有机磷酸酯类中毒与解救实验
实验方法原理有机磷酸酯类是难逆性胆碱酯酶抑制剂,可与乙酰胆碱酯酶(AchE)结合,使酶失去活性且难以恢复。体内乙酰胆碱酯酶可水解乙酰胆碱(Ach)并使其失效,故有机磷酸酯中毒可造成Ach在体内大量堆积。轻度急性中毒者以M-样症状为主;中度中毒者可同时出现M-样与N-样症状;重度中毒者除M-样与N-样症状外,尚伴有中枢神经系统症状(表23-5)。有机磷酸酯类中毒的解救药物主要为胆碱酯酶复活药解磷定,以及M受体阻断剂阿托品。解磷定为AchE复活药,可使已被有机磷抑制的AchE恢复活性。阿托品为M受体阻断剂,可竞争性拮抗Ach对M-受体的激动作用。实验材料家兔仪器、耗材敌百虫溶液碘解磷定硫酸阿托品注射器听诊器实验步骤1. 取家兔2只,记录性别和体重,观察其活动情况、呼吸、瞳孔、唾液分泌、大小便、肌张力、有无肌震颤。2. 家兔耳缘静脉取血(给药前对照),用于测定乙酰胆碱酯酶活性。两只家兔耳缘静脉注射5%敌百虫溶液,2.0ml/kg。密切......阅读全文
dna提取实验步骤
利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液。在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M。加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出。分别用66%,80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品。此法提取的DNA中
IHC-实验操作步骤
免疫组化方法(石蜡切片)*重要提示:参考抗体说明书选用合适的抗体稀释液和抗原修复处理方法。IHC 方法:抗原修复缓冲液/抗体稀释液A. 所需溶液和试剂1. 二甲苯2. 无水乙醇(100% 和 95%,变性无水乙醇,组织学级)3. 去离
pcr实验详细步骤
1、模板的取材主要依据PCR的圹增对象,可以是病原体标本如病毒、也可以是病理生理标本如细胞等。2、标本处理的基本要求是除去杂质,并部分纯化标本中的核酸。多数样品霓要经过SDS和蛋白 酶K处理。难以破碎的细菌,可用溶菌酶加EDTA处理。3、引物最好在模板cDNA的保守区内设计,引物长度一般在15~30
高低温冲击实验箱使用注意事项及操作步骤
高低温冲击实验箱使用注意事项 1.请勿将试品电源接入设备电源中,否则会增加设备电源负荷。除非设备留有试品电源接口。2.严禁试验易燃、易爆、高腐蚀、强辐射物品。 3.设备通电状态下或运行过程中请勿搬运、检修。 4、高温烫伤,冷热冲击试验箱在做高温试验时箱内温度很高。试验过程中或测试
实验室里磁力搅拌器使用步骤和注意事项
实验室里磁力搅拌器适用于粘稠度不是很大的液体,固液混合物,利用了磁场和漩涡的原理,, 具有工作电压低、功率大、噪音小、运转稳定、安全可靠等特点.当使用电子磁力搅拌器时,应首先检查随机配件是否齐全,然后按顺序装好夹具,把所需搅拌的溶液加入容器中,并加入搅拌子,容器放在搅拌加热工作盘上。将自配的电接点温
麻醉大鼠动脉血压的测定实验步骤及注意事项
实验试剂1. 20%氨基甲酸乙酯(Urethane)注射液或者1.5%戊巴比妥钠(Phentobarbital Sodium)注射液2. 1%普鲁卡因注射液3. 0.3%肝素生理盐水注射液实验设备1. 常用实验器械一套2. 家兔或者大鼠实验台一个3. 用于家兔或者大鼠的聚乙烯医用塑料导管(家兔用导管
通用实验室仪器实验室离心机安装步骤计注意事项
1、正确安装(1)电源电压:电压波动要符合10%以内的国家标准,否则一些厂家的离心机是不能正常运转。假如电压波动在此以上,建议用稳压器,以供符合此电网。(2)地线要牢:房间的电源的布线要符合要求。我国是三相四线制。三相是产业电中的三相,使用三相电时零线与地线分开,更重要的是不管是三相产业电也好,一般
ELISA实验检测抗体的实验步骤
(1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。 (2)加稀释的受检血清,保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,血清中的其他成份在洗涤过程中被洗去。 (3)加酶标抗抗体,主要根据你的一抗来确定二抗用
