流式细胞仪标本的制备

流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细胞。活细胞免疫荧光技术是用于FCM检测的标本准备,染色后也能在荧光显微镜下进行观察,在某些实验条件下,活细胞免疫荧光染色后的特异性和敏感性要优于滴片固定的常规间接免疫荧光的结果。 (一) 原理 活细胞表面保留有较完整的抗原或受体,先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合,再用荧光标记的第二抗体结合,根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。 (二) 操作步骤 制备活性高的细胞悬液(培养细胞系、外周血单个核细胞、 胸腺细胞、脾细胞等均可用于本法) ↓ ......阅读全文

整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验

实验方法原理高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份,而保留膜的脂类成分,其结果,细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除,增加了标本的透明度,同时内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体等生物膜系统被完整地保存下来。高锰酸钾固定剂在固定标本的过程中,能形成二氧化锰,可在细胞的各种膜结构的脂类亲水端形成微细的沉淀

整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验

基本方案             实验方法原理 高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份,而保留膜的脂类成分,其结果,细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除,增加了标本的透明度,同时内质

整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验

实验方法原理 高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份,而保留膜的脂类成分,其结果,细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除,增加了标本的透明度,同时内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体等生物膜系统被完整地保存下来。高锰酸钾固定剂在固定标本的过程中,能形成二氧化锰,可在细胞的各种膜结构的脂类亲水端形成微细的沉

电子显微镜生物标本的制备及观察实验

透射电子显微镜 扫描电子显微镜             实验方法原理 电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具,它以电子束为照明源,利用电子流具有波动的性质,在电磁场的作用下,

去壁低渗法制备植物染色体标本实验

 一、实验目的:   1、掌屋植物染色体标本的去壁低渗方法   2、了解中期染色体的形态结构   二、实验原理:   植物细胞有很坚实的细胞壁,染色体很难像动物染色体那样平整地贴在载玻片上,可通过纤维素酶和果胶酶处理去掉细胞壁;用低渗溶液处理可以提高染色体的分散程度。陈瑞阳等(1979,19

应用细胞融合技术制备染色体提前凝集标本

 一、原理    两个或两个以上的同种或不同种细胞可以在诱导物的作用下融合成一个细胞。    七十年代初,由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子,它无种属特异性,所以在细胞融合和染色体技术的基础上,建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期(I期)细胞融合,从而诱导I期细胞染色质提前

去壁低渗法制备植物染色体标本实验

实验材料黑麦(Secalecereale)、大麦(Hordeumvulgare)种子或洋葱(Alliumcepa)鳞茎试剂、试剂盒对二氯苯饱和溶液甲醇冰醋酸70%酒精纤维素酶果胶酶Giemsa原液磷酸缓冲液(pH6.8~7.2)KCl仪器、耗材恒温培养箱显微镜载玻片酒精灯实验步骤1.取材:先将种子浸

应用细胞融合技术制备染色体提前凝集标本

实验概要通过细胞融合技术,初步了解染色体提前凝集标本制备原理、方法及间期细胞三种时相的提前凝集染色体特点。实验原理在自然条件下或用人工的方法(物理、化学或生物)将两个或两个以上的同种或不同种细胞融合成一个细胞的过程称为细胞融合。七十年代初,由于发现M  期细胞内有某种促进染色体凝集因子,它无种属特异

洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验

实验方法原理 有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中,细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中

病毒透射电镜病毒标本制备实验——负染色技术

实验方法原理病毒研究中用磷钨酸染色后发现在黑色背景中病毒粒子如同一个亮晶晶的「空洞」。尔后用磷钨酸对飞噬菌体染色也见到同样的现象,即将这种现象称为「负染色」。负染色是一种反衬染色,即高密度物质如重金属磷钨酸、醋酸铀等在透射电镜下形成黑色的背景反衬低密度的标本如病毒为白色透亮,从而清楚地显示出被衬物的

