离体主动脉条的标本制备实验
实验材料家兔大鼠试剂、试剂盒克氏液仪器、耗材玻璃棒麦氏浴管实验步骤取兔或大鼠一只,猛击其头致死,立即剖开胸腔,分离胸主动脉,尽可能于近心脏处把其切断,迅速置于盛有克氏液并通以95%氧气及5%二氧化碳的培养皿中,剔除血管外结缔组织及脂肪,洗去凝血块,轻轻套在较主动脉稍小的玻璃棒上。然后用眼科剪把主动脉作螺旋形剪开,制成宽约3mm、长1.5~2cm的主动脉条,两端分别用线结扎,置于盛有克氏液并通以95%氧气及5%二氧化碳的恒温37℃的麦氏浴管内,平稳90~120min后进行实验。也可把胸主动脉剪成多个宽2mm的动脉环代替血管条做实验。 注意事项(1)本标本勿用手拿,应以镊子夹取,且不可在空气中暴露过久,以免失去敏感性。 (2)克氏液必须用新鲜蒸馏水配制。 (3)余下的动脉条连同克氏液置于4℃冰箱中,1~2天内仍可用做实验;采用大白鼠主动脉条时,可制成宽2~2.5mm,长2~3cm。 展开......阅读全文
胸腹水染色体标本制备
一、原理 某些肿瘤细胞可脱落入胸腹水中,并继续生长、增值。因此,由胸腹水细胞可制备较好的染色体标本。胸腹水细胞染色体分析对恶性肿瘤具有辅助诊断的价值。如分裂相多,异倍性,有结构畸变,常支持阳性诊断。二、用品和试剂 同外周血染色体制备。三、操作步骤 l.新鲜胸腹水20—40毫升,以1
离体叶绿体的制备以及完整度的测定
实验概要分离方法一般有两种,一是酶消化方法,把叶片表皮撕去后,用纤维素酶和果胶酶消化细胞壁,得到原生质体,再把原生质体通过尼龙网小孔(孔径20μm),使原生质体破裂而释放出完整叶绿体,但此方法分离得到的叶绿体数量有限。另一种是用机械方法,先用捣碎机破碎叶片,再分步离心,可以大量制备叶绿体。这里主要介
羊水细胞染色体标本的制备
一、原理 人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可区分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长,所以在培养过程中的生长期最短。AF细
羊水细胞染色体标本的制备
一、原理人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可区分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长,所以在培养过程中的生长期最短。AF细胞在再培
去壁低渗法制备植物染色体标本实验
实验材料黑麦(Secalecereale)、大麦(Hordeumvulgare)种子或洋葱(Alliumcepa)鳞茎试剂、试剂盒对二氯苯饱和溶液甲醇冰醋酸70%酒精纤维素酶果胶酶Giemsa原液磷酸缓冲液(pH6.8~7.2)KCl仪器、耗材恒温培养箱显微镜载玻片酒精灯实验步骤1.取材:先将种子浸
洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验
实验方法原理 有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中,细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中
去壁低渗法制备植物染色体标本实验
一、实验目的: 1、掌屋植物染色体标本的去壁低渗方法 2、了解中期染色体的形态结构 二、实验原理: 植物细胞有很坚实的细胞壁,染色体很难像动物染色体那样平整地贴在载玻片上,可通过纤维素酶和果胶酶处理去掉细胞壁;用低渗溶液处理可以提高染色体的分散程度。陈瑞阳等(1979,19
正常细胞常规核型标本制备_人淋巴细胞染色体标本制备
实验方法原理在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋白质,使染色体清晰且分散良好。再结合离心技术去掉红细胞碎片,然后采用空气干燥法制片获得中期染色体标本。实验材料HeLa细胞
胡萝卜根离体培养实验
实验概要学习胡萝卜离体根培养的基本方法;掌握诱导愈伤组织的基本技术。主要试剂1. MS 培养基 10 mg/L 2,4-D 2 mg/L 6-BA2. 70% 乙醇3. 0.1% 升主要设备1. 超净工作台2. 灭菌锅3. 显微镜4. 接种器械5. 不锈钢打孔器6. 烧杯( 500ml )7
动物染色体标本的制备与观察
实验原理凡细胞处于活跃增殖状态,或者经过各种处理后,细胞就可进入分裂的任何动物组织,均可用于染色体分析。在正常动物体内,骨髓是处于不断分裂的组织之一。给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期,然后采用常规空气干燥法制备染色体,即可得到大量可分析的染色体标本。本方法简便、可靠,不
动物染色体标本的制备与观察
实验概要本实验介绍了动物染色体标本(cell chromosome)制备的原理及操作步骤。实验原理凡细胞处于活跃增殖状态,或者经过各种处理后,细胞就可进入分裂的任何动物组织,均可用于染色体分析。在正常动物体内,骨髓是处于不断分裂的组织之一。给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中
骨髓细胞染色体标本的制备
一、原理骨髓染色体标本制备通常用于白血病患者,特别是慢性或急性粒细胞性白血病,因为骨髓反映粒系统细胞增生情况,这些病人不宜用外周血。即使是淋巴细胞性白血病,也不主张用外周血,因为加PHA刺激外周血培养,只能获得正常淋巴细胞分裂相,并不能反映那些病理淋巴细胞的染色体改变。骨髓细胞属不断增殖的细胞,培养
实验动物组织标本的制备实验_解剖法
通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2 )保温(37 ℃)的营养液中,并以注射器用营养液将管腔内的食物残渣清洗干净。实验材料家兔
传出神经药理学实验中的选择与应用(一)
