细菌的转化与平板筛选
实验概要本实验介绍了细菌的转化与平板筛选的原理及操作步骤。实验原理 感受态是指细菌处于容易吸收外源DNA的状态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子导人细菌的过程。其原理是细菌处于0℃,CaCl2低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基—钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42℃短时间热击处理,促进细胞吸收DNA复合物。将细菌放置在非选择性培养基中保温一段时间,促使在转化过程中获得的新的表型(如Ampr等)得到表达,然后将此细菌培养物涂在含有氨苄青霉素的选择性培养基上。重组质粒转化宿主细胞后,还需对转化菌落进行筛选鉴定。利用α互补现象进行筛选是最常用的一种鉴定方法。现在使用的许多载体都具有一段大肠杆菌β半乳糖苷酶的启动子及其编码α肽链的DNA序列,此结构称为lacZ'基因。lacZ'基因编码的α肽链是β半乳糖苷酶的氨基端的短片段(146个氨基酸)。任何携带着lacZ'......阅读全文
重组质粒的筛选(抗生素平板筛选和α互补筛选)
重组DNA转化受体细胞后,须在不同水平上进行筛选,以区别转化子与非转化子、重组子与非重组子以及鉴定所需的特异性重组子。在转化过程中,并非每个受体细胞都被转化;即使获得转化细胞,也并非都含有目的基因,所以需采用有效方法进行筛选。筛选的方法包括根据遗传表型筛选、限制性内切酶分析筛选、核酸探针筛选、PCR
细菌的转化与平板筛选
[实验原理]感受态是指细菌处于容易吸收外源DNA的状态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子导人细菌的过程。其原理是细菌处于0℃,CaCl2低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基—钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42℃短时间热击处理,促进细胞吸收DNA复合物。将细
细菌的转化与平板筛选
实验概要本实验介绍了细菌的转化与平板筛选的原理及操作步骤。实验原理 感受态是指细菌处于容易吸收外源DNA的状态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子导人细菌的过程。其原理是细菌处于0℃,CaCl2低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基—钙磷酸复合物粘附于细胞表面
血平板与巧克力平板
血平板(1)成分:普通营养琼脂(或哥伦比亚琼脂),脱纤维羊血(2)制法:取所需要量的普通营养琼脂(或哥伦比亚琼脂),加蒸馏水溶解后,高压灭菌。冷却至50℃,加入一定量(5%)的羊血,倾注平板。(3)用途:适于各类细菌的生长。巧克力平板(1)成份:普通营养琼脂(或哥伦比亚琼脂),氯化血红素,万古霉素,
谷物筛选器筛选原理
谷物筛选是指根据粮食颗粒大小的不同,利用一层或数层静止的或运动的筛面对物料进行分选的方法。因为筛选和重力分选的主要对象是谷物,其介于固体和液体之间而被称为散粒体。散粒体具有流动性和自动分级性能。谷物筛选器就是一款专门检验颗粒粮食、油料试样的含杂率及大米中、糠粉含量,确定其品质等级的仪器。
什么是平板导热仪?平板导热仪作用
什么是平板导热仪?平板导热仪作用:导热测试仪是一种基于傅立叶导热定律而进行材料导热系数测量的仪器,在导热过程中,单位时间内通过给定截面的热量,与该截面的面积和垂直于该截面方向的温度梯度成正比。 平板导热仪稳态法测量导热系数的困难主要在于相关参量的准确获得。由于导热系数是标志一个过程(传热)的
谷物筛选原理以及筛选仪器
筛选是指根据物料粒度的不同,利用一层或数层静止的或运动的筛面对物料进行分选的方法。由于筛选和重力分选的主要对象是谷物,就其性质而言,介于固体和液体之间而被称为散粒体。散粒体具有流动性和自动分级性能。谷物筛选器检验颗粒粮食、油料试样的含杂率及大米中、糠粉含量,确定其品质等级的一种检验仪器,确定其害虫密
