小鼠骨髓细胞染色体标本制作——秋水仙素处理法
实验方法原理由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。实验材料小白鼠试剂、试剂盒秋水仙素姬姆萨染液固定液低渗液生理盐水仪器、耗材天平离心机恒温培养箱显微镜实验步骤1.戴上帆布手套,以脱颈椎法处死小鼠,立即用剪刀剪去大腿处的皮肤和肌肉,连同关节头一起取下两侧股骨和胫骨,剔净其上肌肉,用2%柠檬酸钠溶液洗净。剪去关节头,使其露出骨髓腔,用吸有适量2%柠檬酸钠溶液的注射器,将针头插入骨髓腔,将骨髓用柠檬酸钠溶液吹洗入刻度离心管,反复洗直至骨腔变白。2.将所得的骨髓细胞悬浮液1000r/min离心10min,吸去上清液,加0.075mol/L KCl 5~8ml,立即用吸管吹打均匀,室温下静置低渗25min。3.1000r/min离心10min,去上清液,沿管壁......阅读全文
动物染色体标本的制备
一、实验目的1. 了解染色体标本制备的基本原理2. 掌握滴片法制备染色体标本的一般步骤二、实验原理每一物种的细胞一般都具有一定数目、形状和大小的染色体,在秋水仙素的作用下可使分裂细胞阻断在中期,此时染色体形态最典型,然后通过低渗、固定、染色等步骤,便可在显微镜下呈现出其形态。三、实验用品器具:显微镜
染色体GTG标本制备实验
基本方案 实验方法原理 非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体,其他多数染色体难以确认,而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹,以辨认全部染色体。GT
水稻根尖染色体标本制备
实验概要 水稻根尖染色体标本制备实验步骤1.取材: 选取水稻种子,充分浸种后,将它们摆在铺有滤纸的培养皿内,在约28℃条件下发芽培养,当胚根长至1~1.5cm时,剪下备用。2.预处理 压片法:采用0.1%秋水仙素处理2h左右 去壁低渗法可采用以下四种方法处理
荧光显微镜标本制作要求
荧光显微镜标本制作要求一、载玻片载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片,一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。二、盖玻片盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光,也可用干涉盖玻片,这是一种特制的表面镀有
免疫荧光的标本要如何制作?
荧光显微技术主要靠观察切片标本上荧光抗体的染色结果作为抗原的鉴定和定位。因此标本制作的好坏直接影响到检测的结果。在制作标本过程中应力求保持抗原的完整性,并在染色、洗涤和封埋过程中不发生溶解和变性,也不扩散至临近细胞或组织间隙中去。标本切片要求尽量薄些,以利抗原抗体接触和镜检。标本中干扰抗原抗体反应的
动物剥制标本的制作方法
实验概要掌握动物剥制标本的基本制作方法。实验原理动物剥制标本的制作是指脊椎动物而言,也就是说脊椎动物的大部分种类都可以制成剥制标本,但在实际应用中,主要适用于哺乳类和鸟类,以及一些不宜采用浸制方法的其它各纲的大型种类,如鲸、鲨鱼、海龟等。动物的种类繁多,外部形态、躯体大小,皮肤情况等等都很不一样,在
显微镜切片标本的制作步骤
显微镜切片标本的制作步骤,第一步准备:用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净。把载玻片放在实验台上,用吸管在载玻片的中央滴一滴清水。第二步制片,用镊子取材(如:从洋葱鳞片叶子内侧的表皮上,撕取一小块透明薄膜)。把材料(如:撕下的薄膜)浸入载玻片上的水滴中,用镊子把薄膜展平。用镊子夹起盖玻片,使它的一边
荧光显微镜标本制作要求
(一)载玻片 载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片,一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。 (二)盖玻片 盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光,也可用干涉盖玻片,这是一种特制的表面镀有若干层
羊水细胞染色体标本的制备
一、原理 人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可区分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长,所以在培养过程中的生长期最短。AF细
染色体提前凝集标本制备实验
实验方法原理七十年代初,由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子,它无种属特异性,所以在细胞融合和染色体技术的基础上,建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期(I期)细胞融合,从而诱导I期细胞染色质提前浓缩成染色体。形成的这种染色体称提前凝集的染色体(PrematurelyConde
染色体提前凝集标本制备实验
基本实验实验方法原理七十年代初,由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子,它无种属特异性,所以在细胞融合和染色体技术的基础上,建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期(I期)细胞融合,从而诱导I期细胞染色质提前浓缩成染色体。形成的这种染色体称提前凝集的染色体(PrematurelyC
羊水细胞染色体标本的制备
一、原理人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可区分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长,所以在培养过程中的生长期最短。AF细胞在再培
荧光显微镜的标本制作要求
1、载玻片载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。2、盖玻片盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光 ,也可用干涉盖玻片,这是一种特制的表面镀有若干层对不同波长的
组织切片标本制作的基本原理
