流式细胞术常用样品的制备方法
实验概要流式细胞术的实验检测对象是单细胞悬液,因此,在组织化学和免疫组织化学实验中欲对待测样品细胞进行分类计数,也需把样品制备成细胞悬液,并要求被检细胞大小为0.2~80pm,每个样品中至少有20 000个细胞,细胞浓度为105~107个/ml。制备成的单细胞悬液经荧光或免疫荧光标记即可上机检测。本实验介绍了单层培养细胞单细胞悬液、实体组织单细胞悬液及石蜡包埋组织流式细胞样品的制备流程。主要试剂0.25%胰蛋白酶,无钙离子和镁离子的PBS液,70%乙醇,l%胃蛋白酶溶液主要设备倒置显微镜,培养瓶,吸管,离心管,4℃冰箱,剪刀,匀浆器,不锈钢网,流式细胞仪实验步骤1. 单层培养细胞单细胞悬液的制备 1) 弃去培养细胞(对数生长期)中的旧培养液,加入1~2ml 0.25%胰蛋白酶,倒置显微镜下观察,见细胞稍变圆时,停止胰蛋白酶作用。也可直接观察培养瓶,静置消化2~3分钟,待细胞逐渐变白,有脱落趋势时,立即......阅读全文
流式细胞术的发展历史及流式细胞仪的原理
相关专题实验室的CT-流式细胞仪流式细胞分析(flow cytometry,FCM)即流式细胞术,是用流式细胞仪 (flow cytometer,FCM)测量液相中悬浮细胞或微粒的一种现代分析技术。它凝结众多不同学术背景、不同科研领域科学家的心血。从流式细胞术的发明、发展直到今天在各个领域应用的拓展
流式细胞仪检测实验_用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞
实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇(不是100%乙醇)冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素(FITC)-链霉亲和素(streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机(或相当的
流式细胞仪应用
1.分析 细胞表面标志2.分析细胞内抗原物质3.分析细胞受体4.分析肿瘤细胞的DNA、RNA含量5.分析 免疫细胞的功能
流式细胞技术精彩回顾
分子生物学主要致力于对细胞中不同系统之间相互作用的理解,包括DNA,RNA和蛋白质生物合成之间的关系以及了解它们之间的相互作用是如何被调控的。而流式细胞仪是测量液相中悬浮细胞或微粒的一种现代分析技术。与传统的荧光镜检查相比,具有速度快、精度高、准确性好等优点。技术简介流式细胞术(Flow Cytom
流式细胞术的展望
流式细胞仪从细胞技术开始发展到今天,60年代至70年代是其飞速发展时期,激光技术、喷射技术以及计算机的应用使流式细胞仪在原理和结构上形成了固定的模式。80年代则是流式细胞仪的商品化时期,这期间不断有新型号的仪器推出,在多参数检测技术上不断提高。进入90年代,随着微电子技术特别是计算机技术的发展,计算
流式细胞术的应用
(一)流式细胞术在细胞生物学中的应用流式细胞术最早被应用于生物学研究领域,就是生物细胞周期和动力学的分析。近年来,DNA倍体分析已经越来越广泛应用于临床和基础研究,发挥越来越重要的作用。1. 有利于肿瘤的早期诊断和鉴别诊断 良性肿瘤或良性增生时不会出现非整倍体细胞(DI>1),而恶性肿瘤则伴有相当数
流式细胞仪简介
1 流式细胞仪的概念及其发展历史 1.1 流式细胞仪的基本概念 流式细胞仪(flow cytonletry,FCM)是对高速直线流动的细胞或生物微粒进行快速定量测定和分析的仪器,主要包括样品的液流技术、细胞的计数和分选技术,计算机对数据的采集和分析技术等。流式细胞仪以流式细胞术
流式细胞仪原理
生物实验中的封闭剂流式细胞实验总结:内容包括流式细胞仪 流程、原理、各种类型的样本操作、样本准备,以同型对照的理解,及不同情况下如何使用封闭剂等。是本人相当一段时间来的收集以及修正的内容。流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免
流式细胞仪结构
流式细胞仪结构 流式细胞仪是进行流式细胞分析的仪器,集电子、计算机、激光、流体理论于一体,被誉为试验室的“CT”。 流式细胞术(Flow CytoMeter, FCM)是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段,它可高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,
什么是流式细胞术
一种在液流系统中,快速测定单个细胞或细胞器的生物学性质,并把特定的细胞或细胞器从群体中加以分类收集的技术。其特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射和光吸收来定量测定细胞 DNA含量、细胞体积、蛋白质含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原等许多重要参数。根据这些参数将不同性质的细胞分开,以获得供生物学
流式细胞术的用途
流式细胞术能在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点。流式细胞分析仪临床用于细胞治疗中心在FACSVantage革命化的细胞分选功能基础上推出的分选增强(Sort
什么是流式细胞术?
