小鼠骨髓细胞染色体标本制作——秋水仙素处理法
实验方法原理由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。实验材料小白鼠试剂、试剂盒秋水仙素姬姆萨染液固定液低渗液生理盐水仪器、耗材天平离心机恒温培养箱显微镜实验步骤1.戴上帆布手套,以脱颈椎法处死小鼠,立即用剪刀剪去大腿处的皮肤和肌肉,连同关节头一起取下两侧股骨和胫骨,剔净其上肌肉,用2%柠檬酸钠溶液洗净。剪去关节头,使其露出骨髓腔,用吸有适量2%柠檬酸钠溶液的注射器,将针头插入骨髓腔,将骨髓用柠檬酸钠溶液吹洗入刻度离心管,反复洗直至骨腔变白。2.将所得的骨髓细胞悬浮液1000r/min离心10min,吸去上清液,加0.075mol/L KCl 5~8ml,立即用吸管吹打均匀,室温下静置低渗25min。3.1000r/min离心10min,去上清液,沿管壁......阅读全文
小白鼠骨髓细胞染色体显带(C带)技术
实验概要1、了解染色体显带技术的基本知识; 2、学习小白鼠骨髓细胞染色体显带(C带)技术。实验原理染色体显带(Banding)技术是一种用染料对染色体进行分化染色的方法。就是将染色体经酸、碱、温度等处理后,再以染料染色,或单用某些荧光染料就可以染出深浅不同或明暗各异的带纹的纵向结构。此项技术发明于本
脱落细胞检查标本采集和涂片制作方法
一、标本采集 正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键之一,故要准确地选择部位,尽可能在病变区直接采集细胞。采集的标本必须保持新鲜,尽快制得,以免细胞自溶或腐败。尽可能避免血液、粘液等混入标本内,采集方法应简便,操作轻柔,避免病人痛苦和引起严重并发症及促进肿瘤扩散,下面介绐几种常用的标本采集方法。
小型两栖类动物的标本制作
实验概要本实验以蛙类为例,说明了标本制作过程。主要试剂1. 福尔马林液:用于固定和保存标本。2. 0.5~0.8%氢氧化钠溶液:用于腐蚀标本上的残存肌肉。3. 汽油:用于脱掉标本上的脂肪。4. 3%过氧化氢:用于漂白标本。主要设备1. 解剖盘、标本瓶、注射器:用于盛放标本和向标本注射固定液。2. 解
简述荧光显微镜的标本制作要求
1、荧光显微镜—载玻片:载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。 2、荧光显微镜—盖玻片:盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光 ,也可用干涉盖玻片,这是
免疫荧光技术的标本的制作过程
免疫荧光技术在实际应用上主要有直接法和间接法。直接法是在检测样品上直接滴加已知特异性荧光标记的抗血清,经洗涤后在荧光显微镜下观察结果。免疫荧光直接法可清楚地观察抗原并用于定位标记观察。间接法是在检测样品上滴加已知的细菌特异性抗体,待作用后经洗涤,再加入荧光标记的第二抗体。如研制成的抗沙门氏菌荧光抗体
脱落细胞检查标本采集和涂片制作方法
一、标本采集 正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键之一,故要准确地选择部位,尽可能在病变区直接采集细胞。采集的标本必须保持新鲜,尽快制得,以免细胞自溶或腐败。尽可能避免血液、粘液等混入标本内,采集方法应简便,操作轻柔,避免病人痛苦和引起严重并发症及促进肿瘤扩散,下面介绐几种常用的标本采集方法。
杂交瘤技术基本程序与方法10
(2)杂交瘤细胞的复苏 杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞或其他细胞在液氮中保存,若无意外情况时,可保存数年至数十年。复苏时融解细胞速度要快,使之迅速通过最易受损的 -5℃?0℃,以防细胞内形成冰晶引起细胞死亡。 通常情况下,冻存时细胞数量多,生长状态好的杂交瘤细胞系以及其他细胞的复苏可采用以下方法,这也是各个
正常细胞常规核型标本制备_人淋巴细胞染色体标本制备
实验方法原理在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋白质,使染色体清晰且分散良好。再结合离心技术去掉红细胞碎片,然后采用空气干燥法制片获得中期染色体标本。实验材料HeLa细胞
染色体实验技术分析
染色体分裂指数低:患者处于非常时期(感染期、放、化疗期): 培养基营养成份不良; 培养基PH偏低或偏高; PHA过量或不足; 小牛血清质量不高; 小牛血清数量偏低或过高; 培养温度
小白鼠骨髓细胞染色体显带(C带)技术介绍
实验原理染色体显带(Banding)技术是一种用染料对染色体进行分化染色的方法。就是将染色体经酸、碱、温度等处理后,再以染料染色,或单用某些荧光染料就可以染出深浅不同或明暗各异的带纹的纵向结构。此项技术发明于本上世纪六十年代末、七十年代初,发展至今已是非常成熟。1971年在巴黎召开第四次国际人类遗传
动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片材料、原理和步骤1
实验九 动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片 一、实验目的: 了解动物细胞染色体制片的原理,学习骨髓细胞染色体的制片方法,观察动物细胞染色体的数目和形态。 二、实验原理: 染色体是基因的载体。真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传指标之一。制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术,优良的染色
体外培养细胞的染色体标本制备实验
实验材料细胞实验步骤1. 体外培养的细胞,在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞(传代后24h,圆形发亮的细胞)时,加入秋水仙素溶液,终浓度为0.3μg/ml培养液; 2. 继续培养3h; 3. 胰酶消化收集细胞至离心管; 4. 离心1000转/min,离心10min,去上清; 5. Hanks液洗,离心
体外培养细胞的染色体标本制备实验
实验材料 细胞实验步骤 1. 体外培养的细胞,在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞(传代后24h,圆形发亮的细胞)时,加入秋水仙素溶液,终浓度为0.3μg/ml培养液; 2. 继续培养3h; 3. 胰酶消化收集细胞至离心管; 4. 离心1000转/min,离心10min,去上清; 5. Hanks液洗,
染色体CBG标本制备实验——基本方案
实验方法原理异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的,因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近,或在染色体臂上呈现“团块”,这些染色质主要由C显带技术呈现,故称为C带。CBG即C带、Ba(OH)2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA,但在C带区有很强抗性,仍保留大部分
如何用鼓风干燥箱做骨标本制作?
