电泳后的凝胶染色实验
实验概要本文介绍了电泳后主要的凝胶染色方法，包括：标准考马斯亮蓝染色法、快速考马斯亮蓝染色法、凝胶铵银染色法、凝胶中性银染色法及凝胶铜染色法。实验步骤1. 标准考马斯亮蓝染色法 1) 电泳后，将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的0.25%考马斯亮蓝R-250(溶解于50%甲醇和10%乙酸中)； 2) 室温下振摇温育4h至过夜； 3) 去除染色液，收集保存可重复使用20-40次； 4) 依次在25%甲醇和7.5%乙酸中室温振摇下脱色。灵敏度为0.1-0.5ug蛋白／每条带。注：使用加热的染色液或脱色液可以缩短染色或脱色时间。将染色液或脱色液在微波炉或水浴中加热，(大约50-60℃)，染色时间可缩短至20min,脱色时间约 1-2h。2. 快速考马斯亮蓝染色法 1) 电泳后，将凝胶转入一洁净的玻......阅读全文
凝胶色谱柱
分类 根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物，凝胶色谱又可分为凝胶过滤色谱（GFC）和凝胶渗透色谱（GPC）。凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子
如何选择凝胶
生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性，然后通过实验选择出最有效的纯化流程。 1.测定------分子量、PI 当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时，可用PAGE电泳方法
凝胶色谱讲义
第一章 前言一、高聚物及多糖平均分子量及其分布1、高聚物的平均分子量除天然聚合物外，合成聚合物都是以单体为原料经过聚合反应而制得的。每个聚合物分子都是由数目很大的单体分子加成或缩合而成，所以合成聚合物的分子量比单体要大千百倍甚至成万倍。另一方面，根据绝大多数的聚合反应机理预示，生成的聚合物的分子量
凝胶过滤实验
蛋白质纯化的层析技术中，凝胶过滤比较独特,它是基于蛋白质分子质量的相对大小而分离。与传统的过滤相反，通过凝胶过滤柱后,并没有任何蛋白质留存于其中。凝胶过滤优缺点明显;优点在于，脆性蛋白质与层析固定相结合并不会破坏其功能;缺点在于,和凝胶不结合则限制层析的分辨率。作者： 伯吉斯等,主译：陈薇，本实验来
凝胶纯化实验
试剂、试剂盒 蒸馏水乙醇甲酰胺胶的缓冲液亚甲基蓝十二烷基硫酸钠储存液TAE 缓冲液Tris 乙酸盐乙酸纳EDTA蓝色葡聚糖TEN 缓冲液40mer聚丙烯酰胺胶仪器、耗材 解剖刀UV 灯过滤 UV 的安全破璃实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂蒸馏水乙醇，95%甲酰胺 (使用安珀莱特单床离子交换
凝胶色谱柱
凝胶色谱柱:由于凝胶色谱柱是根据被分离物质的分子量大小而分离物质,通常用稀的氢氧化钠或非离子型去垢剂(0.2%-1%NP-40或Lubrol)冲洗可除去大部分的结合物质,如果一些污染物仍然不能清除时,用24%或30%乙腈冲洗过夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去亲水蛋白,用蛋白水解酶处理可分
凝胶色谱（图）
原理： 以多孔性物质作固定相，样品分子受固定相孔径大小的影响而达到分离的一种液相色谱分离模式。样品分子与固定相之间不存在相互作用力（吸附、分配和离子交换等），因而凝胶色谱又常被称作体积排斥色谱、空间排阻色谱、分子筛色谱等。比固定相孔径大的溶质分子不能进入孔内，迅速流出色谱柱
凝胶电泳
以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。其中聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大，对一般蛋白质不起分子筛作用，但适用于分离同工酶及其亚型，大
凝胶过滤色谱
根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物，又可分为凝胶过滤色谱（GFC）和凝胶渗透色谱（GPC）。凝胶过滤色谱凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子，如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列，洗脱溶剂主要是水。
凝胶成像品牌
