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实验概要本实验介绍了用直接免疫荧光法检查B 淋巴细胞膜表面免疫球蛋白（SmIg）的基本原理和操作步骤。实验原理SmIg 是B 细胞的抗原识别受体，也是B 细胞特异的表面标志，用直接免疫荧光法可检查出SmIg。用荧光素标记的抗Ig 抗体，在一定条件下与淋巴细胞混合，荧光素标记的抗Ig 抗体可以与B 细胞表面的Ig 结合，在荧光显微镜下观察可见B 细胞膜上出现荧光。此方法可用来鉴定B 淋巴细胞。主要试剂1. 异硫氰酸荧光素（FITC）标记的兔抗小鼠Ig 抗体（购自BD 公司）2. Hank's液：pH7.4(内含0.1%NaN3)主要设备1. 台式离心机2. 离心管3. 吸管4. 移液管等实验材料ICR 小鼠实验步骤1. 采用颈椎脱臼法处死小鼠，解剖取出脾脏放入盛有6ml Hank's液的平皿中，用100 目钢网研磨，混匀。从中吸取1ml细胞悬液放入一试管中......阅读全文
外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来，由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现，以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现，使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更
外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来，由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现，以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现，使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更
DNA倍体分析及细胞周期分析 在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成，但DNA含量仍为2N，为二倍体细胞,；处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N；正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞
第一部分：关于ELISPOT1． 什么是ELISPOT检测?答:酶联免疫斑点 ( enzyme-linked immunosorbent spot, ELISPOT) 检测技术是通过两种高亲和力的特异性抗细胞因子抗体来检测淋巴细胞分泌细胞因子情况的一种方法。淋巴细胞在体内被抗原激活后，或者在体外培养
抗血清的制备 【原理】：用抗原刺激机体可以产生抗体，抗原的性质、纯度和活性影响其免疫动物后获得的抗体的的特异性和效价。在体外有目的的制备抗原，经初次、再次免疫的过程可以获得高质量的抗体。 【注意事项】 ①制备佐剂时，一定要顺着同一方向用劲磨。 ②检查油包水的方法：培养皿内加水，滴入混匀液
流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，具有速度快、精度高、准确性好的优点，是当代最先进的细胞定量分析技术之一。光源、液流通路、信号检测传输和数据的分析系统是流式细胞仪的主要组成
1、体积、电导和激光散射原理这是Beckman－Coulter 公司生产的血液分析仪所采用的经典分析方法，他集三种物理学检测技术于一体，在细胞处于自然原始的状态下对其进行多参数分析。该方法也称为体积、电导、激光散射血细胞分析法。此技术采用在标本中首先加入红细胞溶血剂溶解掉红细胞，然后加入稳定剂来中
流式细胞分析（Flow cytometry，FCM）是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒，测量其产生的散射光和发射荧光的强度，从而对细胞（或微粒）的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术，它具有如下几个特点：①标本只要
实验概要本实验介绍了玫瑰花环试验的原理、方法和注意事项等，玫瑰花环试验是目前鉴定和计算外周血液和各种淋巴样组织中T淋巴细胞的最常用方法之一。实验原理动物T淋巴细胞表面具有结合异种动物红细胞的受体，称为E受体，在体外一定条件下，能与绵羊等动物的红细胞结合，形成以T细胞为中心，红细胞环绕在周围，宛似一朵
中科院“百人计划”，国家杰出青年基金获得者许琛琦研究员主要从事淋巴细胞与疾病等领域的研究，今年其研究组在Nature杂志上发文，通过调节T淋巴细胞胆固醇代谢可以提高细胞膜胆固醇水平，从而促进T淋巴细胞对肿瘤的杀伤，由此发展了一种新的肿瘤免疫治疗方法。同时近期许琛琦研究员也受邀在Nature Re
实验概要本实验介绍了玫瑰花环试验的原理、方法和注意事项等，玫瑰花环试验是目前鉴定和计算外周血液和各种淋巴样组织中T淋巴细胞的最常用方法之一。实验原理动物T淋巴细胞表面具有结合异种动物红细胞的受体，称为E受体，在体外一定条件下，能与绵羊等动物的红细胞结合，形成以T细胞为中心，红细胞环绕在周围，宛似一朵
流式细胞分析（Flow cytometry，FCM）是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒，测量其产生的散射光和发射荧光的强度，从而对细胞（或微粒）的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术，它具有如下几个特点：①标本只要
《我不是药神》在网络上爆屏，电影以黑色幽默的形式反映了目前的现实：看病贵。但是，大家忽略了一个很重要的问题，那就是白血病治疗难。20年前，治疗慢性粒细胞白血病的特效药格列卫还未上市，医生能够用来治疗慢性粒细胞白血病的药很少，两三年后病人就会转化为急性白血病，后果可想而知。格列卫改变了慢性粒细胞白