ELISA实验检测抗体的实验步骤
操作步骤: (1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。 (2)加稀释的受检血清,保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,血清中的其他成份在洗涤过程中被洗去。 (3)加酶标抗抗体,主要根据你的一抗来
PCR(多聚酶链反应)实验原理、方法步骤和注意事项
【实验对象】特定的DNA序列。【试剂与器材】 引物(primer),根据需扩增的DNA设计相应的引物;TagDNA聚合酶; 10×PCR缓冲液(随酶一起购买);5mmol/L dNTP贮备液(商品化产品);DNA模板(需扩增的 DNA);双蒸水;矿物油;PCR反应管;微量移液器;离心机及PCR仪
水流量平板法导热仪的实验步骤及注意事项
(一)试样的安装1、确认并将电机调速旋钮旋至zui小位置,旋动电机升降开关至向下位置,调节电机调速旋钮使样品室缓慢下降,待样品室停止下降后,复位电机升降开关、电机调速旋钮(旋至zui小);2、将试样放入样品室中心(注:试样具体放置可参照测试软件试样组选择中所示图示进行。)试样放置确认无误后,旋动电机
琼脂糖凝胶电泳之二-实验步骤及注意事项
实验步骤一、试剂配制1. 5×TBE缓冲液:450 mmol/L Tris-硼酸,10 mmol/L EDTA,pH值8.0。使用时将上述储存液稀释10倍至0.5×TBE缓冲液,可同时作为电泳及制胶用的缓冲液。二、制胶1. 根椐制胶量及凝胶浓度,在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中,加入准确称量
GST融合蛋白表达与纯化的实验步骤与注意事项(一)
GST表达融合蛋白 pGEX-KG大小:5006bp,氨苄青霉素抗性(Ampr),IPTG诱导表达酶切位点:BamHI 930、SmaI 937、EcoRI 962、XbaI 966、NcoI 974、SalI 980、XhoI 985、SacI 992、HindIII 994GST分子量:构建pG
分子生物学相关实验步骤及注意事项(一)
刚进实验室的小伙伴们,当你们在进行RNA的提取,RT-PCR和QPCR实验时,是否会有这样的感受,明明是按照实验步骤往下做的,实验结果却不如人意,甚至很糟糕呢?小编我也曾经被实验狠狠地虐过呢~为了减少实验对亲们的打击,在此献上自己在实验过程中的一些小经验,希望能帮助到各位小伙伴们~(一)RNA提取篇
细胞培养传代培养的实验步骤和注意事项
实验步骤1.入无菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒双手。2.倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液置37℃下预热。3.超净台台面应整洁,用0.1%新洁尔灭溶液擦净。4.打开超净台的紫外灯照射台面20min左右,关闭超净台的紫外灯,打开抽风机清洁空气,除去
微生物限度检测仪实验操作步骤及注意事项
微生物限度检测仪实验操作步骤及注意事项实验准备:取硅胶管一根,将一端套在过滤装置的出液口,另一端套在收集瓶的进液口(不锈嘴);再取另一根硅胶管,一端套在收集瓶的抽气端(白色塑料嘴),另一端通过不锈钢宝塔接头与真空泵相连(1) 试验前,应先将滤杯清洗干净、晾干、取滤膜(50mm)侵泡到纯化水里3~5m
GST融合蛋白表达与纯化的实验步骤与注意事项(二)
7、转化BL21(DE3)pLysS菌株检测GST融合蛋白的表达(1)冰上融化BL21(DE3)pLysS感受态细胞(天根)(2)2 ml离心管中,加入25μl BL21+ 3μl质粒(300-500ng),混匀(质粒≤感受态1/10)(3)冰上放置30min(4)42°C,90s(5)冰上放置2-
实验室真空手套箱的使用步骤和注意事项
手套箱主要由主箱体、过渡室两部分组成。如用户有其它特殊要求,也可以根据需要进行设计制造。 主箱体上有两个(或两个以上)手套操作接口,分布在箱体的前边(或前后两边),这使得本操作箱能被一个(或几个)人同时操作,提高了箱体的使用效率。另外,在箱体的前面(或前后)都有观察窗,操作者能够清楚地观察到箱
采血步骤及注意事项
