离体神经突触的代谢性标记实验

mRNA 和 rRNA 存在于树突和轴突内(VanMinnen1994;Steward1997)。令人疑惑不解的是,位于胞体外区域的 mRNA 是否真的被翻译。下面的方法可以证明神经突起确实可以不依赖胞体而合成蛋白。现代神经科学研究技术作者:U.Windhorst & H. Johansson 翻译:赵志奇 陈军试剂、试剂盒固定剂温育液氯霉素放射自显影乳剂显影剂SDS样本缓冲液实验步骤一、放射自显影神经元在条件培养基中培养 2d,如第十章所述。1.用一个锋利的微电极从胞体分离神经突起,并用牵引电极将胞体移出培养皿 (见第十章)。2.在培养液中加入终浓度 0.lmmol/L 氯霉素,阻断线粒体蛋白的合成。3.小心移去培养液并用温育液洗涤 6 次,每次 Imin。保证轴突始终被一小部分液体覆盖;一旦干了,轴突便会崩解。4.在含 0.5mCi/ml 反式-35S 和 0.1 mmol/L 氯霉素......阅读全文

离体神经突触的代谢性标记实验

mRNA 和 rRNA 存在于树突和轴突内(VanMinnen1994;Steward1997)。令人疑惑不解的是,位于胞体外区域的 mRNA 是否真的被翻译。下面的方法可以证明神经突起确实可以不依赖胞体而合成蛋白。现代神经科学研究技术作者:U.Windhorst & H. Johansson  翻

离体神经突触的代谢性标记实验

试剂、试剂盒 固定剂温育液氯霉素放射自显影乳剂显影剂SDS样本缓冲液实验步骤 一、放射自显影神经元在条件培养基中培养 2d,如第十章所述。1.用一个锋利的微电极从胞体分离神经突起,并用牵引电极将胞体移出培养皿 (见第十章)。2.在培养液中加入终浓度 0.lmmol/L 氯霉素,阻断线粒体蛋白的合成。

离体神经突触的代谢性标记实验

            试剂、试剂盒 固定剂 温育液 氯霉素 放射自显影乳剂 显影剂 SDS样本缓冲液 实验步骤

梨离体叶片再生实验

实验概要试验研究了基本培养基、激素配比、细胞分裂素、生长素、培养基添加物、蔗糖浓度、pH值及叶龄与接种方式对梨离体叶片不定芽再生的影响,优化了再生条件,建立起了高效、稳定的离体叶片再生体系。实验材料金花和丰产两种梨树的离体叶片。实验步骤1. 培养基的配制 试验所用的培养基为MS (Murashige

视神经损伤模型实验—荧光金逆行性标记

实验方法原理在上丘和外侧膝状体进行荧光金逆行性标记存活的节细胞。这种方法常结合视神经夹伤模型使用。上丘逆行性标记可分为两种,损伤前标记及损伤后标记。损伤前标记用于研究存活的节细胞,一般在损伤前3d进行标记。损伤后标记一般用于研究存活的纤维及再生纤维,一般在处死前3d进行标记。实验材料实验动物试剂、试

离体蛙心标本的制备实验

实验材料蛙仪器、耗材蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大镊子小镊子眼科剪刀探针玻璃分针大烧杯小烧杯滴管培养皿棉线任氏液锌铜叉实验步骤(1)暴露蛙心:取蟾蜍一只,毁坏脑和脊髓,将其仰卧固定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉,然后剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏和动脉干。 (2)观察心脏的解剖结构:在腹面可以看

离体蛙心标本的制备实验

实验材料 蛙仪器、耗材 蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大镊子小镊子眼科剪刀探针玻璃分针大烧杯小烧杯滴管培养皿棉线任氏液锌铜叉实验步骤 (1)暴露蛙心:取蟾蜍一只,毁坏脑和脊髓,将其仰卧固定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉,然后剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏和动脉干。 (2)观察心脏的解剖结构:在腹面