最为广泛应用的方法:石蜡切片 不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺
荧光显微镜标本制作的要求
荧光显微镜标本制作的要求 (一)载玻片 载玻片厚度应在0.8~L2mm之间,太厚的玻片,一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚焦。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英载玻片。 (二)盖玻片 盖玻片厚度在o.17mm左右,光洁。为了加强激发光,也可用干涉
荧光显微镜的标本制作要求
1、载玻片 载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。 2、盖玻片 盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光 ,也可用干涉盖玻片,这是一种特制的表面镀有若
生物标本制作常用生理盐水的配制
配方一 各种动物需用的生理盐水哺乳类 需用生理盐水浓度是 0.9% 。称取 0.9 克氯化钠,溶解在少量蒸馏水中,稀释到 100 毫升。鸟类 需用的生理盐水浓度是 0.75% 。称取 0.75 克氯化钠,溶解后用蒸馏水稀释到 100 毫升。两栖类 需用的生理盐水浓度是 0.65% 。称取 0.65
荧光显微镜的标本制作要求
1、载玻片载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。2、盖玻片盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光 ,也可用干涉盖玻片,这是一种特制的表面镀有若干层对不同波长的
荧光显微镜标本制作原理概述
免疫荧光细胞化学的基本工具是荧光显微镜。它的主要部件是光源、滤板系统和光学系统等。荧光显微镜制作标本的原理是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。(一)光源荧光显微镜多采用200 W的超高压汞灯作光源,它是用石英玻璃制作而成,中间呈球形,内充一定数量的汞,工作
如何正确制作荧光显微镜标本
(一) 玻片及盖玻片(Slide and Coverslips)玻片及盖玻片品质必须很好而没有荧光,玻片厚度≦1.0mm 者便可用,玻片之清洗,必须以中性清洁剂洗净,再浸于含有3%HCl 之乙醇12~ 24 小时,然后再储存于纯酒精。要用时,以清洁纱布擦净或火焰烘干。用完后可浸于水中,移去封埋物,再
荧光显微镜的标本制作要求
1、载玻片 载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。 2、盖玻片 盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光 ,也可用于涉盖玻片,这是一种特制的表面镀有若
荧光显微镜的标本制作要求
1、载玻片载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。2、盖玻片盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光 ,也可用干涉盖玻片,这是一种特制的表面镀有若干层对不同波长的
线粒体及高尔基体永久标本的制作
(一)显示线粒体—Regand染色法1.取材固定:固定材料必须新鲜,所以要求杀死动物后立即取材,切成1—2mm3大小的块,投入固定液中。固定液:3%重铬酸钾20ml福尔马林(中性)5ml固定4天(可在冰箱中),每天换固定液一次。4天后转入3%重铬酸钾中7天,每2天换一次液体。2.流水冲洗24小时后,
生物标本制作常用生理盐水的配制
配方一 各种动物需用的生理盐水 哺乳类 需用生理盐水浓度是 0.9% 。称取 0.9 克氯化钠,溶解在少量蒸馏水中,稀释到 100 毫升。 鸟类 需用的生理盐水浓度是 0.75% 。称取 0.75 克氯化钠,溶解后用蒸馏水稀释到 100 毫升。 两栖类 需
荧光显微镜标本制作原理概述
免疫荧光细胞化学的基本工具是荧光显微镜。它的主要部件是光源、滤板系统和光学系统等。荧光显微镜制作标本的原理是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。(一)光源荧光显微镜多采用200 W的超高压汞灯作光源,它是用石英玻璃制作而成,中间呈球形,内充一定数量的汞,工作
荧光显微镜的标本制作要求
1、载玻片载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。2、盖玻片盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光 ,也可用干涉盖玻片,这是一种特制的表面镀有若干层对不同波长的
荧光显微镜的标本制作要求
1、载玻片载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。2、盖玻片盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光 ,也可用干涉盖玻片,这是一种特制的表面镀有若干层对不同波长的
植物标本采集制作保存方法图文详解
植物标本的制作方法及步骤 一、准备植物标本采集及制作要准备以下工具及材料:1、木质标本夹(45×34cm、40*750px、33*600px,26*475px并配以绳带,根据所采集标本大小选择相应的标本夹)2、标本纸(吸水性强的草纸或加厚可循环使用的白色吸水纸)和透气瓦楞纸3、采集袋(塑料袋)4
正常细胞常规核型的标本制备_肿瘤细胞染色体标本制备
实验方法原理利用肿瘤细胞无限繁殖的特点,掌握其体外生长动态,取处于对数生长期的细胞便可获得丰富的分裂相。肿瘤细胞染色体异常包括两个方面:1. 结构异常 即在肿瘤细胞常出现的染色体畸变,包括双着丝点染色体、环状染色体、断裂的染色体、染色体裂隙及微小体等。2. 数目异常 由于肿瘤细胞分裂失去应有
杂交瘤技术基本程序与方法10
(2)杂交瘤细胞的复苏 杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞或其他细胞在液氮中保存,若无意外情况时,可保存数年至数十年。复苏时融解细胞速度要快,使之迅速通过最易受损的 -5℃?0℃,以防细胞内形成冰晶引起细胞死亡。 通常情况下,冻存时细胞数量多,生长状态好的杂交瘤细胞系以及其他细胞的复苏可采用以下方法,这也是各个