采血过程注意事项采血而要注意的问题包括:采血部位、采血时患者的体位、止血带的影响、输液的影响、抗凝剂的种类和量的影响。1.采血部位不同采血部位采集的血标本,会检测出不同的结果。同一患者同一项目,今天从手指采集血样,明天从静脉采集血样,是不合理的。从同一患者手指、静脉采集的血标本用于血常规,结果就不一
ELISA实验重中之重的步骤
看似简单的ELISA实验在操作过程中稍有不合理的地方,会造成很多问题,影响检测精度,降低测试质量。如花板,假阳性,全彩色,全彩色,颜色空间的低等问题,这就要求我们在实验过程多做总结,逐步完善,筛选ELISA实验各项步骤中的重点之重。 第一:包衣液的选择 碳酸盐缓冲液通常选择9。6。但有时
免疫PCR:基本实验步骤
主要程序(1) 抗原+生物素化抗体→抗原-生物素化抗体复合物;(2) 加亲合素→抗原-生物素化抗体-亲合素复合物;(3) 加生物素化DNA→抗原-生物素化抗体-亲合素-生物素化DNA;(4) PCR扩增生物素化DNA部分。实验步骤(1)制备生物素化DNA将噬粒 BLuescript skt,用生物素
Western-Blot-Protocol实验步骤
一、提取抗原蛋白 将提取RNA途中留存的样品,加入150μl100%酒精充分混匀,静置5min(RT),2000×g,4℃离心5min,吸取上清至新管中,加入750μl异丙醇,混匀,静置10min(RT),12000×g,4℃离心10min,弃上清,加入1ml0.3mol/L盐酸胍/95%酒精重悬
基因敲除的实验步骤
实验步骤构建重组基因载体绝大多数的基因敲除策略都是基于同源重组的机制,其基因载体包括载体骨架、靶基因同源序列和突变序列及选择性标记基因等非同源序列,其中同源序列是影响同源重组效率的关键因素。用电穿孔显微注射方法把重组DNA转入受体细胞(一般是胚胎干细胞)核内。同源重组基因重组时以载体的同源序列取代染
RTPCR实验步骤
实验材料:水稻叶片的 RNA 。实验原理:目前 PCR 技术只能扩增 DNA 模板,对 RNA 模板不能直接扩增。mRNA反转录生成的 cDNA 可作为 PCR 的模板进行扩增,这种在 mRNA 反转录后进行的 PCR 扩增称为 RT-PCR 。 RT-PCR 比 Northern 杂交更灵敏,对
RTPCR实验步骤
一、组织抽提:1. 取组织块50-100㎎用液氮在研钵中研磨成粉末2. 移入玻璃匀浆器加入1ml Trizol 抽打匀浆3. 移入1.5ml新离心管用5 ml针头抽打4. 冰上孵育5分钟5. 离心12,000g 4℃ 5分钟 取上清液移
细胞伤口愈合实验步骤
1.细胞在含有10%FBS的DMEM培养基中生长。2.细胞以一定密度接种到24孔细胞培养板中,生长24小时后,单层细胞融合度应达到70-80%。3.不要更换培养基。用新的1ml枪头轻轻的在单层培养细胞间划痕,划痕横穿过孔,枪头尽量与板孔的底部垂直,不要倾斜。这样产生的gap的距离才与枪头末端的外直径
SSR标记实验步骤
SSR简单序列重复标记可以用于:用微卫星区域特定顺序设计成对引物,通过PCR技术,经聚丙烯酰胺凝胶电泳,即可显示SSR位点在不同个体间的多态性。实验方法原理与其它分子标记相比,SSR标记具有以下优点:(1)数量丰富,覆盖整个基因组,揭示的多态性高;(2)具有多等位基因的特性,提供的信息量高;(3)以
PCR实验方法步骤
PCR在分子克隆和DNA分析中有多种用途,下面小编就向大家介绍PCR实验方法步骤:方法1/4在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM)
总RNA提取实验步骤
一、细胞或组织破碎 1. 微生物材料 (1)发酵3~4天(或对数生长期)的菌体,离心收集菌丝体(动植物材料无需此步处理)。 (2)用经DEPC处理的水洗菌丝体2~3次,并尽量除去残存的水。 (3)加液氮充分研磨,使其成为粉末,以释放RNA。 (4)研磨后的样品转移至12 ml 变性液的容器中匀浆。
酸碱滴定实验详细步骤
酸碱滴定实验详细步骤:1、把已知物质的量浓度的盐酸注入事先已用该盐酸溶液润洗过的酸式滴定管,至刻度“ 0”以上,把滴定管固定在滴定管夹上。轻轻转动下面的活塞,使管的尖嘴部分充满溶液且无气泡。然后调整管内液面,使其保持在“0”或“0”以下的某一刻度,并记下准确读数。2、把待测浓度的NaOH溶液注入事先