凝胶成像仪属于高科技产品，是需要软、硬件紧密一致配合的高端分子生物分析仪器。主要用于科研、医疗、教学等项目，目前国内进口品牌和国产品牌的市场占有率差不多。目前凝胶成像厂家很多，市场上常见的凝胶成像如：进口品牌进口品牌美国的市场上见的是相对比较多的有：UVP、伯乐、alpha、SIM、KODAK、GE
凝胶过滤实验
实验步骤 操作 采用分子筛层析获得的洗脱图谱如图 23.1 A 所 75。零 洗 脱 体 积 (zero elution volu m e ) 是指上样于层析固定相的样品体积。无法进入介质的分子的洗脱体积定义为无效体 积 V
凝胶的制备
凝胶的制备商品凝胶是干燥的颗粒使用前需直接在欲使用的洗脱液中膨胀。为了加速膨胀，可用加热法，即在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温至近沸，这样可大大中速膨胀，通常在1-2小时内即可完成。特别是在使用软胶时， 自然膨胀需24小时至数天，而用加热法在几小时内就可完成。这种方法不但节约时间，而且还可消毒，除去凝胶中
如何制作凝胶
原料列表： 1、 高分子胶 ------------------------------- 0.5g(1/2匙) 1g-6.00元 2、 纯水或蒸馏水 --------------------------- 83ml 自备-0.00元 缺 货 3、 三乙醇胺 -------------
凝胶成像定义
图像分析程序，适用于ID胶、斑点/狭缝印迹、平板、菌落、放射自显影、多排胶、蛋白胶、GFP、PCR、考马斯亮蓝及银染的胶及ZYMA胶；可进行凝胶图像分析、克隆计数分析、手动条带定量和斑点分析。
凝胶色谱（图）
原理： 以多孔性物质作固定相，样品分子受固定相孔径大小的影响而达到分离的一种液相色谱分离模式。样品分子与固定相之间不存在相互作用力（吸附、分配和离子交换等），因而凝胶色谱又常被称作体积排斥色谱、空间排阻色谱、分子筛色谱等。比固定相孔径大的溶质分子不能进入孔内，迅速流出色谱柱，不能被分离。比固定相孔径
琼脂糖凝胶电泳仪凝胶种类
琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳，广泛用于核酸的研究。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖，是由1，3连接的β－D吡喃半乳糖和1，4连接的3，6脱水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使其相互盘绕成绳状琼脂糖束，而形成大网孔型凝胶。一、高纯度琼脂糖凝胶：
凝胶色谱法实验技术—凝胶的选择介绍
凝胶色谱法实验技术根据所需凝胶体积，估计所需干胶的量。 一般葡聚糖凝胶吸水后的凝胶体积约为其吸水量的2倍，例如Sephadex G-20的吸水量为20，1 克Sephadex G─200吸水后形成的凝胶体积约40ml。凝胶的粒度也可影响层析分离效果。粒度细胞分离效果好，但阻力大，流速慢。一般实验
SDSPAGE凝胶电泳凝胶的制备方法
SDS-PAGE电泳可用于分离蛋白质和核苷酸 ，这里综述了SDS-PAGE实验原理、试剂和器材、以及实验操作步骤。一. 实验原理：SDS-PAGE是对蛋白质进行量化，比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子 量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂，可与蛋白质的疏水部
琼脂糖凝胶电泳仪凝胶种类
琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳，广泛用于核酸的研究。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖，是由1，3连接的β－D吡喃半乳糖和1，4连接的3，6脱水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使其相互盘绕成绳状琼脂糖束，而形成大网孔型凝胶。一、高纯度琼脂糖凝胶
琼脂糖凝胶电泳仪凝胶种类
琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳，广泛用于核酸的研究。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖，是由1，3连接的β－D吡喃半乳糖和1，4连接的3，6脱水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使其相互盘绕成绳状琼脂糖束，而形成大网孔型凝胶。一、高纯度琼脂糖凝胶：