胡萝卜根离体培养实验

实验概要学习胡萝卜离体根培养的基本方法;掌握诱导愈伤组织的基本技术。主要试剂1. MS 培养基   10 mg/L 2,4-D   2 mg/L 6-BA2. 70% 乙醇3. 0.1% 升主要设备1. 超净工作台2. 灭菌锅3. 显微镜4. 接种器械5. 不锈钢打孔器6. 烧杯( 500ml )7

氨基酸代谢标记实验

暂未评分点评实验,有机会获丁当奖励 +收藏氨基酸代谢标记实验标签:氨基酸 代谢 标记精编分子生物学实验指南第五版 第十章代谢标记技术用于研究蛋白质的生物合成、加工、细胞内运输、分泌、降解和物理化学特性。内容来源于《精编分子生物学实验指南(第五版)》                       

氨基酸代谢标记实验

实验方法原理 在含有放射性标记氨基酸的培养基中,短期培养细胞(800 Ci/mmol)/[35S]标记蛋白质水解产物试剂、试剂盒 PBS(冷冻)37℃ 脉冲标记培养基仪器、耗材 配有液体同位素垃圾阀门的真空吸气器实验步骤 1. 室温融化 [35S] 标记甲硫氨酸,并用预热的(37℃)脉冲标记培养基制

豚鼠离体气管标本制备实验

实验材料豚鼠仪器、耗材木棍Kerbs营养溶液手术剪实验步骤1. 气管连环标本 豚鼠1只,体重500g,用木槌击毙,立即从腹面正中切开皮肤和皮下组织,细心分离出气管,自甲状软骨下剪下整段气管,置于盛有Kerbs营养溶液的平皿中,剪除气管周围组织。从软骨环之间由前向后和由后向前进行交叉横切,均不完全切断

豚鼠离体气管标本制备实验

实验材料 豚鼠仪器、耗材 木棍Kerbs营养溶液手术剪实验步骤 1. 气管连环标本 豚鼠1只,体重500g,用木槌击毙,立即从腹面正中切开皮肤和皮下组织,细心分离出气管,自甲状软骨下剪下整段气管,置于盛有Kerbs营养溶液的平皿中,剪除气管周围组织。从软骨环之间由前向后和由后向前进行交叉横切

视神经损伤模型实验——坐骨神经移植及荧光金逆行性标记

实验方法原理实验材料实验动物试剂、试剂盒1%戊巴比妥钠荧光金仪器、耗材手术显微镜显微手术器械实验步骤(1)-(5)与视神经横断模型及荧光金逆行标记相同,不再赘述。(6)在眼球后极1mm处以显微剪剪断视神经。(7)取自体大鼠一侧坐骨神经约1cm长,准备移植。(8)采用11-0带针缝合线将坐骨神经缝合到

单个神经细胞标记实验

实验方法原理本例所用技术和结果引自Bishop和King(1982),在该文献中也可找到更详细的技术指导(也可参考Kitai and Bishop 1981)。实验材料猫的小脑                                                          试剂

单个神经细胞标记实验

用辣根过氧化物酶对单个Purkmje细胞进行细胞内标记实验实验方法原理本例所用技术和结果引自Bishop和King(1982),在该文献中也可找到更详细的技术指导(也可参考Kitai and Bishop 1981)。实验材料猫的小脑试剂、试剂盒利多卡因Karnovsky 型固定液甲酚紫仪器、耗材微

单个神经细胞标记实验

用辣根过氧化物酶对单个Purkmje细胞进行细胞内标记实验             实验方法原理 本例所用技术和结果引自Bishop和King(1982),在该文献中也可找到更详细的

离体主动脉条的标本制备实验

实验材料 家兔大鼠试剂、试剂盒 克氏液仪器、耗材 玻璃棒麦氏浴管实验步骤 取兔或大鼠一只,猛击其头致死,立即剖开胸腔,分离胸主动脉,尽可能于近心脏处把其切断,迅速置于盛有克氏液并通以95%氧气及5%二氧化碳的培养皿中,剔除血管外结缔组织及脂肪,洗去凝血块,轻轻套在较主动脉稍小的玻璃棒上。然后用眼科剪

