肌肉肌球蛋白和肌动蛋白纯化实验_DEAE纯化肌肉肌球蛋白

实验材料肌肉肌球蛋白试剂、试剂盒焦磷酸钠柱平衡缓冲液柱缓冲液高盐缓冲液肌球蛋白-DEAE 透析缓冲液仪器、耗材SDS-PAGE实验步骤一、准备 DEAE 柱和材料1. 准备贮存液和材料200 mmol/L 焦磷酸钠(NaPPi ),pH 7.0用 HCl 和 H3PO4 调 NaPPi 溶液的 pH 值2x 柱平衡缓冲液:40 mmol/L NaPPi,pH 7.02 mmoI/L DTT6 mmol/L NaN32. 把 DE-52 悬浮在 15 倍体积的 0.5 mol/L HCl 中,搅拌 30 分钟。3. 用 dH2O 洗 DEAE 直至 pH 超过 4.0。4. 在 15 倍体积的 0.5 mol/L NaOH 中悬浮 DEAE,搅拌 30 分钟。5. 用 dH2O 洗 DEAE 直至 pH 为 8.0。6. 重复酸和 dH2O 这两步(步骤 2 和 3 )。7. 用浓缩的(2 x ) 柱缓冲液滴定到合适的 ......阅读全文

肌肉肌球蛋白和肌动蛋白纯化实验_DEAE纯化肌肉肌球蛋白

实验材料肌肉肌球蛋白试剂、试剂盒焦磷酸钠柱平衡缓冲液柱缓冲液高盐缓冲液肌球蛋白-DEAE 透析缓冲液仪器、耗材SDS-PAGE实验步骤一、准备 DEAE 柱和材料1. 准备贮存液和材料200 mmol/L 焦磷酸钠(NaPPi ),pH 7.0用 HCl 和 H3PO4 调 NaPPi 溶液的 pH

肌肉肌球蛋白和肌动蛋白的纯化实验——肌球蛋白的纯化

实验材料冷冻肌肉试剂、试剂盒肌球蛋白抽提溶液仪器、耗材玻璃器皿实验步骤1. 准备下面的贮存液(都冷却到 4℃)。肌球蛋白抽提溶液:0.5 mol/L KCl,0.1 mol/L K2HPO4几升冷的用玻璃器皿蒸馏过的水(dH2O)4 mol/L KCl0.5 mol/L KCI0.5 mol/L C

肌肉肌球蛋白和肌动蛋白的纯化实验

肌球蛋白的纯化DEAE纯化肌肉肌球蛋白实验材料冷冻肌肉                                                          试剂、试剂盒肌球蛋白抽提溶液                                                  

肌肉肌球蛋白和肌动蛋白的纯化实验

肌球蛋白的纯化 DEAE纯化肌肉肌球蛋白             实验材料 冷冻肌肉 试

肌肉肌球蛋白和肌动蛋白的纯化实验

实验材料 冷冻肌肉试剂、试剂盒 肌球蛋白抽提溶液仪器、耗材 玻璃器皿实验步骤 1. 准备下面的贮存液(都冷却到 4℃)。肌球蛋白抽提溶液:0.5 mol/L KCl,0.1 mol/L K2HPO4几升冷的用玻璃器皿蒸馏过的水(dH2O)4 mol/L KCl0.5 mol/L KCI0.5 mol

纯化非肌肉肌球蛋白实验——非肌肉肌球蛋白的层析纯化

实验材料非肌肉肌球蛋白试剂、试剂盒匀浆缓冲液肌动蛋白聚合缓冲液凝胶过滤 羟基磷灰石缓冲液GF HT 缓冲液仪器、耗材大容量转头实验步骤高速离心和 DEAE 层析1. 用不含除了 PMSF 以外的蛋白水解抑制剂的匀浆缓冲液平衡 DEAE 纤维素,取 50 ml 装到 2.5cm x 35cm 有合适管

纯化非肌肉肌球蛋白实验

细胞匀浆 非肌肉肌球蛋白的层析纯化             实验材料 细胞 试剂、试剂盒

纯化非肌肉肌球蛋白实验

细胞匀浆非肌肉肌球蛋白的层析纯化实验材料细胞                                                          试剂、试剂盒缓冲盐溶液                                                          

纯化非肌肉肌球蛋白实验——细胞匀浆

实验材料细胞试剂、试剂盒缓冲盐溶液二异丙基氟瞬酸匀浆缓冲液仪器、耗材相差显微镜实验步骤1. 准备下面的贮液和材料。等渗的缓冲盐溶液(例如 PBS,150 mmol/L NaCl;10 mmol/L NaPO4,pH 7.2)二异丙基氟瞬酸(DIFP)1 mol/L 咪唑-HCl,pH 7.00.5

