有机磷酸酯类中毒与解救实验
实验方法原理有机磷酸酯类是难逆性胆碱酯酶抑制剂，可与乙酰胆碱酯酶（AchE）结合，使酶失去活性且难以恢复。体内乙酰胆碱酯酶可水解乙酰胆碱（Ach）并使其失效，故有机磷酸酯中毒可造成Ach在体内大量堆积。轻度急性中毒者以M-样症状为主；中度中毒者可同时出现M-样与N-样症状；重度中毒者除M-样与N-样症状外，尚伴有中枢神经系统症状（表23-5）。有机磷酸酯类中毒的解救药物主要为胆碱酯酶复活药解磷定，以及M受体阻断剂阿托品。解磷定为AchE复活药，可使已被有机磷抑制的AchE恢复活性。阿托品为M受体阻断剂，可竞争性拮抗Ach对M-受体的激动作用。实验材料家兔仪器、耗材敌百虫溶液碘解磷定硫酸阿托品注射器听诊器实验步骤1. 取家兔2只，记录性别和体重，观察其活动情况、呼吸、瞳孔、唾液分泌、大小便、肌张力、有无肌震颤。2. 家兔耳缘静脉取血（给药前对照），用于测定乙酰胆碱酯酶活性。两只家兔耳缘静脉注射5%敌百虫溶液，2.0ml/kg。密切......阅读全文
Westernblot实验步骤及注意事项
Westernblot 实验步骤 1. 组织块称重 2. 利用液氮、研钵粉碎组织块 3. 加入RIPA缓冲液（每克组织3 ml RIPA），PMSF（每克组织30μl，10 mg/ml PMSF），利用Polytron进一步匀浆（15,000转/分*1分钟）维持4℃4. 加入PMSF（每克组织30μ
细胞凋亡实验步骤及注意事项
一、实验目的1、掌屋凋亡细胞的形态特征 2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法二、实验原理 细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界，在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序发生事件的
Western－blot实验步骤及注意事项
2. 电泳(Electrophoresis)(1) SDS-PAGE凝胶配制SDS-PAGE凝胶可以参考一些文献资料进行配制，也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒。该试剂盒提供了除水和配胶器具外的所有试剂以及配制各种浓度SDS-PAGE的配方。(2) 样品处理在收集的蛋白样品中加入适
Western－blot实验步骤及注意事项1
一.实验步骤1. 组织块称重2. 利用液氮、研钵粉碎组织块3. 加入RIPA缓冲液（每克组织3 ml RIPA），PMSF（每克组织30μl，10 mg/ml PMSF），利用Polytron进一步匀浆（15,000转/分*1分钟）维持4℃4. 加入PMSF（每克组织30μl，10 mg/ml PM
cck8实验步骤及注意事项
cck8实验步骤：1、细胞种板：将对数生长期细胞用胰蛋白酶消化，配制成细胞悬液，每孔加入100 μl，使每孔细胞密度1000-5000个，边缘孔用无菌PBS填充。5%CO2，37℃培养至细胞贴壁铺满孔底。2、按实验方案加入药物。每种处理建议设置4-6个复孔。3、处理结束后，每个孔中分别加入10 μl
DNA印迹法实验步骤和注意事项
注意：操作戴手套。凝胶处理1)凝胶照相后切去包括标记带在内的多余部分。将凝胶的一角(·点第一个样品的一侧)切去作为标记 以便于定位。精确测量凝胶大小然后将凝胶放入一个方形瓷盘中 。2)变性:将凝胶浸泡于适量的碱变性液中,室温下变性30分钟。期间更换变性液一次,不断地轻轻摇动。如果先进行酸变性酸变性,
孔洞实验/孔板实验/洞板实验操作步骤及注意事项
一.基本原理孔板实验是Boissiex和Simon1962年首次建立的，此后被广泛用于药效研究。该实验是利用新奇(curiosity)和恐惧(fear)两个因素来控制动物在新环境下的行为，用逃避(escapes) 来反映这两个因素的作用结果。动物反复钻头(head一dipping)反映其新奇
织物透气性实验步骤和注意事项
一、实验目的与要求 1、掌握透气量仪的测试原理和各压力差的含义。2、掌握透气性的测定方法和指标。 3、对比分析各种织物透气性的差异，进一步理解影响织物透气性的因素。 二、基础知识 空气透过织物的能力称为织物的透气性。它直接影响到织物的服用性能。如夏季用的织物希望有较好的透气性，而冬天用的织物
MTT比色法实验原理、步骤及注意事项
实验概要 MTT全称为3-(4，5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3，5-di- phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。本实验介绍了MTT
Southern－Blotting实验原理、操作步骤和注意事项2
按先将水和DNA 按反应体系所需的量取至一1.5毫升离心管中，混匀，短暂离心至管底，放至100℃干浴中变性10 min，变性探针迅速置于冰浴上 5 min，按反应体系将反应混合液（dNTP，Random primer，Klenow ）加入变性DNA中，在同位素操作台上，加入32P 标记的dN
Southern－Blotting实验原理、操作步骤和注意事项1
对于大的基因组，DNA酶切图谱凭肉眼是分辨不开的（EB染色），因为大小不等的分子呈现弥散分布，只有借助灵敏的放射性同位素（或其他化学发光物质），将靶DNA在凝胶上（膜上）的带型通过特定的探针与之杂交，转换成X光片上直观的带型，才能进行相关分析。另外如果需要鉴定或寻找与已知DNA同源的 DNA片段
细胞划痕实验原理步骤及注意事项有哪些
细胞划痕实验原理细胞划痕实验(Wound Healing)是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”，划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合，在一定程度上模拟了体内细胞迁移
MTT比色法实验原理、步骤及注意事项
实验概要MTT全称为3-(4，5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3，5-di- phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。本实验介绍了MTT比色法，是一种检
MTT比色法实验原理、步骤及注意事项
实验概要MTT全称为3-(4，5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3，5-di- phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。本实验介绍了MTT比色法，是一种检
pcr实验步骤