离体主动脉条的标本制备实验

实验材料家兔大鼠试剂、试剂盒克氏液仪器、耗材玻璃棒麦氏浴管实验步骤取兔或大鼠一只,猛击其头致死,立即剖开胸腔,分离胸主动脉,尽可能于近心脏处把其切断,迅速置于盛有克氏液并通以95%氧气及5%二氧化碳的培养皿中,剔除血管外结缔组织及脂肪,洗去凝血块,轻轻套在较主动脉稍小的玻璃棒上。然后用眼科剪把主动脉

突触的含义以及横过突触空隙传递神经讯号的步骤

突触(synapse)是神经纤维间的连繫。所有的神经纤维都是以轴突末稍(dendrite)连到其它神经纤维的树突末稍(axonbrush)。而且在轴突末稍和树突末稍间留有一个空隙,称为突触空隙(synspticcleft)。如下图所示。  横过突触空隙传递神经讯号的步骤: (1)神经讯号到达轴突末稍

神经所发现炎性转录因子在神经肌肉接头突触形成中的作用

神经所研究发现炎性转录因子NFkappaB在神经肌肉接头突触形成中的作用   p65基因敲除引起小鼠神经肌肉接头异常  8月19日,《神经科学杂志》(The Journal of Neuroscience)发表了中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所的研究成果:“NFkappaB

重组蛋白质的代谢标记实验

由于重组蛋白质表达的时候,宿主蛋白质的合成基本终止,因此体内代谢标记是检测重组蛋白质的敏感方法。实验材料蛋白质试剂、试剂盒胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸仪器、耗材培养瓶离心机转子实验步骤1.  接种2.5×106细胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培养液的60 mm 肌组织培养皿中。对每一假定重组病

重组蛋白质的代谢标记实验

基本方案             实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒

重组蛋白质的代谢标记实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸仪器、耗材 培养瓶离心机转子实验步骤 1.  接种2.5×106细胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培养液的60 mm 肌组织培养皿中。对每一假定重组病毒分别准备一个平皿供感染用,并准备一个对照平皿供野生型杆状病毒感染。于27℃温育

[离体]根培养的定义

中文名称[离体]根培养英文名称root culture定  义从植物体上切下来的根尖或其一部分放在琼脂培养液上进行的无菌培养。可用于根的生长和分化的研究。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

[离体]茎培养的定义

中文名称[离体]茎培养英文名称stem culture定  义将从几微米到几十微米的茎分生组织,几十毫米的茎尖或更大的芽,幼嫩的茎段和小块块茎等从母体植株上切下,放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

康乃馨的离体快繁

仪器 设备和 试剂 超净工作台、带有吸水纸的成套的培养皿,无菌水 培养基  N 6 +1 mg/L 6-BA 剪刀、枪型镊子 量筒、酒精灯、滤纸、蒸馏水、小刷子 95%乙醇、70%酒精、70%酒精棉球、0.2%升汞、甲醛、高锰酸钾、来苏尔

离体蛙心脏灌流

实验概要1.学习蛙离体心脏灌流方法。2.观察Na 、K 、Ca2 、H 、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。实验原理    心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境(如Na 、K 、Ca2 等的浓度及比例、pH值和温度),而内环境的变化则直接影响到心脏的正常节律性活动。在体心脏还受交感神经和

氨基酸代谢标记实验_备择方案-3-长期细胞标记

实验方法原理长期标记意味着对细胞进行 6~32 h 持续的代谢标记。该方法特别适用于研究合成速度相对较慢的蛋白质或研究成熟的标记蛋白而不是生物合成的前体。稳定状态的标记是长期标记的一种形式,在此过程细胞和放射性标记的氨基酸一起孵育直至放射性标记蛋白的合成和降解速率相当。如果蛋白质复合体中的亚基的初级

蛋白质磷酸化的测定实验—代谢标记

实验材料细胞仪器、耗材培养瓶实验步骤1. 用 60 mm 或 100 mm 培养瓶,在完全培养基中培养细胞至所希望的密度。2. 用预热的低磷酸培养基(无放射性磷酸盐)冲洗两次,然后加入含 0.5~1 mCi32P/ml 的低磷酸培养基(50~100 μmol/L 无机磷酸)。3. 培养结束后,回收