭,4度避光30min。4、加入相应的荧光标记的抗体,混匀,避光,4度孵育30min。5、加入1mlPBS洗两遍。6、用

小动物CT对实验动物的辐射影响(三)

3. 结果及结论注:“-”表示“没有差异”或“没有变化”。1)、3)以及4)以下面「检定」为依据。・2 群间的检定:Welch 法的T检定・3 群间的检定:Scheffe 法的多重比较2)生理的变化以「观察」为依据。 如上表所示,无论是通常辐射群小鼠,还是硬性被照射的高辐射群小鼠,都没有观察到X射线

小动物CT对实验动物的辐射影响(一)

小动物CT对实验动物的辐射影响                   —日立Aloka LCT200辐射研究讨论   研究单位:大阪生物科学研究所、日立-阿洛卡医疗株式会社 背景:小动物CT对实验动物的辐射剂量是评价仪器性能的一个重要指标。日立Aloka LCT200  仪器采用先进的扁锥形束式扫描方

小动物CT对实验动物的辐射影响(二)

1.   观察范围 本次实验主要评价并观察放射性X射线对急性损伤,特别是对造血器官的影响。同时我们针对LCT200可以定量测量骨密度及体脂肪的特点,研究了不同扫描条件对骨密度以及体脂肪测量的影响。2. 方法 (1)实验动物群・品种:小鼠(ICR)・雌雄:雄・周龄:实验开始日为7周龄・体重:31-33

小鼠腹腔巨噬细胞培养

实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 1640 培养基小牛血清双抗台盼兰仪器、耗材 手术器械一次性注射器眼科镊眼科剪96 孔板CO2培养箱实验步骤 一

实验动物接种途径和接种方法——皮下接种法及腹腔接种法

实验材料实验动物试剂、试剂盒病毒试剂仪器、耗材注射器实验步骤皮下接种。注射时轻轻捏起皮肤,手持注射器将针头刺入,固定后即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或侧下腹部;豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注射;狗多在大腿外侧注射。皮下接种多用于观察动物病毒感染后的免疫学

流式细胞术实验抗凝剂的选择

  抗凝剂的选择:外周血标本可采用EDTA、ACD或肝素抗凝。如果用同一份血标本做白细胞计数和流式分析,则应用EDTA抗凝;对于血小板分析的实验,一般不用肝素抗凝。骨髓穿刺液常用肝素或EDTA抗凝。由于相对大量的ACD会通过改变pH而影响骨髓细胞活性问题,通常不推荐用ACD作骨髓穿刺液的抗凝剂。

巨噬细胞的腹腔中分离方法介绍

  1、取6周左右的小鼠(或600克左右的豚鼠,或3公斤左右的家兔),剃去腹部的毛并消毒。腹腔注射1ml(豚鼠20ml,家兔200ml)无菌的液体石蜡或巯基乙酸肉汤或4%淀粉肉汤。3~4天以后收集腹腔细胞。  2、如要收集腹腔静置巨噬细胞,不注射刺激物,直接从一步开始。放血处死动物,以减少腹腔中的红

小鼠腹腔巨噬细胞原代培养

实验方法原理 巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。 巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P331、S774A.1、RAW309

流式细胞术DNA分析影响因素探讨

  摘要 本文用流式细胞术对正常人外周血单个核细胞就不同试剂、不同获取细胞条件进行DNA含量分析。结果表明,正常人外周血单个核细胞的G0/G1、SPF、PI检出率所用染色试剂间均无明显差异(P>0.05),而APO、CV测定值随试剂不同有差异。获取5 000细胞/样品的CV值明显高于10 000细胞

硝酸镧对动物的影响

硝酸镧对小鼠学习记忆的低剂量兴奋效应及其与cAMP反应元件结合蛋白(CREB)和Jun-氨基末端激酶(JNK)蛋白磷酸化水平的关系的研究中。以0.002、0.02、0.2、2、20mg/kg硝酸镧染毒ICR小鼠4周,每天测定小鼠水迷宫的反应时间和错误次数;试验结束时,取小鼠大脑分离海马和皮质,采用w

简介流式细胞术实验样本的保存

  样本的保存:理想状态下,样本应在采集后立刻进行处理和染色。肝素抗凝的血和骨髓通常可保存至48-72小时/室温(16-25);EDTA抗凝的外周血和骨髓可保存12-24小时/室温(16-25);ACD抗凝的外周血可保存至72小时/室温(16-25);对于只作胞内染色的样本,可固定细胞以长期保存。但

流式细胞计量术(DNA含量)实验

固定全细胞的PI染色 非固定细胞的无洗染色             实验材料 细胞 试剂

流式细胞术实验步骤是什么

流式细胞术实验:1、制备细胞悬液,计数2、分装,按照每个EP(1.5ml)管1-2*10 6个细胞分装,3500rpm,4度离心。3、用100ulPBS重悬,加入10ul大鼠血清封闭,4度避光30min。4、加入相应的荧光标记的抗体,混匀,避光,4度孵育30min。5、加入1mlPBS洗两遍。6、用