在传统骨标本的制作过程中,一直困扰着的难题就是制作周期偏长。尤其像南方区域 的梅雨天多、湿度大等诸多因素影响,使得制作骨标本的过程时间周期更长。有一个方案可以有效的解决以上问题,就是在脱脂前采用鼓风干燥箱烘烤标本 ,缩短了标本的制作时间。具体实验过程如下:锯断踝部,平内踝和外踝往上约 15mm处
标本制作团队出马-黑喉潜鸟别样方式“留沪”
上海科技馆标本制作团队将一只新近死亡的黑喉潜鸟基本制作成标本,让它以别样的方式停留在上海,提醒公众保护生态环境的重要性。近日,人们在上海市浦东新区世纪公园内发现一只沾染大片油污的黑喉潜鸟,数日后,它被发现死亡并漂在公园的湖中。在世纪公园园方以及浦东新区林业站的帮助下,这只潜鸟的尸体此前被打捞上来并运
动物细胞的染色体工程
又称为染色体转导,或染色体介导的基因的转移。染色体转导术,目前有两类,其一,称为微细胞转移术。应用低浓度秋水仙素长时间处理可使细胞微核化,经去核处理后,可得到只含相当于几个乃至一个染色体的微细胞。微细胞被导入完整细胞以后仍显示RNA合成,因而微核编码的基因信息可望在微细胞异核体内表达出来。如小鼠的微
关于检测染色体和染色体组畸变—荧光原位杂交(FISH)技术的基本介绍
荧光原位杂交最早由Bauman(1980)建立,后由Lucas(1989)首先应用于染色体畸变分析。其原理是按检测目标准备恰当的DNA序列作为探针,并用生物素标记,对载玻片上待测标本中的DNA杂交,最后通过杂交位点的荧光观察染色体结构或数目的改变。应用特殊染色体和染色体某区域的荧光探针可在体内检
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析 实验方法原理 采用微量全血培养人体外
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析 实验方法原理 采用微量全血培养人体外
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养人淋巴细胞染色体标本制备肿瘤细胞的染色体标本制备人体染色体常规核型的分析实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋
研究构建染色体融合小鼠模型、模拟染色体演化过程
9月21日,Cell Research在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)李劲松研究组撰写的题为Creation of artificial karyotypes in mice reveals robustness of genome organizati
绒毛标本分裂中期染色体涂片制备实验
实验材料绒毛样本试剂、试剂盒HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液胶原蛋白酶溶液完全培养基秋水仙胺枸橼酸钠甲醛 冰乙酸仪器、耗材无菌 Watchmaker 精细镊冷试管摇床试管混合器Sorvall GLC-2B 离心设备HL-4转子和6个 15ml 离心管塑料培养皿倒置显微镜或解剖显微镜热气增湿器空
绒毛标本分裂中期染色体涂片制备实验
实验材料 绒毛样本试剂、试剂盒 HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液胶原蛋白酶溶液完全培养基秋水仙胺 枸橼酸钠甲醛 冰乙酸仪器、耗材 无菌 Watchmaker 精细镊冷试管摇床试管混合器Sorvall GLC-2B 离心设备HL-4转子和6个 15ml 离心管塑料培养皿倒置显微镜或解剖显微镜热气
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备
实验概要本文介绍了人外周血染色体制备和体外培养细胞染色体标本制备的原理、操作流程及注意事项。实验原理人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种
荧光显微镜原理与标本的制作方法
一、原理 荧光显微镜原理荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像 (一)光源 现在多采用200W的超高压汞灯作光源,它是用石英玻璃制作,中间呈球形,内充一
荧光显微镜原理与标本的制作方法
一、原理 荧光显微镜原理荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像 (一)光源 现在多采用200W的超高压汞灯作光源,它是用石英玻璃制作,中间呈球形,内充一
荧光显微镜原理与标本的制作方法
一、原理 荧光显微镜原理荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像 (一)光源 现在多采用200W的超高压汞灯作光源,它是用石英玻璃制作,中间呈球形,内充一定数量的汞,
正常细胞常规核型的标本制备实验_微量全血培养
正常细胞常规核型的标本制备可应用于:(1)进行核型分析;(2)与肿瘤核型进行对比研究。实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备1
一、 人外周血染色体制备实验原理 人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。在培养液中加入植