淀粉酶的诱导、提取和活性测定实验
实验方法原理大麦（或小麦）种子萌发时，种胚产生GA3扩散到胚乳的糊粉层细胞（被称为GA3反应的“靶细胞”），刺激其合成或激活α-淀粉酶，然后进入胚乳，使贮藏的淀粉被水解为还原酶，因此，无胚种子不能释放GA3，也不能形成与激活α-淀粉酶。外加的GA3也可代替胚的释放作用，从而诱导α-淀粉酶的合成。在一定范围内，由去胚的吸胀大麦产生的还原糖量，与外加GA3浓度的对数成正比，由此可说明GA3对α-淀粉酶的诱导形成。实验步骤一、 材料与用品1. 材料：大麦（或小麦）种子；2. 仪器：721分光光度计；超净工作台（或灭菌箱）；温箱；摇床；恒温水浴；高压灭菌锅；棉塞；牛皮纸；刀片；镊子；烧杯；培养皿；试管；移液管；玻璃棒。3. 药品：10-3mol/L乙酸缓冲液（pH 4.8）[每ml含链霉素硫酸盐1mg（或氯霉素40μg）]. 10 mg/L GA310 mg，加少量95%乙醇溶解，用蒸馏水定容至1000ml. 淀粉溶液（称取可溶性淀粉0......阅读全文
NK细胞活性测定：同位素法原理和实验步骤
一、原理 将用同位素3H-TdR标记的靶细胞与淋巴细胞共同培养时，靶细胞可被NK细胞杀伤。同位素便从被杀伤的靶细胞中释放出来，其释放的量与NK细胞活性成正比。通过测定靶细胞3H-TdR的释放率即可反应NK细胞的活性。 二、仪器和材料 液体闪烁仪、多头细胞取集器、二氧化碳培养箱、3H-TdR、RPMI
淀粉酶测定方法
植物中的淀粉酶能将贮藏的淀粉水解成麦芽糖。淀粉酶几乎存在于所有植物中，其中以禾谷类种子的淀粉酶活性最强。植物中有α–淀粉酶和β–淀粉酶，其活性因植物的生长发育时期不同而有所变化。通过本实验掌握淀粉酶的提取和测定方法。原理：α–淀粉酶和β–淀粉酶，各有其一定的特性，如β–淀粉酶不耐热，在高温下易钝化，
淀粉酶测定的意义
淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌，可通过肾小球滤过。 1.升高： （1）急性胰腺炎：血和尿中的AMY显著增高。发病后8～12h血清AMY开始增高，12～24h达高峰，2～5天下降至正常。尿AMY约于发病后12～24h开始升高，下降比血清AMS慢，因此，在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。特别是
淀粉酶的活力测定
原理淀粉被淀粉水解，切断淀粉链的α-1，4糖苷键，对碘呈蓝紫色的反应消失，这种呈色消逝的速度可以表示水解的程度，因而能衡量酶的活力。操作方法1、取试管1支，加20毫升2%淀粉，混匀，在30℃水浴中，使管内温度达到30℃。2、将淀粉酶0.5ml加到30℃的淀粉液中，混匀，在30℃水浴中保温，自加入记时
菌种的诱导培养及蛋白的提取
实验概要本实验通过摇瓶培养和发酵罐培养分别小量和大量诱导菌种表达，获得了目的蛋白的粗提物，通过Amylose亲和层析获得纯化蛋白。主要试剂LB培养基，2-YT培养基，诱导剂IPTG，5N氢氧化钠，2N盐酸，葡萄糖主要设备恒温振荡器，离心机，发酵罐实验材料重组菌实验步骤1. 摇瓶培养 1) 取出4℃
淀粉酶测定原理
把病人的标本（含淀粉酶）和底物的多糖一起进行反应，测定反应后的剩余底物或生成的产物来计算淀粉酶的活性。 底物一般含有4～7葡萄糖（戊糖、庚糖等），并连有发色基团如β－2－氯－4－硝基酚－G7等。经葡萄糖苷酶催化水解为黄色的对硝基酚和葡萄糖。 对硝基苯酚的生成量在一定范围内与AMY活性成正比，
酶活性测定条件的选择和限定
仅在一定条件下酶反应速度v才和酶量成正比例。一定条件是什么？这些条件之间有无主次关系？如何选择合适的测定条件？这些都是实验室工作者在设计或选择测酶活性浓度方法时必须面对的问题。 首先可从理论上探讨在什么特定情况下的反应速度才可能与酶量成正比例。酶的整个反应过程可简化如下： 式中Kp可看成为ES的
叶绿素的提取和分离实验步骤
提取：（1） 取菠菜或其他植物新鲜叶片4-5片（2g左右），洗净，擦干，去掉中脉剪碎，放入研。（2） 研钵中加入少量石英砂及碳酸钙粉，加2-3ml 95％乙醇，研磨至糊状，再加10-15ml 95％乙醇，离心35min，提取上清液过滤于三角瓶中，残渣用10ml 95％乙醇冲洗，一同过滤于三角瓶中。（
叶绿素的提取和分离实验步骤