凝胶色谱法实验技术—凝胶的制备介绍
凝胶色谱法实验技术—凝胶的制备：商品凝胶是干燥的颗粒使用前需直接在欲使用的洗脱液中膨胀。为了加速膨胀，可用加热法，即在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温至近沸，这样可大大中速膨胀，通常在1-2小时内即可完成。特别是在使用软胶时， 自然膨胀需24小时至数天，而用加热法在几小时内就可完成。这种方法不但节约时间
蛋白质凝胶电泳凝胶的制备方法
【材料与试剂】（1）30%的丙烯酰胺：分别称取29g 丙烯酰胺，1g N,N -亚甲双丙烯酰胺加温热的去离子水60ml，加热至37℃溶解，补加水至终体积为100ml,过滤，即配成30%（w/v）丙烯酰胺贮存溶液。丙烯酰胺和双丙烯酰胺在贮存过程中缓慢转变为丙烯酸和双丙烯酸，这一脱氨基反应是光催化或碱催
大豆蛋白凝胶制备和凝胶强度检测方法
目前大豆蛋白凝胶制备和凝胶强度检测方法没有相关可以参考的标准，各处使用的方法都不相同。以下为从各参考文献中摘录的方法。来源于各大院校和科研单位。序号凝胶制备方法凝胶检测方法文献来源凝胶制备参考文献1、不同 pH 条件下凝胶的制备：用 pH 值为3.5~11.5 的磷酸盐缓冲液( 0.0062mol/
琼脂糖凝胶电泳仪凝胶种类
琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳，广泛用于核酸的研究。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖，是由1，3连接的β－D吡喃半乳糖和1，4连接的3，6脱水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使其相互盘绕成绳状琼脂糖束，而形成大网孔型凝胶。 一、高纯度
凝胶过滤层析常用支持物和凝胶介绍
支持物是人工合成的交联高聚物，在水中膨胀后成为凝胶。凝胶内为内水层，凝胶周围的水为外水层。控制交联度以形成不同孔径的网状结构。交联度小的孔径大，交联度大的孔径小。凝胶只允许被分离物质中小于孔径的分子进入，大于孔径的分子被排斥在外水层，最先被洗脱下来。而进入孔径的分子也按分子量大小大致分离成不同的区带
琼脂糖凝胶电泳仪凝胶种类
琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳，广泛用于核酸的研究。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖，是由1，3连接的β－D吡喃半乳糖和1，4连接的3，6脱水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使其相互盘绕成绳状琼脂糖束，而形成大网孔型凝胶。一、高纯度琼脂糖凝胶：
葡聚糖凝胶层析（分子排阻层析或凝胶过滤）
【实验目的】1.掌握葡聚糖凝胶的特性及凝胶层析的原理。2．学习葡聚糖凝胶层析的基本操作技术。 【实验原理】 凝胶层析又称分子排阻层析或凝胶过滤，是以被分离物质的分子量差异为基础的一种层析分离技术，这一技术为纯化蛋白质等生物大分子提供了一种非常温和的分离方法。层析的固定相载体是凝胶颗粒，目前应
油田聚合物凝胶堵剂的凝胶强度测定
油田出水是目前油田开发中存在的一个普遍问题，由于油藏的非均质性和复杂的油水关系造成注水沿井间的高渗透层或裂缝突进和指进，降低了注入水的波及系数，造成中、低渗透层动用程度较低或根本未动用。寻找适合的堵剂对提高采收率具有一定的现实意义。 质构仪作为一种物性分析仪器，可以用于测定硬度、弹性、断裂强度、拉伸
油田聚合物凝胶堵剂的凝胶强度测定
油田出水是目前油田开发中存在的一个普遍问题，由于油藏的非均质性和复杂的油水关系造成注水沿井间的高渗透层或裂缝突进和指进，降低了注入水的波及系数，造成中、低渗透层动用程度较低或根本未动用。寻找适合的堵剂对提高采收率具有一定的现实意义。 质构仪作为一种物性分析仪器，可以用于测定硬度、弹性、断裂强度、拉伸
琼脂糖凝胶电泳仪凝胶的制备
琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳，广泛用于核酸的研究，为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖，是由1，3连接的β－D吡喃半乳糖和1，4连接的3，6脱水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使