流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器，已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断，对淋巴细胞群和亚群进行精确分类，还能分离纯化某一群或亚群细胞。活细胞免疫荧光技术是用于FCM检测的标本准备，染色后也能在荧光显微镜下进行观察，在某些实验条件下，活细胞免疫荧光染色后的特异性和敏感性要优于滴片固定的常规间接免疫荧光的结果。 (一) 原理 活细胞表面保留有较完整的抗原或受体，先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合，再用荧光标记的第二抗体结合，根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。 (二) 操作步骤 制备活性高的细胞悬液(培养细胞系、外周血单个核细胞、 胸腺细胞、脾细胞等均可用于本法) ↓ ......阅读全文
姊妹染色单体互换标本制备与分析实验
基本方案 实验方法原理 5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU）是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有BrdU的培养液中
姊妹染色单体互换标本制备与分析实验
姐妹染色单体是由一个着丝点连着的并行的两条染色单体，是在细胞分裂的间期由同一条染色体经复制后形成的，在细胞分裂的间期、前期、中期成对存在，其大小、形态、结构及来源完全相同。实验方法原理5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU）是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有
姊妹染色单体互换标本制备与分析实验
基本方案 实验方法原理 5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU）是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有BrdU的培养液中
制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节
1，接种环需以无菌操作，载玻片要洁净无油迹，滴生理盐水和取菌不宜过多，涂片要涂抹均匀，不宜过厚；2，干燥是室温干燥；3，热固定温度不宜过高，以玻片背面不烫手为宜，否则会改变甚至破坏细胞形态；4，染色时滴加染液覆盖上菌体薄膜即可；5，染色过程中，不可使染液干涸。
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I，其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁，因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活性。实验材料 HL-60细胞HeLa细胞试剂、试剂盒 Carnoy固定液HCl甲酸AgNO3蛋白胶硫代硫酸钠戊二醛乙醇丙酮醋酸铀柠檬酸铅染液仪器、耗材
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I，其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁，因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
近年来发现，虽然人的端着丝粒染色体短臂是28S、18S、和5.8S rRNA基因存在部位，称核仁形成区，但银染的物质不是rDNA和rRNA，而是与活性的rDNA转录有关的一类酸性蛋白质，容易将Ag离子还原为Ag的颗粒，从而在核仁形成区镀上银、呈棕黑色，称为银染核仁形成区。实验方法原理生化和免疫化学研
蛙或蟾蜍坐骨神经－腓肠肌标本的制备实验
实验方法原理 蛙或蟾蜍等两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，而其离体组织生活条件易于掌握，在任氏液的浸润下，神经肌肉标本可较长时间保持生理活性，因此，在生理学实验中常用蛙或蟾蜍坐骨神经腓肠肌离体标本来观察神经肌肉的兴奋性、兴奋过程以及骨骼肌收缩特点等。实验材料 蛙仪器、耗材 蛙板、
银染核仁形成区的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 生化和免疫化学研究证明银染蛋白是RNA聚合酶I，其功能是催化rDNA转录rRNA形成核仁，因此通过这种反应能够特异显示rRNA转录的活
蛙或蟾蜍坐骨神经－腓肠肌标本的制备实验
实验方法原理蛙或蟾蜍等两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，而其离体组织生活条件易于掌握，在任氏液的浸润下，神经肌肉标本可较长时间保持生理活性，因此，在生理学实验中常用蛙或蟾蜍坐骨神经腓肠肌离体标本来观察神经肌肉的兴奋性、兴奋过程以及骨骼肌收缩特点等。实验材料蛙仪器、耗材蛙板、小玻板
病毒透射电镜病毒标本制备实验4
直接取材镜检法实验材料病毒试剂、试剂盒磷钨酸仪器、耗材透射电镜实验步骤为了进行天花、水痘、疱疹等病毒的临床快速诊断，可用毛细吸管直接刺入病人皮肤疱疹内吸取少量泡液，立即滴于有膜的铜网上，稍干后即用 1%-2% 的磷钨酸溶液进行负染，待干后立即用电镜观察。于电镜下常可于短时间内发现典型的病毒颗粒。注意
染色体CBG标本制备实验——基本方案
实验方法原理异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的，因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近，或在染色体臂上呈现“团块”，这些染色质主要由C显带技术呈现，故称为C带。CBG即C带、Ba（OH）2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA，但在C带区有很强抗性，仍保留大部分
病毒透射电镜病毒标本制备实验2
实验方法原理病毒研究中用磷钨酸染色后发现在黑色背景中病毒粒子如同一个亮晶晶的「空洞」。尔后用磷钨酸对飞噬菌体染色也见到同样的现象，即将这种现象称为「负染色」。负染色是一种反衬染色，即高密度物质如重金属磷钨酸、醋酸铀等在透射电镜下形成黑色的背景反衬低密度的标本如病毒为白色透亮，从而清楚地显示出被衬物的
病毒透射电镜病毒标本制备实验1
悬滴标本法实验方法原理病毒等微小颗粒标本可取其培养物经稀释或分离提纯后直接滴于附有支持膜的载网上用电镜观察。实验材料病毒试剂、试剂盒稀释液仪器、耗材透射电镜实验步骤悬液应尽量除去杂质如培养基残渣，细胞碎片、糖类及各种盐类的结晶等，这些杂质的存在会干扰染色及电镜观察。用该法的缺点是由于电子穿透能力很弱
病毒透射电镜病毒标本制备实验3
免疫吸附法实验方法原理有时由于病毒量少，用普通悬滴法在电镜下难以发现稀少散在的病毒粒子，则可用免疫吸附电镜法。主要是利用相应的病毒抗血清来吸附病毒，用本法检测病毒，快速、灵敏、特异性强，是可靠的电镜病毒诊断技术之一，也可用于病毒快速诊断。实验材料病毒试剂、试剂盒磷钨酸仪器、耗材透射电镜实验步骤将抗病
