同位素法测定底物磷酸化活性方法

实验概要Ideally, one would like to be able to directly phosphorylate substrates in an intact cell. This could potentially be performed by introducing ATP analog into live or permeabilized cells. However, cells are impermeable to ATP, and the addition of labeled ATP analog to digitonin-permeabilized cells results in the hydrolysis of the analog ATP within 1 min (Chaudhary et al. 2002). ......阅读全文

磷酸化依赖的泛素降解底物研究获进展

  7月2日,中国科学院上海药物研究所研究员谭敏佳课题组和江苏海洋大学教授刘彬团队合作,在Cell Death & Differentiation上,在线发表了题为Global identification of phospho-dependent SCF substrates reveals a

同位素法测定底物磷酸化活性方法

实验概要Ideally, one would  like to be able to directly phosphorylate substrates in an intact cell.  This could potentially be performed by introducing AT

同位素法测定底物磷酸化活性方法-Phosphorylation-of-Substrates

Phosphorylation of SubstratesScott T. Eblen, N. Vinay Kumar, and Michael J. WeberDepartment of Microbiology and Cancer Center, University of Virginia

柠檬酸循环过程底物磷酸化生成ATP简介

  在琥珀酸硫激酶(succinatethiokinase)的作用下,琥珀酰-CoA的硫酯键水解,释放的自由能用于合成gtp,在细菌和高等生物可直接生成ATP,在哺乳动物中,先生成GTP,再生成ATP,此时,琥珀酰-CoA生成琥珀酸和辅酶A。

底物的定义

底物为参与生化反应的物质,可为化学元素、分子或化合物,作用可形成产物。一个生化反应的底物往往同时也是另一个化学反应的产物。

什么是底物?

底物为参与生化反应的物质,可为化学元素、分子或化合物,作用可形成产物。一个生化反应的底物往往同时也是另一个化学反应的产物。

什么是底物?

底物为参与生化反应的物质,可为化学元素、分子或化合物,经酶作用可形成产物。一个生化反应的底物往往同时也是另一个化学反应的产物。在异裂反应中,底物即为亲电试剂或亲核试剂进攻的物质特定的底物会在特定的酶作用下,合成或分解。

底物的定义

底物为参与生化反应的物质,可为化学元素、分子或化合物,作用可形成产物。一个生化反应的底物往往同时也是另一个化学反应的产物。

什么是假底物?

假底物是可以特异地结合到酶的活性中心但不被催化、阻止真底物结合的物质。

什么是自杀底物?

自杀底物是一类酶的天然底物的衍生物或类似物,在它们的结构中含有一种化学活性基团,当酶把他们作为底物结合时,其潜在的化学基团能被解开或激活,并与酶的活性部位发生共价结合,使结合物停留在某种状态,从而不能分解成产物,酶因而致“死”,此过程称为酶的自杀,这类底物称为自杀底物(suicide substra

底物溶液的配制

pH 5.0磷酸-柠檬酸缓冲液加入邻苯二胺1mg/ml,再加入30%的H2O2 (1μl/ml)溶解后即为ELISA底物液,临用前配制,避光保存。

什么是自杀底物?

自杀底物是一类酶的天然底物的衍生物或类似物,在它们的结构中含有一种化学活性基团,当酶把他们作为底物结合时,其潜在的化学基团能被解开或激活,并与酶的活性部位发生共价结合,使结合物停留在某种状态,从而不能分解成产物,酶因而致“死”,此过程称为酶的自杀,这类底物称为自杀底物(suicide substra

什么是假底物?

中文名称假底物英文名称pseudosubstrate定  义可以特异地结合到酶的活性中心但不被催化、阻止真底物结合的物质。有些酶具有假底物结构域,其中的特定序列或残基作为假底物结合到酶的活性部位,抑制酶活性,当酶与配基结合后发生构象变化,释放假底物,恢复催化功能。这是体内调节酶活性的一种重要方式。应

底物循环的概念

无效循环(futile cycle):也称之底物循环(substrate cycle)。一对催化两个途径的中间代谢物之间循环的方向相反、代谢上不可逆的反应。有时该循环通过ATP的水解导致热能的释放。例如,葡萄糖+ATP=葡萄糖-6-磷酸+ADP与葡萄糖-6-磷酸+H2O=葡萄糖+Pi反应组成的循环反

CHROMOGENIX发色底物

  CHROMOGENIX提供基于生色底物的止血和纤溶测试解决方案,用于医院,临床实验室,血库和药物测试。CHROMOGENIX产品组合包含30多种产品,包括单个发色底物以及完整的试剂盒,其中包含在自动化仪器上进行特定分析所需的所有试剂。   CHROMOGENIX发色底物   S-2222

什么是底物循环?