一、 样品RNA的抽提1. 取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。2. 两相分离 每1 ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2 ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12 000 rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以
Western实验步骤
一、样品制备 对于Western Blotting实验而言，样品处理是关键步骤之一，获得的蛋白样品必须均质、可溶，并解离成单个多肽亚基，且尽量减少相互间的聚集，使其最终仅依赖本身的分子量大小进行分离。当目标蛋白的含量很低时，需要选取目标蛋白含量较高的组织或细胞器（如核抽提物），或者通过免疫沉淀等方式
细胞划痕实验实验步骤
一.准备：所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内）二.流程：1.先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2.在空中加入约5X105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过一夜能铺
免疫印迹法实验的操作步骤和注意事项
操作步骤 一蛋白质样品获得：细菌诱导表达后，可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞，真核细胞加匀浆缓冲液，机械或超声波室温匀浆0.5-1min。然后4℃，13,000r离心15min。取上清液作为样品。 二电泳：制备电泳凝胶，进行SDS-PAGE。 三转移：（半干式转移） 1、电泳结束后将胶条
电压互感器实验步骤及注意事项
电磁式YH交接项目：一、一、二次绕组绝缘电阻。注意：绕组首尾短接，非测试绕组接地。二、变比试验。注意：高低压不要接反。三、绕组直流电阻。没什么要特别注意的，别突然断线就行，要不放电呢。四、伏安特性。注意：从主绕组的保护绕组上加，特征电压选择0.2、0.5、0.8、1.0、1.2、1.5（中性点接地系
MTT实验原理和实验步骤
MTT原理：MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，是一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT，同时在细胞色素C的作用下，生成蓝色（或蓝紫色）不溶于水的甲臜（Formaza
细胞转染实验的实验步骤
细胞传代(1)试验准备：200ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。(2)弃掉培养皿中的培养基，用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3)用Tip头加入1mlTrypsin液，消化1分钟（37。C，5%CO2)。用手轻拍培养瓶壁，
薄层色谱实验的实验步骤
偶氮苯和苏丹Ⅲ由于极性不同，利用薄层色谱(TLC)可以将二者分离。 (1)点样。 取两块制好的薄层板，分别在距一端1 cm处用铅笔轻轻画一条横线作为起始线。取管口平整的毛细管插入样品溶液[6]中，在一块板的起点上点1%偶氮苯的甲苯溶液和混合液两个样点。在第二块板的起点线上点1% 苏丹Ⅲ 的甲
原位PCR实验步骤
原位PCR实验步骤，原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术，使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞（爬片、甩片或涂片）或组织（石蜡、冰冻切片）上直接对靶基因片段进行扩增，通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。一、组织切片和细胞样品的制备试剂与配置10%福尔马
免疫PCR实验步骤
免疫PCR实验步骤，主要程序（1） 抗原+生物素化抗体→抗原-生物素化抗体复合物；（2） 加亲合素→抗原-生物素化抗体-亲合素复合物；（3） 加生物素化DNA→抗原-生物素化抗体-亲合素-生物素化DNA；（4） PCR扩增生物素化DNA部分。免疫PCR实验步骤，实验步骤（1）制备生物素化DNA将噬粒
细胞划痕实验步骤
材料：6孔板marker笔直尺20微升枪头（灭菌）无血清培养基PBS准备：所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内）流程：1、先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀地划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2、在空中加入约
细胞划痕实验步骤
材料：6孔板marker笔直尺20微升枪头（灭菌）无血清培养基PBS准备：所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内）流程：1、先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀地划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2、在空中加入约
MTT法实验步骤
贴壁细胞1、收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。2.、5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板）,加入浓度梯度的药物,原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，但我们常在前一天下午铺板
质粒提取实验步骤
实验原理现在较常用的质粒提取方法有三种:碱裂解法、煮沸法和去污剂裂解法，前两种方法较为剧烈，适用于较小的质粒（＜15Kb），而去污剂裂解法则比较温合，一般用于分子量较大的质粒（＞15Kb）。碱裂解法是一种最广泛使用的制备质粒DNA的方法。其原理为：染色体DNA远大于质粒DNA，且染色体DNA为线状分
pcr实验详细步骤
1、模板的取材主要依据PCR的圹增对象，可以是病原体标本如病毒、也可以是病理生理标本如细胞等。2、标本处理的基本要求是除去杂质，并部分纯化标本中的核酸。多数样品霓要经过SDS和蛋白 酶K处理。难以破碎的细菌，可用溶菌酶加EDTA处理。3、引物最好在模板cDNA的保守区内设计，引物长度一般在15~30
dna提取实验步骤
利用核酸溶解于水的性质，将组织细胞破碎后，用低盐溶液除去RNA，将沉淀溶于水中，使DNA充分溶解于水中，离心后收集上清液。在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M。加入2倍体积95%乙醇，立即用搅拌法搅出。分别用66%，80%和95%乙醇以及丙铜洗涤，最后在空气中干燥，既得DNA样品。此法提取的DNA中