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备
实验概要本文介绍了人外周血染色体制备和体外培养细胞染色体标本制备的原理、操作流程及注意事项。实验原理人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下，人外周血小淋巴细胞都处在G1期（或G0期），但在体外给予一定的条件，进行培养，经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种
组织活检、内镜取材标本单细胞悬液的制备
实验材料组织试剂、试剂盒PBS仪器、耗材剪刀尼龙网实验步骤1. 取材后立即放入盛少许 PBS 液的青霉素小瓶中。2. 另取一只小烧杯，杯口用 300 目尼龙网盖住，用线绳固定好，并用 PBS 液湿润，取新鲜组织标本置尼龙网上；因标本量较少，尤其是内镜取材至少要取 3 块以上。3. 在操作前，先将剪刀
正常细胞常规核型的标本制备实验_微量全血培养
正常细胞常规核型的标本制备可应用于：（1）进行核型分析；（2）与肿瘤核型进行对比研究。实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞，在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素，破坏细胞纺锤体的形成，使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞，低渗处理，使细胞胀大，染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的
简述基因扩增技术—聚合酶链反应的标本制备
在将Taq DNA聚合酶引入基因扩增技术—聚合酶链反应反应，并使之达到自动化之后，基因扩增技术—聚合酶链反应反应已变得十分的简单了。但是PCR样品的采集及制备却并非同样简单，而且，许多PCR的失败都归因于标本的制备不当。用于PCR的标本必须经适当处理后才能使用，因为标本中的许多杂质能抑制Taq
组织活检、内镜取材标本单细胞悬液的制备
实验材料 组织试剂、试剂盒 PBS仪器、耗材 剪刀尼龙网实验步骤 1. 取材后立即放入盛少许 PBS 液的青霉素小瓶中。2. 另取一只小烧杯，杯口用 300 目尼龙网盖住，用线绳固定好，并用 PBS 液湿润，取新鲜组织标本置尼龙网上；因标本量较少，尤其是内镜取材至少要取 3 块以上。3. 在操作前，
流式细胞仪的简要介绍（质量控制、样品制备）
一、流式细胞仪 的检测范围1、流式细胞仪 可以检测细胞结构，包括：细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白质含量。2、流式细胞仪可以检测细胞功能，包括：细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原 、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。二、流式
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备1
一、 人外周血染色体制备实验原理 人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下，人外周血小淋巴细胞都处在G1期（或G0期），但在体外给予一定的条件，进行培养，经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。在培养液中加入植
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备2
⑦ 再固定：加固定液8ml，混匀，固定10min。⑧ 离心：同上，吸去上清液。⑨ 制细胞悬液：根据细胞量多少，加入适量固定液，充分混匀，制成细胞悬液。⑩ 滴片：取出预先经冰水浸泡的载玻片，用吸管吸取混匀的细胞悬液在离冰片约30cm距离进行滴片，每片约滴2～3滴细胞悬液，使细胞较好分散。一般每一培养瓶
奥林巴斯生物显微镜扫描电镜标本制备方法
奥林巴斯生物显微镜扫描电镀是用来观察样品表面的结构。二次电子象反映了样品表面的形貌。因此对扫描电镜标本的*个要求是把待观察的表面完整无损的暴露出来，固定好。 奥林巴斯生物显微镜与透射电镜一样，扫描电镜标本也是在真空中进行观察，因此必须干燥，而且干燥后样品表面不变形。这是对样品的第二个要求。生物样品含
徕卡倒置荧光显微镜电镜标本制备方法
徕卡倒置荧光显微镜的扫描电镜观察的表面一般是组织或器官的自然表面，如呼吸逻，消化道，泌尿及生殖管道的上皮表面。机体中分散细胞的自然表面以及骨胳等硬组织的自然面等。取材时，对于待观察的部分要保护好，切勿用器械触碰。如果上面粘有分泌物，粘浓或粪块等污物，必须在固定前去除，以免遮盖表面微纫结构，清除的方法
绒毛标本分裂中期染色体涂片制备实验
实验材料绒毛样本试剂、试剂盒HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液胶原蛋白酶溶液完全培养基秋水仙胺枸橼酸钠甲醛 冰乙酸仪器、耗材无菌 Watchmaker 精细镊冷试管摇床试管混合器Sorvall GLC-2B 离心设备HL-4转子和6个 15ml 离心管塑料培养皿倒置显微镜或解剖显微镜热气增湿器空
绒毛标本分裂中期染色体涂片制备实验
实验材料 绒毛样本试剂、试剂盒 HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液胶原蛋白酶溶液完全培养基秋水仙胺 枸橼酸钠甲醛 冰乙酸仪器、耗材 无菌 Watchmaker 精细镊冷试管摇床试管混合器Sorvall GLC-2B 离心设备HL-4转子和6个 15ml 离心管塑料培养皿倒置显微镜或解剖显微镜热气
临床基因扩增检验实验室标本制备区的污染防治
下述操作在该区进行:临床标本的保存,核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。要正确使用加样器。由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。可通过在本区内设立正压条件避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。为避免样本间的交叉污染,加入
整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验
实验方法原理高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份，而保留膜的脂类成分，其结果，细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除，增加了标本的透明度，同时内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体等生物膜系统被完整地保存下来。高锰酸钾固定剂在固定标本的过程中，能形成二氧化锰，可在细胞的各种膜结构的脂类亲水端形成微细的沉淀
整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份，而保留膜的脂类成分，其结果，细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除，增加了标本的透明度，同时内质