提取：（1） 取菠菜或其他植物新鲜叶片4-5片（2g左右），洗净，擦干，去掉中脉剪碎，放入研。（2） 研钵中加入少量石英砂及碳酸钙粉，加2-3ml 95％乙醇，研磨至糊状，再加10-15ml 95％乙醇，离心35min，提取上清液过滤于三角瓶中，残渣用10ml 95％乙醇冲洗，一同过滤于三角瓶中。（
降落数值仪对α淀粉酶活性的分析应用
α-淀粉酶在小麦制粉工艺时总是会遇到这么一个概念，尤其是α-淀粉酶的活性问题，更是面粉的主要指标。怎么理解这种酶呢？α-淀粉酶遍及微生物到高等植物，其分布范围是十分广泛的。现在α-淀粉酶泛指的是能够从淀粉分子内部随机切开α-1，4糖苷键，起液化作用的一类酶。在面包烘焙方面α-淀粉酶的测定也有十分
α淀粉酶和β淀粉酶之间的功能差异
α-淀粉酶： ✤ 是一种内切葡糖苷酶，随机作用于淀粉链内部的α-1,4糖苷键。 ✤ 降解直链淀粉产物是葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖。 ✤ 降解支链淀粉产物是葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖和α-极限糊精。 β-淀粉酶： ✤ 是一种外切葡糖苷酶，从淀粉的非还原端切开α-1,4糖苷键，逐个除去二糖单位，原
α淀粉酶和β淀粉酶的功能差异分析
α-淀粉酶：是一种内切葡糖苷酶,随机作用于淀粉链内部的α-1,4糖苷键.降解直链淀粉产物是葡萄糖,麦芽糖,麦芽三糖.降解支链淀粉产物是葡萄糖,麦芽糖,麦芽三糖和α-极限糊精. β-淀粉酶：是一种外切葡糖苷酶,从淀粉的非还原端切开α-1,4糖苷键,逐个除去二糖单位,原来的α连接被转型,产物为β-麦芽糖
淀粉酶和异淀粉酶的相关介绍
淀粉酶 葡萄糖淀粉酶，糖化酶，编号E.C.3.2.1.3 γ-淀粉酶（γ-amylase）是外切酶，从淀粉分子非还原端依次切割α（1→4）链糖苷键和α（1→6）链糖苷键，逐个切下葡萄糖残基，与β-淀粉酶类似，水解产生的游离半缩醛羟基发生转位作用，释放β-葡萄糖。无论作用于直链淀粉还是支链淀粉
溶血、黄疸对酶活性测定的影响实验
实验方法原理L－丙氨酸＋α－酮戊二酸ALT丙酮酸＋L－谷氨酸丙酮酸＋NADH＋H＋→L－乳酸＋NAD+实验材料黄疸血清试剂、试剂盒ALT／GPT试剂仪器、耗材半自动生化分析仪试管加样器实验步骤1、稀释试剂．2、开机预温达37度．3、选取测定程序．4、测试：5、结果分析：
溶血、黄疸对酶活性测定的影响实验
实验方法原理 L－丙氨酸＋α－酮戊二酸ALT丙酮酸＋L－谷氨酸丙酮酸＋NADH＋H＋→L－乳酸＋NAD+实验材料 黄疸血清试剂、试剂盒 ALT／GPT试剂仪器、耗材 半自动生化分析仪试管 加样器实验步骤 1、稀释试剂．2、开机预温达37度．3、选取测定程序．4、测试：5、结果分析：
谷丙转氨酶的活性测定实验_显色法
实验方法原理血清谷丙转氨酶（SGPT）能催化丙氨酸与酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸，丙酮酸在酸性条件下与2，4-二硝基苯肼可缩合成丙酮酸二硝基苯腙，该腙在碱性条件下呈现出橙红色，呈色深浅符合比尔定律，在520 nm处有最大吸收。SGPT 在肝脏中含量最高，由于肝细胞损害，该酶逸出血液，可使 SGPT 含
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验2
用发光分析定量测定ATP 实验步骤 Sigma公司提供了 -种测定MP浓度的非常简单，灵敏&又方便的方法。其原理是用荧光素酶从荧光素和ATP中产生光。在荧光素/荣光素酶浓度恒定的情况下，可以绘制一条不同ATP浓度时产光量变化的标准曲线，因此可以很容易地对来自细胞裂解物的未知样品进行
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验4
测定[γ-32P]ATP的比活性 实验步骤 准备下列材料： 含有未知浓度mp] ATP的细胞裂解物样品 10mg/ml激酶底物肽渐夜（Calbiochem) 0.5mraol/L cAMP 溶液 I、Calbiochem) cA-PrK (Calbiochem) cA-P
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验1