电子显微镜生物标本的制备及观察实验1

实验方法原理电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具,它以电子束为照明源,利用电子流具有波动的性质,在电磁场的作用下,电子改变前进轨迹,产生偏转、聚焦,因而电子束透过标本后在电磁透镜的作用下可放大成像。高速运动的电子流其波长远比光波波长短,所以电镜分辨率远比光镜高,可达0.14 nm,放大倍率可达80万

电子显微镜生物标本的制备及观察实验2

实验方法原理电子枪发射出的热电子,在加速电压作用下,形成高速电子流,经聚光镜和物镜的作用形成一极细的电子束,扫描于标本表面。入射电子与标本中的原子相互作用产生二次电子,二次电子的数量和每个电子的能量随标本表面形状及元素成分的不同而变化。二次电子被接收并经过放大,即可在荧光屏上显现出被放大的标本表面图

正常细胞常规核型的标本制备_人体染色体常规核型分析

实验材料染色体仪器、耗材显微镜玻片盖玻片滴管实验步骤一、人体染色体的观察1.  取制备较好的染色体玻片标本,先在低倍镜下观察。2.  在标本中选择一个染色体之间分散较好,互不重叠的中期分裂相,置于视野中央,然后换油镜仔细观察。3.  每个染色体都含有两条染色单体,两单体连接处为着丝粒。4.  计数时

银染核仁形成区的光镜和电镜标本制备及观察

实验原理 在细胞分裂中期核型中,人的端着丝粒染色体短臂区和在间期细胞核的核仁中有与银离子特异亲合物质,通过银染可以显示它们的致量,因此一直被人们所关注。近年来发现,虽然人的端着丝粒染色体短臂是 28S、18S、和 5.8S rRNA 基因存在部位,称核仁形成区(Nucleolar organizer

流式细胞仪的简要介绍与注意事项

一、流式细胞仪的检测范围1.流式细胞仪可以检测细胞结构,包括:细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA含量、蛋白质含量。2.流式细胞仪可以检测细胞功能,包括:细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。二、流式细胞仪的

病毒透射电镜病毒标本制备实验——免疫吸附法

实验方法原理有时由于病毒量少,用普通悬滴法在电镜下难以发现稀少散在的病毒粒子,则可用免疫吸附电镜法。主要是利用相应的病毒抗血清来吸附病毒,用本法检测病毒,快速、灵敏、特异性强,是可靠的电镜病毒诊断技术之一,也可用于病毒快速诊断。实验材料病毒试剂、试剂盒磷钨酸仪器、耗材透射电镜实验步骤将抗病毒血清分别

精液检查的标本采集与标本运送

(一)标本采集采集标本前应禁欲3~5d,采前排净尿液;将一次射出的全部精液直接排入洁净、干燥的容器内(不能用乳胶避孕套)。采集微生物培养标本须无菌操作。(二)标本运送精液采集后应立即保温送检(<1h)。温度低于20℃或高于40℃影响精子活动。(三)标本采集次数 一般应间隔1~2周检查一次,连续检查2

尿标本采集:标本容器准备

容器应符合以下条件:材料由不与尿成分发生反应的隋性一次性环保型材料制成;一般应能容纳50ml以上尿的容积;必须干燥、清洁,无污染物、无渗漏、无化学物质。

洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验_压片法

实验方法原理有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中,细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。 分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中

流式细胞仪的简要介绍与注意事项

一、流式细胞仪的检测范围1.流式细胞仪可以检测细胞结构,包括:细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白质含量。2.流式细胞仪可以检测细胞功能,包括:细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。二、流式细胞仪

流式细胞仪的简要介绍

一、流式细胞仪的检测范围1、流式细胞仪可以检测细胞结构,包括:细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白质含量。2、流式细胞仪可以检测细胞功能,包括:细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。二、流式细胞仪