第一节 免疫细胞的分离 一、外周血单个核细胞的分离 将2份6%聚蔗糖蒸馏水溶液与1份34%泛影葡胺生理盐水溶液混合，其比重为1.077±0.002，可作为常规的淋巴细胞分离液，即Ficoll分离液。 主要用于分离外周血中单个核细胞，是一种单次密度梯度离心分离法，其分布由上到下依次为：稀释
T淋巴细胞是宿主适应性免疫系统中最重要的免疫细胞之一，在抵抗病原入侵、维持机体稳态以及抗肿瘤等方面起到不可或缺的作用【1,2】。胸腺是T淋巴细胞发育的必需场所【3】。胎肝或骨髓来源的胸腺定植祖细胞（thymus seeding progenitor, TSP）迁移定植到胸腺后，即为早期胸腺祖细胞
医学研究人员通过三分类全自动血细胞分析仪对淋巴细胞浆细胞的正常形态学进行了更加深入的研究。 （一）原始淋巴细胞（lymphoblast） 细胞直径 10～18μm，圆形或椭圆形
（1）过氧化物酶染色的原理和临床意义[原理] 粒细胞和单核细胞胞浆中含有的过氧化物酶（peroxidase，POX）能将底物过氧化氢分解，产生新生态氧，它将四甲基联苯胺氧化为联苯胺蓝。联苯胺蓝自我脱氢氧化，显棕色四甲基苯醌二胺，再加入亚硝基铁氰化钠与联苯胺蓝结合，可形成稳定的蓝色颗粒，定位于细胞浆内
实验原理动物T淋巴细胞表面具有结合异种动物红细胞的受体，称为E受体，在体外一定条件下，能与绵羊等动物的红细胞结合，形成以T细胞为中心，红细胞环绕在周围，宛似一朵玫瑰花样的花环，故取名为E玫瑰花环试验(erythrocyte rosettes assay)或自然花环形成试验。凡能与RBC形成E花环
实验原理动物T淋巴细胞表面具有结合异种动物红细胞的受体，称为E受体，在体外一定条件下，能与绵羊等动物的红细胞结合，形成以T细胞为中心，红细胞环绕在周围，宛似一朵玫瑰花样的花环，故取名为E玫瑰花环试验(erythrocyte rosettes assay)或自然花环形成试验。凡能与RBC形成E花环
（1）过氧化物酶染色的原理和临床意义 [原理] 粒细胞和单核细胞胞浆中含有的过氧化物酶（peroxidase，POX）能将底物过氧化氢分解，产生新生态氧，它将四甲基联苯胺氧化为联苯胺蓝。联苯胺蓝自我脱氢氧化，显棕色四甲基苯醌二胺，再加入亚硝基铁氰化钠与联苯胺蓝结合，可形成稳定的蓝色颗粒，定
医学研究人员通过三分类全自动血细胞分析仪对淋巴细胞浆细胞的正常形态学进行了更加深入的研究。 （一）原始淋巴细胞（lymphoblast） 细胞直径 10～18μm，圆形或椭圆形
一、 实验准备1． 标本制备：2． zui小化非特异性结合： 二、凋亡1．凋亡的检测方法：网站和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法 三、细胞因子1．激活的细胞因子2．CBA 四、血小板
胡晓波，上海交通大学医学院附属第三人民医院检验科主任，副主任技师。1993年毕业于上海第二医科大学，并留校任医学检验系教师。1999年至上海市临床检验中心，担任中心副主任，负责业务和部分行政管理工作。2006年至上海交通大学医学院附属第三人民医院检验科工作，担任科副主任、
免疫治疗作为肿瘤治疗的新兴策略之一, 已成为近年来的研究热点。结直肠癌因其复杂多变的遗传分子学机制得到了诸多研究人员的青睐。对于结直肠癌而言，免疫微环境在很大程度上决定着治疗难度及患者的生存预后等。 近日，一篇发表在Scientific reports的研究发现：肿瘤浸润性CD20+B淋巴细
实验概要熟悉混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte cultue，MLC)的原理；掌握分离淋巴细胞的方法；学习用同位素标记进行混合淋巴细胞培养的操作方法。实验原理混合淋巴细胞培养或称混合淋巴细胞反应（MLR）是将二个无关个体的淋巴细胞混合在一起培养，由于二者的淋巴细胞膜上的组织相容性抗原
实验概要本实验介绍了B细胞特有的表面标志膜表面免疫球蛋白(SmIg)的检测方法。实验原理膜表面免疫球蛋白(SmIg)，是B细胞特有的表面标志，它既是B细胞识别抗原的受体，与相应抗原特异性结合；又是表面抗原，能与相应的抗Ig的抗体结合，故可用荧光标记的抗Ig抗体作免疫荧光镜检，以查出B淋巴细胞。由于B
免疫功能与每个人的健康状态息息相关，而淋巴细胞亚群分析正是检测免疫功能的重要指标——它能反映机体当前的免疫功能、状态和平衡水平，并可以辅助诊断某些疾病（如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等），对分析发病机制，观察疗效及检测预后都有重要意义。那么淋巴细胞亚群究竟是什么？它的检测
实验步骤一、材料1. 胞质分裂阻滞微核试验2. 微核的着丝点检测(1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。(2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。(3) 过氧化物酶标记的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基联苯溶液（D A B ): I m g /m L 溶于
实验步骤 一、材料 1. 胞质分裂阻滞微核试验 2. 微核的着丝点检测 (1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。 (2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。 (3) 过氧化物酶
实验概要本实验介绍了B细胞特有的表面标志膜表面免疫球蛋白(SmIg)的检测方法。实验原理膜表面免疫球蛋白(SmIg)，是B细胞特有的表面标志，它既是B细胞识别抗原的受体，与相应抗原特异性结合；又是表面抗原，能与相应的抗Ig的抗体结合，故可用荧光标记的抗Ig抗体作免疫荧光镜检，以查出B淋巴细胞。由于B