柔嫩艾美耳球虫子孢子的DE52纯化方法
实验概要球虫子孢子广泛应用于球虫的体外研究和球虫的攻毒实验等实验中,它的纯化收集的效率直接影响着实验的进程。DE-52是一个被广泛应用的纤维柱纯化体系,其纯化效率高,子孢子获得量较大。实验步骤1. DE-52维素层析柱的制备 1) 称取DE-52纤维素2.0g,用去离子水浸泡24小时,使其溶胀,每隔6-8小时倒掉上清,用去离子水换液一次; 2) 弃掉上清,用适量0.1mol/L NaOH溶液浸泡,混匀静置60min后,倒掉上清; 3) 弃掉NaOH溶液,加上适量的去离子水,混匀静置60min; 4) 弃掉上清,加上适量的0.1mol/L HCl溶液,混匀静置60min; 5) 弃掉HCl溶液,加上适量的去离子水,混匀静置60min; 6) 弃掉上清,加上洗脱液混匀,装入直径1.0cm,高......阅读全文
球虫子孢子DE52纯化的注意事项
实验概要DE-52是一个被广泛应用的球虫子孢子纤维柱纯化体系,其纯化效率高,子孢子获得量较大。本文对纯化过程中的注意事项进行了一些总结和阐述。实验步骤1. 10%子孢子消化液(pH7.6): 新鲜鸡胆汁 10ml 胰酶 0.75g将上述物质融于90mlPBS(pH7.6)中,过滤后,分装-2
柔嫩艾美耳球虫子孢子的DE52纯化方法
实验概要球虫子孢子广泛应用于球虫的体外研究和球虫的攻毒实验等实验中,它的纯化收集的效率直接影响着实验的进程。DE-52是一个被广泛应用的纤维柱纯化体系,其纯化效率高,子孢子获得量较大。实验步骤1. DE-52维素层析柱的制备 1) 称取DE-52纤维素2.0g,用去离子水浸泡24小时,使其溶胀,
Column-Method-for-Lambda-Phage-DNA-Preparation
Purpose:Mini-prep method for lambda phage DNA purification from lysates.Time required:4 hours once the lysate is in handSpecial supplies required:BioR
PPO活性测定
一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。其方法是:在含有4mlPH5.
PPO活性测定
一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。其方法是:在含有4mlPH5.
PPO活性测定
一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。其方法是:在含有4mlPH5.
层析法常用数据表及性质(1)
(一)离子交换纤维素 目前常用的离子交换纤维素列于下表 DEAE- 纤维素 形状 长度
PPO活性测定
分光光度法 实验方法原理 PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO
PPO活性测定——分光光度法
PPO活性测定可应用于:(1)研究PPO生理机制与调节。(2)了解酶的活性与植物组织褐变以及生理活动之间的关系。实验方法原理PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410
引物延伸实验
实验材料 RNA 试剂、试剂盒 T4多核苷酸激酶 dATP 醋酸钠 乙醇
引物延伸实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 T4多核苷酸激酶dATP醋酸钠乙醇EDTARNaseA苯酚氯仿仪器、耗材 恒温培养箱NAP-5柱-70°C冰箱低温离心机实验步骤 1. 依次加入下列试剂,建立用以标记引物的反应混合液(终体积10 μl)(1)2.5 μl H2O(2)1 μl 10×T4多核苷酸激
引物延伸实验
引物延伸分析用于确定位置和定量特定RNA的5'-端的数量。结束标记的寡核苷酸杂交,RNA和利用中存在的脱氧核苷酸逆转录作为底漆。因此RNA的反转录成cDNA,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。cDNA的长度反映了基地之间的标记引物和RNA的5'-端核苷酸的数量,基因产品的数量是针对性的RN
肌肉肌球蛋白和肌动蛋白纯化实验_DEAE纯化肌肉肌球蛋白
实验材料肌肉肌球蛋白试剂、试剂盒焦磷酸钠柱平衡缓冲液柱缓冲液高盐缓冲液肌球蛋白-DEAE 透析缓冲液仪器、耗材SDS-PAGE实验步骤一、准备 DEAE 柱和材料1. 准备贮存液和材料200 mmol/L 焦磷酸钠(NaPPi ),pH 7.0用 HCl 和 H3PO4 调 NaPPi 溶液的 pH
层析技术(Layeranalise-technique)(1)
离子交换层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相,以蛋白质等样品为移动相,分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素和多糖等的一项技术。 (一)原理 在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基团,当结合阳离子基团时,可换出阴离子,则称为阴离子交换剂。如二乙氨乙基(Dicthy
PPO粗酶液的纯化
实验概要本实验利用葡聚糖凝胶柱层析对PPO粗酶液进行了纯化。实验原理1. 葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量
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溶菌酶分离纯化及酶活力、蛋白浓度测定3
同时,为了监测分离纯化的效果,我们必须对相应的结果进行检测。对于酶而言,主要通过其催化特异的反应进行监测。溶菌酶对革兰氏阳性菌的细胞壁有明显的破坏作用,可利用这一特性进行溶菌酶活性的监测,以便我们区分在纯化过程中,含有溶菌酶的组分。类似的采用 DEAE- 纤维素对抗体进行精制,特别是经过初步纯化后的