平板荷载试验
平板荷载试验;平板荷载试验是一项使用最早、应用广泛的原位试验方法,该试验是在一定尺寸的刚性承压板上分级施加荷载,观测各级荷载作用下天然地基土随压力和变形的原位试验,它可用于:根据荷载-沉降关系线(曲线)确定地基力的承载力;设计土的变形模量;估算土的不排水抗剪强度及极限填土高度。平板荷载试验适用于地表
DSX电脑筛选器筛选粮食杂质
在粮食品质检测中,粮食筛选,容重测定等是其中重要的检测项目,容重测定一般使用容重器就可以完成,而粮食筛选也可以使用仪器完成,我们推荐是使用DSX电脑筛选器。该仪器是专为粮食杂质筛选而研制开发的专用仪器,其标准符合GB5494-85《粮食油料检验杂质、不完善粒检验法》国家标准,属于新标准仪器产品,使用
用电脑筛选器筛选粮食杂质
在农业育种工作中,对粮食、油料等进行筛理分级是其中十分重要的内容,主要作用是通过筛选来检验粮食油料的杂质、不完善粒等。而随着科技的发展和育种技术的进步,现代粮食杂质筛选已经告别了繁琐复杂的手筛法,广泛采用的是电脑筛选器法。使用仪器来进行粮食杂质的筛选,不仅更加轻松,而且效率更高,检验效果更好,能够更
食品平板菌落计数
1 主题内容与适用范围本文规定了食品平板菌落计数的方法。本文适用于航空配餐的各种半成品、成品及原料,有专门规定的检验方法的除外。2 设备和材料超净工作台、恒温培养箱(36±1℃)、均质器、振荡器、吸管(1ml、10ml)、平皿、稀释瓶、天平等3 培养基和试剂平板计数琼脂、75%乙醇、磷酸盐缓冲稀释液
巧克力平板制备实验
实验方法原理主要是蛋白胨和牛肉粉用来提供细菌生长所需的碳源、氮源、氨基酸以及维生素。氯化钠维持培养基中的渗透压,琼脂用做凝固剂。脱纤维羊血提供氯化血红素和辅酶I,为嗜血杆菌属的生长提供特殊营养。巧克力平板培养基还能够培养其他细菌,主要的原因是血液中有V、X因子,这两种因子是位于红细胞中的,一般细菌不
平板菌落计数法
平板菌落计数法,是种统计物品含菌数的有效方法。方法如下:将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液涂布到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞;统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数
血平板制备实验
实验方法原理肉汤琼脂中加羊血或兔血均可。用血量为5-7%。在血平板上除了可以观察菌落的形态外,还可判断溶血情况,菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为β-溶血。菌落周围成绿色为α-溶血。溶血情况可以显微镜下用低倍镜观察。实验步骤成分:牛肉浸出液: 1000 ml蛋白胨:
巧克力平板制备实验
实验方法原理 巧克力平板应用羊血或免血制备。因其中含有Ⅹ和Ⅴ因子,嗜血杆菌、奈瑟氏菌等生长良好,凡疑有这些菌种存在的标本,均须接种巧克力平板。血液标本培养,增苗后有细苗生长,若移种巧克力平板上,有利于分离到更多的细菌。实验步骤 成分:牛肉浸出液: 1000 ml蛋白胨:
倾注平板法原理
样品中的微生物细胞充分分散开,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,单个细胞及聚在一起的细胞可以生长繁殖,形成一个肉眼可见的菌落,统计菌落数目,即可用以评价样品中的微生物的数量。水中细菌菌落总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中,37℃经24h培养后所生长的菌落数。用平板菌落计数测定水中细菌菌落总
平板划线flash演示
由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落。
分流平板如何清洗
日常简单的护理,会令皮更夹耐用。若皮夹沾湿了,应先以干布吸去水分,然后放在阴凉之处,让皮夹自然风干。
平板硫化机