从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP实验步骤1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料：本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺（v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心：高氣酸■
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验3
用高效液相层析定量测定ATP实验步骤1)准备下列材料：Whatman Partisphere SAX高效液相层析柱和保护柱线性梯度洗脱液设定在254nm的紫外线监测仪装配好的0.2;mi Whatman滤膜和滤器0.2^?过滤的Milli-Q水0.2/im S@_0,:5m〇l/LNH4H2ro4
葛根提取物的活性成分
1、藤本，长约达10cm，全株被黄褐色长硬毛。 2、 三出复叶互生，托叶盾状着生，卵状椭圆形；中央小叶菱状卵形或宽卵形，侧生小叶斜椭圆形，两面被糙毛。背面较密；托叶盾形，小托叶针状。 3、 总状花序腋生，花密集；小苞片卵形或披针形；花萼钟状，萼齿5，上面2齿合生，下面1齿较长，内外面均被黄色
问荆提取物的活性成分
全草含问荆皂甙、木贼甙、异槲皮甙、木犀草甙、硅酸(含量达干生药的5.19～7.77%)、有机酸、脂肪、β-谷甾醇、犬问荆碱、二甲砜、胸嘧啶、3-甲氧基吡啶、多种氨基酸。孢子含五羟基蒽醌葡萄糖甙、廿八烷二酸、卅烷二酸、卅烷二酸二甲酯、棉花皮次甙和草棉甙。
天麻提取物的活性成分
化学成分含天麻甙(天麻素,gastrodin)、天麻甙元、天麻醚甙(gastrodioside)、 派立辛(parishin)、香草醇、β2甾醇、对羟基苯甲醛、柠檬酸、琥珀酸等。
麦冬提取物的活性成分
含麦冬皂甙A、B、B’、C、C’、D、D’(ophiopogoninA，B，B’，C，C’、D，D’)、麦冬酮A、B(ophiopogononeA，B)、甲基麦冬黄酮A、B(methy-lophiopogononeA，B)、二氢麦冬黄酮A、B(ophiopogonanoneA，B)等。
活性成分总黄酮的提取方法
总黄酮的提取方法1、 熔剂法热水提取法、碱性水或碱性稀醇提取法、有机溶剂提取法 2、2、微波提取法微波提取是利用不同结构的物质在微波场中吸收微波能力的差异，使基体物质中的某些区域或提取体系中的某些组分被选择性加热，从而使被提取物质从基体或体系中分离，进入介电常数较小，微波吸收能力相对差的提取剂[1]
报告基因实验——植物提取物中LUC活性的检测
实验材料植物组织试剂、试剂盒裂解液萤光素酶分析缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、完整组织1. 液氮速冻植物组织（5~50 mg)，研磨成粉末状。2. 100~400 ul 裂解液室温重悬，组织匀浆。3. 16000 g，4℃ 离心 15 min，弃掉破碎的细胞。4. 检测提取物中的蛋白质浓度。5.
唾液淀粉酶活性的观察的注意事项
注意事项：唾液淀粉酶最适温度为37℃，温度高于或低于最适温度，酶的活性都要降低，可以设计三组实验，温度分别是0℃、37℃、100℃唾液催化淀粉的水解。（1）唾液淀粉酶的最适pH是6.8，使实验结果对比更明显。（2）此时淀粉被完全分解，加碘后呈现出碘液的颜色。（3）加大唾液的稀释倍数。（4）唾液淀粉酶
尿淀粉酶的测定意义
淀粉酶（AMY）主要来源于胰腺和腮腺，人血清淀粉酶易通过肾小球滤膜而出现于尿中。测定尿液淀粉酶的临床意义主要有：1.急性胰腺炎：尿液淀粉酶活性一般于发病12～24h开始增高，比血清淀粉酶迟6～10h，但由于肾脏对淀粉酶的清除率增强，尿淀粉酶活性可高于血清一倍以上，多数在持续3～10天后恢复正常。2.
α淀粉酶测定方法的比较
α-淀粉酶(EC3．2．1．1)测定方法很多，尚难以标准化。碘淀粉比色法、因底物和产物不确定，线性差而不能满足准确性要求。最近IFCC批准了用亚乙基封闭的G7-pNP作底物的酶偶联法(EPS法)作为临时推荐方法，但该法需工具酶，延迟时间长，还不是最理想的参考方法。使用2-氯-4-硝基苯-
α淀粉酶测定方法的比较
α-淀粉酶(EC3．2．1．1)测定方法很多，尚难以标准化。碘淀粉比色法、因底物和产物不确定，线性差而不能满足准确性要求。最近IFCC批准了用亚乙基封闭的G7-pNP作底物的酶偶联法(EPS法)作为临时推荐方法，但该法需工具酶，延迟时间长，还不是最理想的参考方法。使用2-氯-4-硝基苯-麦牙三糖