也称之底物循环(substrate cycle)。一对催化两个途径的中间代谢物之间循环的方向相反、代谢上不可逆的反应。有时该循环通过ATP的水解导致热能的释放。例如,葡萄糖+ATP=葡萄糖-6-磷酸+ADP与葡萄糖-6-磷酸+H2O=葡萄糖+Pi反应组成的循环反应,其净反应实际上是ATP+H2O=A

荧光底物有哪些

(一)荧光色素   许多物质都可产生荧光现象,但并非都可用作荧光色素.只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料.常用的荧光色素有:  异硫氰酸荧光素2.四乙基罗丹明  3.四甲基异硫氰酸罗丹明4.藻红蛋白(二)其他荧光物质   1.酶作用后产生荧光的物质:某

生物学术语底物

底物为参与生化反应的物质,可为化学元素、分子或化合物,作用可形成产物。一个生化反应的底物往往同时也是另一个化学反应的产物。

什么是磷酸化与去磷酸化

磷酸化,将磷酸基团加在中间代谢产物上或加在蛋白质(protein)上的过程。其中除去磷酸基团的酶称为磷酸酶。 蛋白质磷酸化可发生在许多种类的氨基酸(蛋白质的主要单位)上,其中以丝氨酸为多,接着是苏氨酸。去磷酸化:磷酸基团的除去,对许多生物起着“开/关”作用。防止质粒载体的自身连接,最常用于质粒进行单

生物学术语假底物

可以特异地结合到酶的活性中心但不被催化、阻止真底物结合的物质。有些酶具有假底物结构域,其中的特定序列或残基作为假底物结合到酶的活性部位,抑制酶活性,当酶与配基结合后发生构象变化,释放假底物,恢复催化功能。这是体内调节酶活性的一种重要方式。

HRP底物分类及其操作步骤

底物范围较广,包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。二氨基联苯胺/金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑

HRP底物归类以及操作流程

  二氨基联苯胺/金属盐   DAB是辣根过氧化物酶最比较敏感、常见的底物。它造成明显的深棕色物质,在水和醇中不融解。大部分状况下,强烈推荐在DAB中添加不一样的金属正离子。当添加金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶能够更为比较敏感。该类反映物质呈暗灰蓝色至灰黑色,且在水及醇中平稳。DAB/金

酶免疫技术酶与底物

酶结合物是酶与抗原或者抗体、半抗原在交联剂作用下联结的产物,是 ELISA 成败的关键试剂。它不仅具有抗原抗体的特异性反应,还具有酶促反应的特性,最终产生生物放大的特性。酶免疫反应中,最常用的酶是辣根过氧化物酶,HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。供氢体多为无色的还原型染

如何查看抗体是磷酸化还是非磷酸化

  磷酸化和非磷酸化的抗体主要区别有:  1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态(磷酸化)的蛋白。  2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计,是一种位点特异性的多抗,这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成(多抗):原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。  4.磷酸化抗体合成:人工合成含磷酸化位点的

酶的磷酸化与脱磷酸化的比较

磷酸化是一种常见的修饰形式。酶蛋白中带羟基的氨基酸残基Thr、Ser与Tyr可作为磷酸化修饰位点。磷酸化是由ATP提供磷酸基,并在蛋白激酶的催化下完成的。脱磷酸反应则是由磷酸酶的催化下完成的。有的酶在磷酸化修饰后活性增高,而另一些酶则在磷酸化修饰后活性反受抑制。由上可见,酶的化学修饰调节具有以下特点

磷酸化和非磷酸化的抗体什么区别

1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态(磷酸化)的蛋白。2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计,是一种位点特异性的多抗,这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成(多抗):原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。4.磷酸化抗体合成:人工合成含磷酸化位点的多肽-〉人工体外磷酸化-〉链接半抗原-〉免疫动物-

抗体磷酸化与非磷酸化的区别与关系

非磷酸化是测该蛋白的含量,不能知道其活性状态,抗体磷酸化是测该蛋白的磷酸化水平如何,侧重于了解该蛋白的一种活性状态。很多信号通路的蛋白在受到某些刺激后都是通过改变其磷酸化水平的改变而引起细胞的一系列反应,其蛋白含量并不见得会有多大的变化。首先要说明的就是检测的蛋白质在你检测的组织或者细胞中是表达的,

磷酸化和非磷酸化的抗体什么区别

  磷酸化和非磷酸化的抗体主要区别有:  1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态(磷酸化)的蛋白。  2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计,是一种位点特异性的多抗,这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成(多抗):原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。  4.磷酸化抗体合成:人工合成含磷酸化位点的

胰岛素受体底物的定义

胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS),参与胰岛素及其他细胞因子信号转导的磷酸化蛋白。IRS在被胰岛素受体磷酸化以后,如同一块“磁铁”与那些具有SH2结构域的蛋白结合,根据所结合蛋白的具体结构产生不同的效应,如激活SH2蛋白的酶活性、改变蛋白质构型并同另外的蛋

底物化学发光的用途

非放射性发光系统,用于检测固定在膜上的蛋白,其敏感性达1-5pg。用x光片可快速地获得永久的硬拷贝结果。所含独特的底物足以维持12小时以上的发光,便于反复曝光操作,免疫印迹膜经抗体脱卸处理后可供再次抗体探查使用。适用于痕量蛋白或核酸检测。