流式细胞术是一种生物学技术,用于对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选。这种技术可以用来对流过光学或电子检测器的一个个细胞进行连续的多种参数分析。流式细胞术(Flow CytoMetry,FCM)是对悬液中的单细胞或其他生物粒子,通过检测标记的荧光信号,实现高速、逐一的细胞定量分析和分选的技术。其特
流式细胞仪简介
1 流式细胞仪的概念及其发展历史 1.1 流式细胞仪的基本概念 流式细胞仪(flow cytonletry,FCM)是对高速直线流动的细胞或生物微粒进行快速定量测定和分析的仪器,主要包括样品的液流技术、细胞的计数和分选技术,计算机对数据的采集和分析技术等。流式细胞仪以流式细胞术
流式细胞术的概述
为了使您更好的了解临床检验技师的相关内容,医学教育网特搜集相关资料供大家参考。 流式细胞术(flowcytometry,FCM)是一种综合应用光学、机械学、流体力学、电子计算机、细胞生物学、分子免疫学等学科技术,使被测溶液流经测量区域,并逐一检测其中每一个细胞的物理和化学特性,从而对高速流动的细
流式细胞术的原理
流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种对单细胞或其他生物粒子膜表面以及内部的化学成分进行定量分析和分选的检测手段,它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,同传统的荧光镜检查相比,具有速度快,精度高准确性好等特点,成为当代最先进的细胞定量分析技术。自20世
流式细胞术(FCM)简介
流式细胞仪是测量染色细胞标记物荧光强度的细胞分析仪,广泛应用于基础临床研究和临床实践各个方面, 希望我们的工作能给您的科研和临床诊治带来一定的帮助, 也希望您能给与我们的工作一定的支持!检测项目有:1,淋巴细胞亚群 2,HLA-B27 3,白血病免役分型 4,DNA倍体分析 5,血
流式细胞分选的特点
1. 少量细胞分选时,流式细胞分选精确度高(99%以上),速度快。先进的流式细胞仪的分选速度可达25000个细胞/秒以上,比传统的分选速度提高了很多倍,需要一天的工作只需要几小时就能完成。不过流式细胞仪分离细胞的量还是有一定的限制,一次分离的最大合理量约为10个细胞。如果细胞量超过10个,则需要耗费
流式细胞术的特点
1.测量速度快;2.可进行多参数测量;3.是一门综合性的高科技方法( FCM综合了光学,电子学,流体力学,细胞化学,免疫学,激光和计算机等多门学科和技术);4.既是细胞分析技术,又是精确的分选技术。
流式细胞术基本简介
流式细胞术(英语:flow cytometry)是一种生物学技术,用于对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选。这种技术可以用来对流过光学或电子检测器的一个个细胞进行连续的多种参数分析。流式细胞术(Flow Cytometry,FC)是对悬液中的单细胞或其他生物粒子,通过检测标记的荧光信号,实现高速、
如何看流式细胞图
流式的图一般是两种形式。一是柱状图,X轴是信号强度,Y轴是计数。数据通常显示为峰值。比如阴性或者信号弱的峰在左侧,而阳性或者信号强的就位于右侧。柱状图一次只能显示一个通道信号,通常用来判断阳性,阴性的区别或者单个通道信号在不同样本间的变化。另外一种形式是散点图。就是把两个通道的信号同时显示在图上。优
如何看流式细胞图
有两种,一种散点图,每一个点代表一个细胞,如FSC-SSC散点图,FSC代表细胞大小,SSC代表细胞颗粒度,根据散点图,可以对细胞进行分群。另一种为直方图,与统计学中直方图相似,x轴表示一个通道的值,如荧光强度,y轴表示细胞数量。二维点图以双参数显示结果,每个点表示一个或多个细胞。图5-6为阴性对照
流式细胞术的原理
流式细胞术(flowcytometry,FCM)是一种综合应用光学、机械学、流体力学、电子计算机、细胞生物学、分子免疫学等学科技术,使被测溶液流经测量区域,并逐一检测其中每一个细胞的物理和化学特性,从而对高速流动的细胞或亚细胞进行快速定量测定和分析的方法。首先,待测细胞经处理或染色后被压人流动室,与
什么是流式细胞术?