平板硫化机主要用于硫化平型胶带(如输送带、传动带,简称平带),属于液压机械,平板硫化机的主要功能是提供硫化所需的压力和温度。压力由液压系统通过液压缸产生,温度由加热介质(通常为蒸汽、导热油等,过热水也有用)所提供。输送带平板硫化机主要用于硫化平型胶带、胶板、高分子等平板类产品的成型,它具有热板单位面
平板电脑“管”医院
首都医科大学附属北京朝阳医院理事长兼党委书记封国生手持一部iPad,全院的门诊量、病人手术量、病床使用情况等各种信息一目了然。他高兴地说:“应用大数据推进医院精细化管理,让我们的新医改更有效率。” 别看每个医院占地面积不大,但却包含门诊、急诊、住院、行政、财务、人事等10多个系统,每天都会产生
平板菌落如何计数
最简单的人工计数法,就是在平板底部用水笔划分出小格,在明亮的台式灯下,一格一格数,不容易乱。如果菌落又多又密且分布均匀,可以先在平板底部的正中划一“十字”,十字贯穿整个平板,然后在“十字”基础上平分成若干扇形,数其中一部分后乘以扇形个数,所得菌落数只是估计数。
血平板制备实验
实验方法原理 肉汤琼脂中加羊血或兔血均可。用血量为5-7%。在血平板上除了可以观察菌落的形态外,还可判断溶血情况,菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为β-溶血。菌落周围成绿色为α-溶血。溶血情况可以显微镜下用低倍镜观察。实验步骤 成分:牛肉浸出液: 1000 ml蛋白胨:
平板菌落计数法
实验概要学习平板菌落计数的基本原理和方法。实验原理 平板菌落计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的,也就是说一个菌落即代表一个单细胞。计数时,先将待测样品作一系列稀释,再取一定量的稀释菌液接种到培养皿中,使其均匀分布于平皿中的培养基内,经培养后,由单个细
谷物筛选器的筛选原理是什么?
说到筛选其实我们都不会太陌生,其实它就是根据物料粒度的不同,利用一层或数层静止的或运动的筛面对物料进行分选的方法。在种子检验领域,筛选仪器的代表就是谷物筛选器,它的作用就是用于检验颗粒粮食、油料试样的含杂率及大米中、糠粉含量,由于这些检测指标与谷物的品质息息相关,因此如果要确定谷物的品质等级
震动筛选机的筛选范围广
震动筛选机筛选:任何颗粒、粉末、粘液一定范围内均可筛选。筛分最细至500目或O028rrlm,过滤最小可至5微米。分级筛选,可筛一至五层筛网,能同时进行二至六个等级的分选或过滤。
微生物培养中倒平板的平板指的是什么
没错,平板指的是将固体培养基加温融化后,在其冷却前分别倒入多个玻璃培养皿,其冷却后,即在培养皿内形成薄薄的一层固体培养基,这个过程就是到平板
关于涂布平板法的实验方法—涂布平板的介绍
平板接种培养 平板接种培养有混合平板培养法和涂布平板培养法两种方法。 (1)混合平板培养法 :将无菌平板编上10-7、10-8、10-9号码,每一号码设置三个重复,用无菌吸管按无菌操作要求吸取10-9稀释液各1ml放入编号10-9的3个平板中,同法吸取10-8稀释液各lml放入编号10-8的3
电动筛选器与谷物筛选器的区别
谷物筛选器和电动筛选器都是筛选器,用于粮食作物的筛选,包括种子的筛选。在育种、品质鉴定中都有非常大的作用。但是,电动筛选器和电动筛选器又是不同的,他们的运行机制也不同,但是功能却相似,都是为谷物筛选而准备的。下面我们就具体来介绍下电动筛选器和谷物筛选器。电动筛选器有DSX型电动筛选器,是根据GB54
蓝白斑筛选
实验中,通常蓝白筛选是与抗性筛选一同使用的。含X-gal的平板培养基中同时含有一种或多种载体所携带抗性相对应的抗生素,这样,一次筛选可以判断出:未转化的菌不具有抗性,不生长;转化了空载体,即未重组质粒的菌,长成蓝色菌落;转化了重组质粒的菌,即目的重组菌,长成白色菌落。目前很多实验室省去蓝白斑筛选的步
CDNA文库筛选
(一)λgt11 cDNA文库铺平板宿主细菌制备1.用一个E.coli宿主菌株单菌落分别接种2×5ml LB培养基(Y1088用于噬菌斑杂交,Y1090用于免疫筛选),于37℃振荡培养过夜。2.将过夜培养物以3000×g离心5min。3.分别用2ml λ-dil(10 mmol/L tris-Cl,