检验标本采集要求之血液标本

随着检验医学的快速发展和检验方法的不断改进,检测项目和检测结果的针对性与可靠性大大加强,从而极大的丰富和满足了临床诊断与治疗评估对检验的需要,同时现代检验医学对检验标本的留取与收集也提出了更高的要求,为此提供以下标本采集的规范化要求一、            血液标本的采集:1. 需加抗凝剂的检测项

检验标本采集要求之体液标本

随着检验医学的快速发展和检验方法的不断改进,检测项目和检测结果的针对性与可靠性大大加强,从而极大的丰富和满足了临床诊断与治疗评估对检验的需要,同时现代检验医学对检验标本的留取与收集也提出了更高的要求一、尿标本:1.尿常规:核对标签,留早晨第一次尿液10-50ml,不可将粪便混入尿液,经期不宜留常规标

病毒透射电镜病毒标本制备实验——直接取材镜检法

实验材料病毒试剂、试剂盒磷钨酸仪器、耗材透射电镜实验步骤为了进行天花、水痘、疱疹等病毒的临床快速诊断,可用毛细吸管直接刺入病人皮肤疱疹内吸取少量泡液,立即滴于有膜的铜网上,稍干后即用 1%-2% 的磷钨酸溶液进行负染,待干后立即用电镜观察。于电镜下常可于短时间内发现典型的病毒颗粒。注意事项其他此方法

科学家提出野生动物粪便标本标准化制备方法

中国科学院成都生物研究所研究员戴强团队提出了一套多步骤的野生动物粪便干制标本制备方法。该方法以分步浸润和低温干燥为核心,通过固定、防霉、防虫和结构增强等处理,使样本在约7天内完成制备。近日,相关成果发表于《生态学与进化》。野生动物粪便是生态学和保护生物学中常用的非侵入式样本,可用于物种识别、种群监测

临床物理检查方法介绍流式细胞DNA分析介绍

流式细胞DNA分析介绍: 流式细胞DNA分析是可以研究间期细胞,并不受细胞增殖状态的影响,对检测胸腔积液中的恶性细胞的有重要意义的一种检查方法。  流式细胞仪的检测范围:  (1) 流式细胞仪可以检测细胞结构,包括:细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白

动物染色体标本的制备_秋水仙素阻断细胞分裂法

实验材料蟾蜍试剂、试剂盒秋水仙素 生理盐水 甲醇 冰醋酸 低渗液 PH6.8 磷酸缓冲液 Giemsa 染色液仪器、耗材显微镜 培养皿 手术剪 镊子 冷冻载片 滴管实验用品器具:显微镜、培养皿、手术剪、镊子、冷冻载片、滴管试剂:秋水仙素、生理盐水、甲醇、冰醋酸、低渗液、PH6.8 磷酸缓冲液、Gie

植物标本的采集和制作实验——其他标本的制作

实验材料植物材料试剂、试剂盒防腐剂仪器、耗材标本盒实验步骤有些不宜制作或腊叶标本上台纸的植物种类或器官,可以按以下方法制或标本:1 常绿、针叶带球果的标本,如油松,可待其干燥后托以棉花放入标本盒内。地衣、苔鲜或过小的标本,也可采用同样方法剖成标本。2 不宜压制的果实、花及含水分高的枝叶或地下部分(如

流式细胞仪的使用(个人体会)

相关专题实验室的CT-流式细胞仪流式细胞仪(flow cytometry,FCM)是集激光技术、电子技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光 技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器,具有灵敏度高、重复性好、特异性强、方法灵活、分析速度快等优点。我院自2000~2002年用美国BD公司生产的FA

流式细胞仪的应用体会

流式细胞仪(flow cytometry,FCM)是集激光技术、电子技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器,具有灵敏度高、重复性好、特异性强、方法灵活、分析速度快等优点。我院自2000~2002年用美国BD公司生产的FACSC-ALIBUR流式细胞仪,结