流式细胞术(flow cytometry)是一种快速定量分析细胞的新技术,已广泛用于肿瘤研究,特别是应用于瘤细胞DNA含量的检测。许多资料表明,实体恶性肿瘤的DNA倍体大多为非整倍体或多倍体,所有良性病变都是二倍体。检测异常DNA含量不但可作为恶性肿瘤的标志之一,且可反映肿瘤的恶性程度及生物学行
流式细胞术的步骤
流式细胞仪的操作和使用 ①打开电源,对系统进行预热; ②打开气体阈,调节 压力,获得适宜的液流速度;开启光源冷却系统; ③在样品管中加入去离子水,冲洗液流的喷嘴系统; ④利用校准标准样品,调整仪器,使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的基础上,0和90散射的荧光强度最
活体流式细胞仪
活体流式细胞仪(In vivo Flow Cytometer, IVFC)是一种新的生物医学光学仪器,结合活体(近红外)实时高速影像方法和体外流式细胞仪的概念,可实时检测活体CTC并可以进行定量分析与检/监测,可用于实验室对肿瘤治疗效果的早期实时监测及评估,药物的早期筛选等。IVFC技术原理是:带有
流式细胞仪技术
利用各种显微镜进行形态学观察通常只能对细胞凋亡进行定性而不能定量。利用荧光素或者免疫组织化学方法标记凋亡细胞,则可以通过在显微镜下分别计数凋亡细胞数和总细胞数,计算两者的比值而进行半定量研究。数100~200个总细胞,既费时又费力;显微镜下视野的不同还会造成结果的变异。流式细胞仪(flow cyto
流式细胞术实验步骤
流式细胞术实验:1、制备细胞悬液,计数2、分装,按照每个EP(1.5ml)管1-2*10 6个细胞分装,3500rpm,4度离心。3、用100ulPBS重悬,加入10ul大鼠血清封闭,4度避光30min。4、加入相应的荧光标记的抗体,混匀,避光,4度孵育30min。5、加入1mlPBS洗两遍。6、用
流式细胞仪技术
测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光,经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器,光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数字化后而成整数,以调出显示和进行分析。一、样品的制备细
流式细胞术检验基础
流式细胞术是一种综合应用光学、机械学、流体力学、电子计算机、细胞生物学、分子免疫学等学科技术。流式细胞术(flowcytometry,FCM)是一种综合应用光学、机械学、流体力学、电子计算机、细胞生物学、分子免疫学等学科技术,使被测溶液流经测量区域,并逐一检测其中每一个细胞的物理和化学特性,从而对
CytoFLEX-流式细胞仪
采用 CytoFLEX 流式细胞仪上的紫光侧向散射光,有利于进行亚微颗粒分析和计数背景和目标基于 FCM 的纳米颗粒(SMP)检测需要特殊的散射光参数设置。该参数的设置和标准化可以用微球作为 QC 工具实现。目标:采用流式细胞仪 (FCMr) 对 SMP 进行分析和计数。● 采用微球对最有用的散射参