传出神经药理学实验中的选择与应用 (一)一般实验方法和动物的选择 在测定新药的急性毒性实验(LD50)时,动物如出现竖毛,活动增加,激动兴奋,以致发展为强直一阵挛性抽搐,可初步考虑为拟交感药。进而可观察其动物(或猫)血压的反应,如兴奋α-受体,则对血压影响较大,并反射地使心率减慢,如兴奋β受体,
洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验_压片法
实验方法原理有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中,细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。 分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析 实验方法原理 采用微量全血培养人体外
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析 实验方法原理 采用微量全血培养人体外
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养人淋巴细胞染色体标本制备肿瘤细胞的染色体标本制备人体染色体常规核型的分析实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋
扫描电镜生物标本制备实验
实验材料病毒试剂、试剂盒无仪器、耗材扫描电镜实验步骤1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点,在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本,因此,病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求:(1) 标本的预处理要求:①尽可能使标本的形貌和结构保持活体时的近似
扫描电镜生物标本制备实验
实验方法原理 实验材料 病毒试剂、试剂盒 无仪器、耗材 扫描电镜实验步骤 1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点,在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本,因此,病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求:(1) 标本的预处理要求:①尽可能使标
离体神经突触的代谢性标记实验
试剂、试剂盒 固定剂 温育液 氯霉素 放射自显影乳剂 显影剂 SDS样本缓冲液 实验步骤
离体神经突触的代谢性标记实验
试剂、试剂盒 固定剂温育液氯霉素放射自显影乳剂显影剂SDS样本缓冲液实验步骤 一、放射自显影神经元在条件培养基中培养 2d,如第十章所述。1.用一个锋利的微电极从胞体分离神经突起,并用牵引电极将胞体移出培养皿 (见第十章)。2.在培养液中加入终浓度 0.lmmol/L 氯霉素,阻断线粒体蛋白的合成。
离体神经突触的代谢性标记实验
mRNA 和 rRNA 存在于树突和轴突内(VanMinnen1994;Steward1997)。令人疑惑不解的是,位于胞体外区域的 mRNA 是否真的被翻译。下面的方法可以证明神经突起确实可以不依赖胞体而合成蛋白。现代神经科学研究技术作者:U.Windhorst & H. Johansson 翻
离体蛙心脏灌流
实验概要1.学习蛙离体心脏灌流方法。2.观察Na 、K 、Ca2 、H 、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。实验原理 心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境(如Na 、K 、Ca2 等的浓度及比例、pH值和温度),而内环境的变化则直接影响到心脏的正常节律性活动。在体心脏还受交感神经和
羊水标本的制备、培养和分析实验
实验材料羊水试剂、试剂盒乙醇chang 培养基秋水仙胺低渗液甲醛 冰乙酸固定剂Permount 封固剂仪器、耗材用于细胞培养的20ml 注射器或试管15ml 离心管离心机盖玻片巴氏吸管倒置显微镜精细镊蓝垫或纸巾玻片加热器实验步骤展
用于-PCR-的模板-DNA-制备实验——含血标本
实验步骤1. 3 ml 外周血或 1 ml 骨髓液放入含 50 μl 0.5mol/L EDTA 的无菌离心管(15 ml 管)中。2. 2000 r/min 离心 10 min。吸去血浆,用指弹匀剩余的有核细胞和红细胞,加入红细胞溶解液 10 ml 并混匀,常温下放置 30 min。红细胞溶解液配
一份离不出血清的标本
前几天翻看笔记时想起了去年有一个被我们科“诊断”的病例,大致回想了一下当时的情况,供我们检验同行闲谈一番。大家都知道,血清是我们检验科日常工作中常用的标本类型。一般血液抽离人体后,放置半个小时左右血清就会自动析出,然后再经过离心就能得到理想的血清标本。但是这一次我们却碰到了这样一份离不出血清的标本。
病毒透射电镜病毒标本制备实验——悬滴标本法
实验方法原理病毒等微小颗粒标本可取其培养物经稀释或分离提纯后直接滴于附有支持膜的载网上用电镜观察。实验材料病毒试剂、试剂盒稀释液仪器、耗材透射电镜实验步骤悬液应尽量除去杂质如培养基残渣,细胞碎片、糖类及各种盐类的结晶等,这些杂质的存在会干扰染色及电镜观察。用该法的缺点是由于电子穿透能力很弱,只能观察
传出神经药理学实验中的选择与应用
传出神经药理学实验中的选择与应用 (一)一般实验方法和动物的选择 在测定新药的急性毒性实验(LD50)时,动物如出现竖毛,活动增加,激动兴奋,以致发展为强直一阵挛性抽搐,可初步考虑为拟交感药。进而可观察其动物(或猫)血压的反应,如兴奋α-受体,则对血压影响较大,并反射地使心率减慢,如兴奋β受体,
[离体]茎培养的定义
中文名称[离体]茎培养英文名称stem culture定 义将从几微米到几十微米的茎分生组织,几十毫米的茎尖或更大的芽,幼嫩的茎段和小块块茎等从母体植株上切下,放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)