流式细胞计量术（DNA含量）实验
固定全细胞的PI染色 非固定细胞的无洗染色 实验材料 细胞 试剂、试剂盒 PBS 冷乙醇 PI 溶液 仪器、耗材 锥形管 实验步骤 1. 分离细胞并移至 15 ml 的锥形管中。检查有单个细胞悬浮，1000 g 离心 5 分钟，弃上清。2. 用不含 Ca 或 Mg 的 PBS 将......阅读全文
测定DNA含量用什么方法
组成核酸分子的碱基,均具有一定的吸收紫外线特性,最大吸收值在波长为250~270nm之间.核酸的最大吸收波长是260nm,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础.在波长260nm紫外线下,1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml;单链DNA或RNA为20μg/ml.可以次来计算核酸样品
通过DNA含量测量细胞大小
细胞如何测量自身?现在我们有了这个长期存在的生物学问题的答案了。 图片显示的是一个茎尖分生组织(在中间)，在它的两侧出现了花蕾。绿色标记的细胞即将进入DNA复制。 自从350多年前科学家在显微镜下发现细胞以来，他们就注意到每一种细胞都有其特有的大小。从微小的细菌到几英寸长的神经元，大小决
二苯胺法测定DNA含量
二苯胺法测定DNA含量【实验目的】 掌握二苯胺法测定DNA含量的原理和方法 【实验原理】 DNA分子中2-脱氧核糖残基在酸性溶液中加热降解，产生2-脱氧核糖并形成ω-羟基-γ-酮基戊酸，后者与二苯胺试剂反应产生蓝色化合物，其反应如下图。蓝色化合物在595nm处有最大吸收，且DNA在40µg ~400
流式细胞计量术（DNA含量）实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 PBS冷乙醇PI 溶液仪器、耗材 锥形管实验步骤 1. 分离细胞并移至 15 ml 的锥形管中。检查有单个细胞悬浮，1000 g 离心 5 分钟，弃上清。2. 用不含 Ca 或 Mg 的 PBS 将细胞洗 2 次，计数细胞总数，记在管山。3. 用约 500 μl 的 PB
流式细胞计量术（DNA含量）实验
固定全细胞的PI染色 非固定细胞的无洗染色 实验材料 细胞 试剂
关于细胞凋亡细胞DNA－含量的测定
细胞凋亡时,核酸内切酶激活,导致DNA 断裂,这是凋亡的特征性表现,也为FCM 鉴别凋亡细胞奠定了基础。而检测细胞凋亡DNA 断裂的方法中,最常用、最简便的就是细胞DNA 含量分析。当细胞用乙醇、TrtionX—100 处理后细胞膜上出现漏洞,小片段DNA 从细胞内释放出来,使其DNA 含量低于
流式细胞计量术（DNA含量）实验
固定全细胞的PI染色 非固定细胞的无洗染色 实验材料 细胞 试剂
测定用乙醇固定的－DNA－的含量
实验方法原理 DNA和RNA在260nm处有一很高的吸收峰，利用这个原理我们测其OD260，再推算出其浓度。 实验材料 细胞样品
如何用紫外吸收法测定DNA含量
首先，分光光度计测量的样品必须是均一的，摇匀后再测量结果会准确些。它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。
测定用乙醇固定的－DNA－的含量
测定DNA含量可以用于：（1）进行基因片段连接实验。（2）进行转化转染之前的质粒浓度测定。实验方法原理DNA和RNA在260nm处有一很高的吸收峰，利用这个原理我们测其OD260，再推算出其浓度。实验材料细胞样品试剂、试剂盒PBS缓冲液70%乙醇PI液仪器、耗材离心机恒温箱筛网实验步骤一、培养细胞的
测定DNA含量可以用什么方法
外分光光度计 OD260/280比值，如果浓度够大的话可以适当稀释，是OD260在0.1到1之间最好。OD260值为1时，双链DNA一般为50ng/ul.单链DNA一般为40ng/ul，需要具体测的话还是用荧光定量DNA检测试剂盒，用多功能酶标仪检测。还有一种就是跑电泳，根据已知浓度条带的亮度对比你
使用分光光度法检测DNA纯度和计算DNA含量
DNA在260nm处吸收强烈，OD260值为1的溶液相当于大约50μg/mL双链DNA，而蛋白质的特征吸收在280nm处，测定DNA提取物中260nm处和280nm处的吸收值OD260和OD280，可大致判断所提取的DNA的纯度。OD260/OD280的值在1.7~1.9之间，说明提纯度较好，低于1
如何鉴定提取质粒DNA的质量和含量
紫外分光光度计定量。方法用大肠杆菌DH5α感受态细胞克隆丰量的pMD-18T重组质粒，紫外分光光度计定量后，根据重组质粒分子量计算其拷贝数，稀释成梯度浓度的荧光实时定量PCR的标准品，取1.0×106、1.0×104和1.0×102拷贝/μl高中低3个浓度的标准品，反复冻融1、6、11、15次和21
不同方法对肿瘤细胞DNA含量的分析
实验步骤 展开
不同方法对肿瘤细胞DNA含量的分析
实验步骤 展开
分光光度计测DNA含量的protocol
Turn on machine and wait for it to warm upWash glass cuvettes thoroughly before use and if 2 are used then make sure they are a ‘matching’ pair.For Sp
化学法测定DNA的含量——二苯胺显色法
化学法测定DNA含量可以用于：（1）转化、转染之前的质粒浓度估测；（2）对获取的DNA含量进行检测。实验方法原理DNA 在酸性条件下加热，其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂，生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸，而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖，与二苯胺试剂反应生成蓝色物质
化学法测定DNA的含量——二苯胺显色法