流式细胞计量术(DNA含量)实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 PBS冷乙醇PI 溶液仪器、耗材 锥形管实验步骤 1. 分离细胞并移至 15 ml 的锥形管中。检查有单个细胞悬浮,1000 g 离心 5 分钟,弃上清。2. 用不含 Ca 或 Mg 的 PBS 将细胞洗 2 次,计数细胞总数,记在管山。3. 用约 500 μl 的 PB

流式细胞计量术(DNA含量)实验

固定全细胞的PI染色 非固定细胞的无洗染色             实验材料 细胞 试剂

小鼠腹腔巨噬细胞收集及形态观察

实验原理巨噬细胞(MΦ)发育:骨髓多能干细胞→定向干细胞(髓样干细胞)→单核母细胞→前体单核细胞→单核细胞→血液→组织(分化为巨噬细胞) MΦ分布:单核细胞主要于血液中,巨噬细胞几乎存在于所有表皮和黏膜下组织。 MΦ形态:有伪足,马蹄状单核,细胞形体大。 MΦ分离纯化:小鼠和大鼠腹腔内有丰富

红花对动物耐缺氧的影响

  ⑴抗疲劳作用:  红花黄色素1100mg/kg小鼠与对照组(用等量生理盐水)比较,游泳时间明显延长,延长率达117.0%,P

光照对动物的生长影响

 现在由于培养小动物的人越来越多了阳光对动物的影响也很明显。阳光能够影响动物的体色。例如,大多数鱼身体背面的颜色较深,腹面浅淡,这就与阳光的照射有关系。光照还能影响动物的生长发育。有人做过这样的试验:把蚜虫培养在连续无光照的条件下,所产生的个体大多没有翅;把蚜虫培养在光暗交替的条件下,所产生的个体大

流式细胞术实验样本的质量控制

  用于流式分析的样本种类很多,包括外周血、骨髓穿刺液、骨髓活检物、组织活检物、浆膜腔积液、脑脊液、皮肤、黏膜(内窥镜活检物)、细针穿刺物等等。样本的条件控制可能是免疫表型分析质控最困难的环节之一。每种样本都有不同的采集、保存、运输和制备要求。观测样本外观:有严重溶血、凝聚或坏死的样本应弃用。

流式细胞术实验去除红细胞的方法

  红细胞裂解法,操作简单、快、并最可能保持原始标本的白细胞分布。最好在染色后溶血。若在染色前溶血,需确认:(1)抗原性不被溶血过程改变;(2)溶血剂被彻底洗去,细胞和抗体结合的动力反应未受影响;(3)所用溶血剂不含固定剂,否则会影响细胞活性及表面标记结果。密度梯度离心法,靶细胞回收较好并可能得到富

腰大池腹腔分流术与脑室腹腔分流术治疗交通性脑积...

腰大池-腹腔分流术与脑室-腹腔分流术治疗交通性脑积水的疗效比较 腰大池-腹腔分流术与脑室-腹腔分流术是临床上治疗交通性脑积水的两种常见术式,两种手术方式的选取目前没有定论。庞鸣琰[1]通过比较18例脑积水患者腰大池-腹腔分流术与脑室-腹腔分流术两种手术方式的手术时间发现腰大池腹腔分流组组手术时间

流式细胞术

一. 流式细胞术概述流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是七十年代发展起来的高科学技术,它集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体, 同时具有分析和分选细胞功能。它不仅可测量细胞大小、内部颗粒的性状,还可检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞内DNA、RNA含量等,可对

影响实验动物麻醉的因素

影响实验动物麻醉的因素实验动物的麻醉是一项复杂系统的工作。正确的麻醉处理,是动物实验成功的有力保障。而麻醉处理不当,会给实验结果带来难以分析的误差。要想获得良好的麻醉效果,除掌握实验动物麻醉的基本知识和技术、遵循科学的麻醉程序外,还应了解影响实验动物麻醉的各种因素,如动物因素、环境因素等。 1、动物

影响实验动物麻醉的因素

实验动物的麻醉是一项复杂系统的工作。正确的麻醉处理,是动物实验成功的有力保障。而麻醉处理不当,会给实验结果带来难以分析的误差。要想获得良好的麻醉效果,除掌握实验动物麻醉的基本知识和技术、遵循科学的麻醉程序外,还应了解影响实验动物麻醉的各种因素,如动物因素、环境因素等。1、动物因素1、1 年龄和体重动

影响实验动物的环境因素

影响实验动物的环境因素是动物赖以生存的必要条件,实验动物通过新陈代谢与周围环境不断地进行物质和能量交换,同时通过经常接受外界环境刺激产生免疫反应而增强体质,不断生长;同时环境因素中也存在各种对动物机体有害的因素会产生直接或间接的危害。影响实验动物的环境因素基本分类如下:(1)气候因素   包括温度、

影响实验动物麻醉的因素

实验动物的麻醉是一项复杂系统的工作。正确的麻醉处理,是动物实验成功的有力保障。而麻醉处理不当,会给实验结果带来难以分析的误差。要想获得良好的麻醉效果,除掌握实验动物麻醉的基本知识和技术、遵循科学的麻醉程序外,还应了解影响实验动物麻醉的各种因素,如动物因素、环境因素等。1、动物因素1、1 年龄和体重动