DNAladder法检测细胞凋亡
实验概要发生细胞凋亡时，内源性核酸酶被激活，染色体DNA链在核小体之间被切割，形成180～200个碱基或其整数倍的DNA片段，将这些DNA片段抽提出来进行电泳，可得到DNA梯状条带（DNA ladder）。主要试剂蛋白酶K（500μg/ml）8mol/L 醋酸钾白细胞裂解液：pH8.0，10mmol/L Tris-HCl，10mmol/L NaCl，10mmol/L EDTA，1% SDS氯仿无水乙醇，70%乙醇2%琼脂糖凝胶实验材料凋亡细胞 实验步骤1. 收集凋亡细胞：取1～2×106 个细胞，离心后，立即用70%酒精（-20℃）固定2h；2. 洗涤：取出酒精固定的细胞，1000r/min离心5min ，去掉上清液，PBS洗二次；3. 裂解细胞：加400μl细胞裂解液，充分混匀再加蛋白酶K100μl，置65℃水浴消化2小时或过夜；4. 蛋白处理：加75μl 8mol/L的醋酸钾......阅读全文
DNA－Ladder的概念
DNA Ladder是指细胞凋亡时DNA在核小体间断裂 (DNA fragmentation ) 形成一些DNA片断， 经过提取和纯化后在凝胶电泳上产生n条带，由于这些DNA条带经染色并成像之后的整体类似于梯子上的一个个踩踏板。
DNA－Ladder的概念
DNA Ladder是指细胞凋亡时DNA在核小体间断裂 (DNA fragmentation ) 形成一些DNA片断， 经过提取和纯化后在凝胶电泳上产生n条带，由于这些DNA条带经染色并成像之后的整体类似于梯子上的一个个踩踏板。
DNA－Ladder的功能介绍
DNAladder的形成与细胞调亡密不可分 同时也是判断细胞凋亡的重要标准DNA ladder的形成是连接核小体间的DNA被切割，形成质量不同的片段，由于切割是随机的，各片段的质量不同，但都是一个核小体所含DNA的倍数，形成梯度，经过电泳，从而使分子量不同的部分形成梯度。DNA Ladder是一种即
DNA－ladder法检测细胞凋亡
发生细胞凋亡时，内源性核酸酶被激活，染色体DNA链在核小体之间被切割，形成180～200个碱基或其整数倍的DNA片段，将这些DNA片段抽提出来进行电泳，可得到DNA梯状条带（DNA ladder）。一、材料与试剂凋亡细胞；蛋白酶K（500μg/ml）8mol/L 醋酸钾白细胞裂解液：pH8.0，10
DNA－ladder法检测细胞凋亡
发生细胞凋亡时，内源性核酸酶被激活，染色体DNA链在核小体之间被切割，形成180～200个碱基或其整数倍的DNA片段，将这些DNA片段抽提出来进行电泳，可得到DNA梯状条带（DNA ladder）。一、材料与试剂凋亡细胞；蛋白酶K（500μg/ml）8mol/L 醋酸钾白细胞裂解液：pH8.0，10
DNA－ladder法检测细胞凋亡
实验概要发生细胞凋亡时，内源性核酸酶被激活，染色体DNA链在核小体之间被切割，形成180～200个碱基或其整数倍的DNA片段，将这些DNA片段抽提出来进行电泳，可得到DNA梯状条带（DNA ladder）。主要试剂蛋白酶K（500μg/ml）8mol/L 醋酸钾白细胞裂解液：pH8.0，10mmol
细胞凋亡检测实验——DNA－ladder法
实验方法原理发生细胞凋亡时，内源性核酸酶被激活，染色体DNA链在核小体之间被切割，形成180～200个碱基或其整数倍的DNA片段，将这些DNA片段抽提出来进行电泳，可得到DNA梯状条带（DNA ladder）。 实验材料凋亡细胞试剂、试剂盒蛋白酶K醋酸钾白细胞裂解液Tris-HClNaClEDTAS
DNA－Ladder的测定方法是怎么一回事？
不同细胞不同状态是有不同死法的，具体是细胞凋亡、坏死、还是程序性坏死，需要进一步排查分析来确定。而细胞凋亡是个复杂的过程，针对凋亡时期不同，检测的方法有所不同。那如何去确定哪条途径被触发，在哪个步骤被阻断，以及抑制剂是否能够抑制呢？下面介绍几种常用的测定方法。 一：细胞凋亡的形态学检测 发生
电泳时的DNA分子量Marker和Agarose浓度的选择
电泳时的DNA分子量Marker和Agarose浓度的选择DNA片段长度Agarose浓度 使用Marker种类200 bp以下3%以上 фX174-Hae Ⅲ digest DNA Marker фX174-Hinc Ⅱ digest DNA Marker DL500™DNA Marker
细胞凋亡检测实验——DNA－片断化检测
实验方法原理细胞凋亡时主要的生化特征是其染色质发生浓缩, 染色质DNA 在核小体单位之间的连接处断裂, 形成50~300 kbp 长的DNA 大片段, 或180~200 bp 整数倍的寡核苷酸片段, 在凝胶电泳上表现为梯形电泳图谱（DNA ladder）。细胞经处理后，采用常规方法分离提纯DNA，进
常用细胞凋亡检测方法（三）
三、线粒体膜势能的检测 线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用，多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡，而线粒体跨膜电位DYmt的下降，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体DYmt崩溃，则细胞凋亡不可逆转。 线
DNA－isolation－extraction
CTAB TECHNIQUE / Method / Schedule / Protocol FOR DNA ISOLATION / DNA EXTRACTION FROM PLANT LEAF / LEAVES SAMPLES (see also DNA RNA double isolation
DNA片断化检测细胞凋亡
细胞凋亡时主要的生化特征是其染色质发生浓缩， 染色质DNA在核小体单位之间的连接处断裂， 形成50~300kbp长的DNA大片段， 或180~200bp整数倍的寡核苷酸片段， 在凝胶电泳上表现为梯形电泳图谱（DNA ladder）。细胞经处理后，采用常规方法分离提纯DNA,进行琼脂糖凝胶和溴
足迹法(Footprinting)
Footprinting Procedures· DNase I Footprinting (Mike A. Dyer)· DNase I footprintingDetermining the site of binding for a protein on a D