实验方法原理 DNA 在酸性条件下加热，其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂，生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸，而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖，与二苯胺试剂反应生成蓝色物质，在595nm 波长处有最大吸收
化学法测定DNA的含量——二苯胺显色法
（一）原理DNA 在酸性条件下加热，其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂，生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸，而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖，与二苯胺试剂反应生成蓝色物质，在595nm 波长处有最大吸收。DNA 在40-400μg 范围内，光吸收与DNA的浓度
自动定氮仪对转大豆DNA玉米的氮含量测定
随着科技水平的不断提高，转基因农产品越来越多，但是对于转基因产品的相关含量与成分都还存在一定的疑惑。好比一种转大豆DNA玉米对于它的相关元素含量也是比较模糊的。什么是转大豆DNA玉米，其实就是诱变玉米(26DC),对照材料(26CK)。其中,26CK是一种代码为26号的自交系,26DC为26号玉
关于细胞凋亡检测—细胞DNA－含量的测定的基本介绍
细胞凋亡时,核酸内切酶激活,导致DNA 断裂,这是凋亡的特征性表现,也为FCM 鉴别凋亡细胞奠定了基础。而检测细胞凋亡DNA 断裂的方法中,最常用、最简便的就是细胞DNA 含量分析。当细胞用乙醇、TrtionX—100 处理后细胞膜上出现漏洞,小片段DNA 从细胞内释放出来,使其DNA 含量低于
DNA制品可用哪几种方法测定其含量
测定DNA浓度的方法有两种,即利用分光光度计法测定DNA的紫外光吸收值;另一种方法是测定样品中溴化乙锭发射的荧光的强度来计算核酸的含量.紫外光吸收法:因为组成核酸的碱基(G,A,T,C)在260nm处具有强吸收峰,所以通过测定260nm的吸收峰即可对DNA进行定量.但有时也会因为所处溶液的pH值不同
紫外分光光度法测定DNA蛋白质含量
一、实验目的 学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理； 掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术； 掌握UV-1700紫外可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。 二、实验原理 紫外可见吸收光谱法又称紫外可见分光光度法,它是研究分子吸收190nm～750nm波长范围内的吸
紫外分光光度法测定DNA蛋白质含量
一、实验目的 学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理； 掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术； 掌握UV-1700紫外可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。 二、实验原理 紫外可见吸收光谱法又称紫外可见分光光度法,它是研究分子吸收190nm～750nm波长范
流式细胞计量术（DNA含量）实验_固定全细胞的PI染色
实验材料细胞试剂、试剂盒PBS冷乙醇PI 溶液仪器、耗材锥形管实验步骤1. 分离细胞并移至 15 ml 的锥形管中。检查有单个细胞悬浮，1000 g 离心 5 分钟，弃上清。2. 用不含 Ca 或 Mg 的 PBS 将细胞洗 2 次，计数细胞总数，记在管山。3. 用约 500 μl 的 PBS 重悬
流式细胞计量术（DNA含量）实验_非固定细胞的无洗染色
实验材料细胞试剂、试剂盒蛋白酶NST-DAPI 缓冲液MFM柠檬酸缓冲液DNA 染色 裂解溶液仪器、耗材尼龙筛实验步骤一、组织培养细胞的染色1. 通过对悬浮培养中的细胞倾析或对单层培养的细胞蛋白酶消化来收获细胞。计数细胞，800 g 慢速离心 3 分钟沉淀细胞。2. 细胞染色。3. 在 NST-DA
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA序列测定2
目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等（1977）提出的酶法（双脱氧链终止法）和Maxam（1977）提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭，但这两种方法都同样生成相互独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸，每组核苷酸都有共同的起点，却随机终止于一种（或多种）特定的残基，形成一系列以某一特定核苷酸
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA序列测定3
2．利用末端转移酶和α-32P-ddNTP标记DNA的3ˊ-末端 在二价阳离子存在下，末端转移酶催化dNTP加入DNA分子的3ˊ-羟基末端，如果作为底物的核苷酸经过修饰（如ddNTP），则可以在DNA的3ˊ-OH上仅加入一个核苷酸。对于双链DNA片段，亦存在DNA的两侧均被标记问题，可通过上述同
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA序列测定1
㈣ DNA聚合酶 如前所述，选用合适的DNA聚合酶进行测序反应也是保证测序质量的重要因素之一。常用于双脱氧末端终止法测序的有几种不同的酶： 1．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大片段（Klenow片段） 此酶是最早用于建立Sanger测序的酶。但通常会有两个问题：①Klenow片段的持续合成能力较