非肌肉肌动蛋白的纯化实验

实验材料非肌肉肌动蛋白试剂、试剂盒DNA 酶Ⅰ缓冲液仪器、耗材DEAE 柱实验步骤1. 准备贮存液和材料。2x DNA 酶Ⅰ缓冲液:20 mmol/L Tris-HCl,pH 8.01 mmol/L DTT0.4 mmol/L CaCI20.4 mmol/L ATP抑蛋白酶肽抑蛋白酶亮抑蛋白酶肽抑胃

非肌肉肌动蛋白的纯化实验

非肌肉肌动蛋白的纯化实验材料非肌肉肌动蛋白                                                          试剂、试剂盒DNA 酶Ⅰ缓冲液                                                        

非肌肉肌动蛋白的纯化实验

            实验材料 非肌肉肌动蛋白 试剂、试剂盒 DNA 酶Ⅰ缓冲液 仪器、耗材

制备肌动蛋白实验——从肌肉制备丙酮粉用于纯化肌动蛋白

实验材料肌球蛋白试剂、试剂盒肌球蛋白抽提溶液仪器、耗材离心机实验步骤1. 抽提肌球蛋白时得到的沉淀物用 3 倍于沉淀物体积的肌球蛋白抽提溶液抽提 10 分钟。肌球蛋白抽提溶液:0.5 mol/L KCl0.1 mol/L K2HPO42. 抽提物离心(GSA 转头,13000 r/min,17310

制备肌动蛋白实验

从肌肉制备丙酮粉用于纯化肌动蛋白 由骨骼肌丙酮粉制备肌动蛋白 将肌动蛋白纯化成纯品             实验材料 肌球蛋白

Cell:精确定位肌肉蛋白

  肌球蛋白和肌动蛋白纤维的相互作用控制着肌肉收缩及许多其他肌肉运动。另外两种蛋白,原肌球蛋白和肌钙蛋白调节肌球蛋白与肌动蛋白的结合。尽管有理论模型详细描述了这些肌肉蛋白的相互作用机制,但此前人们还没有具体观察到这一相互作用。德国马普分子生理学研究所的Stefan Raunser和Elmar

肌动蛋白的功能和位置

肌动蛋白形成的细丝(“F-肌动蛋白”或微丝)是真核细胞骨架的基本要素,能够进行非常快速的聚合和解聚动力学。在大多数细胞中,肌动蛋白丝形成更大规模的网络,这对细胞中的许多关键功能至关重要:各种类型的肌动蛋白网络(由肌动蛋白丝制成)为细胞提供机械支持,并提供通过细胞质的运输路线以帮助信号转导。肌动蛋白网

细胞肌动蛋白的功能和位置

肌动蛋白形成细丝('F-肌动蛋白'或微丝),其是真核细胞骨架的必需元件,能够经历非常快速的聚合和解聚动力学。在大多数细胞中,肌动蛋白丝形成更大规模的网络,这对于细胞中的许多关键功能是必不可少的:各种类型的肌动蛋白网络(由肌动蛋白丝制成)为细胞提供机械支持,并提供通过细胞质的运输途径以

肌动蛋白的功能和位置

肌动蛋白形成细丝('F-肌动蛋白'或微丝),其是真核细胞骨架的必需元件,能够经历非常快速的聚合和解聚动力学。在大多数细胞中,肌动蛋白丝形成更大规模的网络,这对于细胞中的许多关键功能是必不可少的:各种类型的肌动蛋白网络(由肌动蛋白丝制成)为细胞提供机械支持,并提供通过细胞质的运输途径以

肌动蛋白的功能和位置介绍

  肌动蛋白形成细丝('F-肌动蛋白'或微丝),其是真核细胞骨架的必需元件,能够经历非常快速的聚合和解聚动力学。在大多数细胞中,肌动蛋白丝形成更大规模的网络,这对于细胞中的许多关键功能是必不可少的:  各种类型的肌动蛋白网络(由肌动蛋白丝制成)为细胞提供机械支持,并提供通过细胞质的运

关于肌球蛋白的分类介绍

  肌球蛋白(myosin)是沿着肌动蛋白丝轨道运动的分子马达超大家族,最初是由Kuehne在1864年研究骨骼肌收缩时发现并命名的。在最初试图要寻找非肌肉肌球蛋白,首先发现了单头肌球蛋白,随后是传统的双头肌球蛋白。后来,将前者称为“肌球蛋白I”,后者“肌球蛋白Ⅱ”。从此之后,根据发现的时间顺序用罗