动物细胞培养及外源基因导入的原理和操作步骤（一）
实验原理细胞培养是现代生物学研究中应用最为广泛的技术之一。它的突出优点，一是研究对象是活的细胞，可长时期地监控、检测甚至定量评估其形态、结构和生命活动等；二是可以人为地严格控制研究条件，便于研究各种物理、化学、生物等外界因素对细胞生长、发育和分化等的影响，有利于单因子分析；三是研究的样本可以达到比较
Cloning－of－small－RNAs－with－5’－phosphate－and－3’－OH－ends2
3’ Adaptor Ligation and PurificationHeat shock the RNA by putting at 90°C for 30 seconds. Snap cool on ice.Set up the 3’Adaptor ligation reaction in a
动物细胞培养及外源基因导入的原理和方法
细胞培养是现代生物学研究中应用最为广泛的技术之一。它的突出优点，一是研究对象是活的细胞，可长时期地监控、检测甚至定量评估其形态、结构和生命活动等；二是可以人为地严格控制研究条件，便于研究各种物理、化学、生物等外界因素对细胞生长、发育和分化等的影响，有利于单因子分析；三是研究的样本可以达到比较均一性。
Bioanalyzer
Protocol for Bioanalyzer RNA nano chippreparation of material12 samples per chipquantitative range 25–500 ng/μlquantitation accuracy 20%CV (for ladder
常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤（二）
第三种 线粒体膜势能的检测 线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用，多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡，而线粒体跨膜电位DYmt的下降，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体DYmt崩溃，则细胞凋亡不可逆转。线粒体
关于细胞凋亡的晚期检测介绍
细胞凋亡晚期中，核酸内切酶（某些Caspase的底物）在核小体之间剪切核DNA，产生大量长度在180-200 bp 的DNA片段。对于这一现象的检测通常有以下两种方法： 1) TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP n
琼脂糖电泳protocol
试剂: 试样20μl DNA ladder 琼脂糖 TAE缓冲液 上样缓冲液含0.5μg/ml EB的电泳缓冲液50×TAE贮存液: Tris 242g冰乙酸 57.1ml0.5mol/LEDTA(pH
Quantitating－RNA
RNA quantitation is an important and necessary step prior to most RNA analysis methods. Here we discuss three common methods used to quantitate RNA an
DNA梯状标志的概念和用途
中文名称DNA梯状标志英文名称DNA ladder marker定 义由一系列含碱基对数目不同的DNA片段组成，凝胶电泳后DNA条带呈阶梯状分布，可作为样本DNA分子大小的标志物。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
细胞凋亡的晚期检测
晚期检测细胞凋亡晚期中，核酸内切酶（某些Caspase的底物）在核小体之间剪切核DNA，产生大量长度在180-200 bp 的DNA片段。对于这一现象的检测通常有以下两种方法：1) TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP n
细胞凋亡的晚期检测方法介绍
细胞凋亡晚期中，核酸内切酶（某些Caspase的底物）在核小体之间剪切核DNA，产生大量长度在180-200 bp 的DNA片段。对于这一现象的检测通常有以下两种方法：1) TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-
关于细胞凋亡的晚期检测的介绍
细胞凋亡晚期中，核酸内切酶（某些Caspase的底物）在核小体之间剪切核DNA，产生大量长度在180-200 bp 的DNA片段。对于这一现象的检测通常有以下两种方法： 1) TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP n
动物细胞培养及外源基因导入的原理和操作步骤
实验概要通过本实验掌握传代细胞培养的基本方法，了解无菌操作的基本原则。掌握磷酸钙介导的贴壁细胞的通用转染方法。了解细胞凋亡的形态特征，掌握细胞凋亡DNA梯度（“DNA Ladder”）电泳检测法。实验原理细胞培养是现代生物学研究中应用最为广泛的技术之一。它的突出优点，一是研究对象是活的细胞，可长时期
细胞凋亡晚期检测技术
晚期检测： 细胞凋亡晚期中，核酸内切酶（某些Caspase的底物）在核小体之间剪切核DNA，产生大量长度在180-200 bp 。对于这一现象的检测通常有以下两种方法： 1.TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated d
琼脂糖凝胶电泳MARKER就是跑不开的原因
DNA电泳一定要使用DNA Marker或已知大小的正对照DNA来估计DNA片段大小。Marker应该选择在目标片段大小附近ladder较密的，这样对目标片段大小的估计才比较准确。需要注意的是Marker的电泳同样也要符合DNA电泳的操作标准。如果选择λDNA/HindIII或者λDNA/EcoRI
细胞凋亡检测方法总览（早期检测、晚期检测和mRNA水平）
细胞凋亡的检测方法，从大类上还可以分为早期检测、晚期检测和mRNA水平的检测。一、早期检测1、PS（磷脂酰丝氨酸）在细胞外膜上的检测2、细胞内氧化还原状态改变的检测3、细胞色素C的定位检测4、线粒体膜电位变化的检测二、 晚期检测1、TUNEL2、LM-PCR Ladder （连接介导的PCR检测）当