肌钙蛋白的作用

  肌钙蛋白由肌钙蛋白I、T、C三亚基构成,和原肌球蛋白一起通过调节钙离子对横纹肌动蛋白ATP酶的活性来调节肌动蛋白和肌球蛋白相互作用。当心肌损伤后,心肌肌钙蛋白复合物释放到血液中,4-6小时后,开始在血液中升高,升高的肌钙蛋白I能在血液中保持很长时间6-10天。肌钙蛋白I具有高度心肌特异性和灵敏度

肌球蛋白的性质及功能

  肌球蛋白的性质  肌球蛋白属球蛋白类,不溶于水而溶于0.6mol/ml的KCl或NaCl溶液。它具有酶活性,通过与肌动蛋白相互作用,水解ATP的末端磷酸基团,同时也能水解GTP、CTP等,将化学能转化为机械能,从而产生各种形式的运动。物理化学研究表明,肌球蛋白溶液加入ATP后,其粘度和流动双折射

《Nature》肌肉研究里程碑:首个高清粗肌丝三维组织

心房颤动、心力衰竭和中风——肥厚性心肌病可导致许多严重的健康状况,是35岁以下人群心脏性猝死的主要原因。心肌是人体的中枢引擎。当然,如果你知道一个坏了的引擎是如何制造和运作的,那么修理它就容易多了。在我们肌肉研究的开始,我们已经成功地可视化了基本肌肉构建块的结构,以及它们如何使用电子冷冻显微镜相互作

关于细胞骨架—微丝的基本信息介绍

  细胞骨架—微丝微丝(microfilament)也普遍存在于所有真核细胞中,是一个实心状的纤维,直径为4nm-7nm一般细胞中含量约占细胞内总蛋白质的1%-2%,但在活动较强的细胞中可占20%-30%。在一般细胞主要分布于细胞的表面,直接影响细胞的形状。微丝具有多种功能,在不同细胞的表现不同,在

制备肌动蛋白实验——将肌动蛋白纯化成纯品

实验材料肌动蛋白试剂、试剂盒缓冲液仪器、耗材SDS-PAGE实验步骤1. 准备 2~8 mg/ml 溶在缓冲液 A 中的常规肌动蛋白。2. 10 ml 常规的肌动蛋白上样到凝胶过滤柱(2.5cm x 50cm Sephadex G-150 柱,用缓冲液 A 平衡)。3. 肌动蛋白样品进入凝胶后,上面

CALD1基因的结构特点及作用

该基因编码一种钙调素和肌动蛋白结合蛋白,在平滑肌和非肌肉收缩的调节中起重要作用该蛋白的保守结构域具有与钙钙调素、肌动蛋白、原肌球蛋白、肌球蛋白和磷脂的结合活性。该蛋白是肌动蛋白原肌球蛋白激活的肌球蛋白mgatp酶的有效抑制剂,是钙依赖性抑制平滑肌收缩的中介因子该基因的选择性剪接导致编码不同亚型的多个

MYO10基因的结构特点和主要作用

这个基因编码肌球蛋白超家族的一个成员该蛋白代表一种非传统的肌球蛋白;不应与传统的非肌肉肌球蛋白-10(MYH10)混淆非常规肌球蛋白包含常规肌球蛋白的基本结构域,并且通过其尾部结构域与类成员进一步区分该基因作为肌动蛋白的分子马达,在减数分裂过程中参与f-肌动蛋白和微管细胞骨架的整合。

J-Phy:多重机制导致肥厚型心脏病的发生

  肥厚型心肌病会在剧烈运动中意外的发生,并且有致病的风险。根据最近发表的一项研究,研究人员认为,多达300种突变可以单独导致心脏扩大,使其易受压力。  “我们的工作表明,关于这些突变如何导致心脏扩大和疾病扩散,其中的机制并不简单。它可能是多种机制,可能取决于突变的位置发现在蛋白质或它对蛋白质的作用

DEAE纤维素柱层析纯化酶蛋白实验

离子交换层析法             实验方法原理 利用DEAE纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。 实验材料

DEAE纤维素柱层析纯化酶蛋白实验

实验方法原理 利用DEAE纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。实验材料 酶蛋白试剂、试剂盒 DEAE纤维素NaOHHCLTris-HCl缓冲液NaCl仪器、耗材 层析柱收集器磁力搅拌器搅拌子烧杯玻璃砂漏斗水泵抽滤瓶pH试纸pH计三通管止水夹吸耳球紫外比色杯尿糖试纸点滴板电导率仪实验步骤 1.