Hoechst染色方法

实验概要Hoechst可穿过细胞膜,可结合于活细胞或固定过的细胞。因此可用于活细胞标记。Hoechst染料溶于水和有机溶剂,如二甲基甲酰胺或二甲基亚砜。浓度可高达10mg/mL。水溶液可在4℃避光保存至少6个月。长期储存于≤-20 ℃。Hoechst与DNA双链中的小沟(minor groove)结合,更倾向与于富含A/T(腺嘌呤/胸腺嘧啶)的DNA链。虽然说它能与所有的核酸结合,但是富含AT的双链DNA使荧光强度显著增强。实验步骤1.贴壁细胞1) 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍,再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满。2) 刺激细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入0.5ml固定液,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。3)&n......阅读全文

尼氏染色试剂盒的染色原理

神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒,即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏

关于微生物染色的染色要点介绍

  1、微生物染色— 待检菌菌龄应为18-24小时。一般情况下,革兰氏阴性菌的染色反应较为稳定,不易受菌龄的长短影响;而革兰氏阳性菌,有的在幼龄时呈阳性,超过24小时可变为阴性。故培养物越陈旧,菌细胞衰老、死亡,则染色常为阴性,造成错判。  2、微生物染色— 涂片以匀薄为佳,切不可浓厚。过于密集的菌

培养细胞的染色实验——Feulgen染色法

实验方法原理此染色法为Feulgen早在1924年提出的一种鉴别细胞中DNA的组织化学方法。细胞中的DNA在60 ℃用1 N HCl酸解离脱氧核糖核酸,使嘌呤碱基与糖苷犍破坏,嘌呤碱脱掉,脱氧核糖的中的醛基游离;醛基能与Schiff试剂相结合,形成一种紫色的复合物。本方法中酸的离解根重要,若温度过低

简单染色法与革兰氏染色法

(一)细菌的简单染色法 1 目的 1.1 学习微生物  涂片、染色的基本技术。 1.2 掌握细菌的简单染色法。 1.3 初步认识细菌的形态特征,巩固学习油镜的使用方法和无菌操作技术。 2 原理 细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。细菌的细胞小而透明,在普通的光学显微镜下不易识

关于微生物染色的染色方法介绍

  微生物染色方法一般分为单染色法和复染色法两种。前者用一种染料使微生物染色,但不能鉴别微生物。复染色法是用两种或两种以上染料,有协助鉴别微生物的作用。故亦称鉴别染色法。常用的复染色法有革兰氏染色法和抗酸性染色法,此外还有鉴别细胞各部分结构的(如芽胞、鞭毛、细胞核等)特殊染色法。食品微生物检验中常用

荧光免疫染色和DAPI染色实验步骤

免疫染色实验方法和步骤免疫染色(immunol staining)包括免疫荧光(immunol fluorescence)、免疫组化(immunol histochemistry)、免疫细胞化学(immunol cytochemistry)等,可以参考如下步骤进行操作。 1. 样品准备(Sample

血细胞化学染色的常见染色方法介绍

  1.过氧化物酶染色(POX)  (1)原理:过氧化物酶能分解过氧化氢而释放出新生态氧,使无色联苯胺氧化成蓝紫色,后者与硝普钠结合形成蓝黑色的颗粒,沉淀于细胞质中。  (2)操作方法:将固定液滴加在新鲜骨髓或血涂片上,固定30秒,流水冲洗,晾干。将应用也滴加在血膜上,作用10~15分钟,流水冲洗。

神经组织染色实验——神经尼氏体染色

神经组织是构成神经系统的基本成分,主要由神经细胞、神经胶质细胞和神经纤维组成。神经细胞尼氏体是分布于神经细胞质内的三角形或椭圆形小块或颗粒状物质。神经元的轴突及胶质细胞由形成的膜包裹,或者神经轴突(树突)被神经膜细胞包襄,以及被小胶质包裹形成神经纤维。神经纤维进一步分为有髓神经纤维和无髄神经纤维。实

x染色体的染色体结构

研究确认了X染色体上有1098个蛋白质编码基因,有趣的是,这1098个基因中只有54个在对应的Y染色体上有相应功能的等位基因,而且Y染色体比X染色体小得多。在2003年6月完成的详细分析研究报告中指出Y染色体上仅有大约78个基因,Y染色体甚至被戏称为X染色体的“错误版本”。X染色体中大约有10%的基

Y染色体的染色体结构

Y染色体(Y chromosome)是决定生物个体性别的性染色体的一种。男性的一对性染色体是一条x染色体和一条较小的y染色体。在雄性是异质型的性决定的生物中,雄性所具有的而雌性所没有的那条性染色体叫Y染色体。由于Y染色体传男不传女的特性,因此在Y染色体上留下了基因的族谱,Y-DNA分析现在已应用于家

染色体和染色质的异同

1、形态不同染色质和染色体是同一种物质的两种形态。染色质是伸展的状态,染色体是高度螺旋的状态。伸展的染色质形态有利于在它上面的DNA储存的信息的表达,而高度螺旋化了的棒状染色体则有利于细胞分裂中遗传物质的平分。2、出现时期不同染色质出现于间期,在光镜下呈颗粒状,不均匀地分布于细胞核中,比较集中于核膜

尼氏染色试剂盒的染色原理

神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒,即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏

异染颗粒染色配制及染色方法实验

实验方法原理 用于白喉棒状杆菌染色,异染颗粒可明显地被显示出来,标本直接涂片或细菌涂片均可用改良阿伯特法染色来观察异染颗粒。实验步骤 实验试剂:甲液:甲苯胺兰:0.15g   孔雀绿:0.2g冰醋酸:    lml   95%乙醇:2ml蒸馏水:  100ml将各染料先溶于乙醇,然后加入水与冰醋酸的

鞭毛染色实验——改良-Leifson-氏染色法

实验方法原理鞭毛染色的基本原理,是在染色前先用媒染剂处理含使它沉积在鞭毛上,使鞭毛直径加粗,然后再进行染色。实验材料苏云金芽孢杆菌假单胞菌金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒Leifson 氏鞭毛染色液0.01% 美蓝水溶液仪器、耗材载玻片盖玻片凹载玻片无菌水凡士林显微镜实验步骤1. 载玻片的准备 菌种材料的

简述微生物染色的染色机制

  微生物染色的染色机制:对细菌细胞壁的详细分析,为解释革兰氏染色的机制提供了较充分的基础。多用物理机制来解释革兰氏染色现象。革兰氏染色结果的差异主要基于细菌细胞壁的构造和化学组分不同。通过初染和媒染,在细菌细胞膜或原生质体上染上了不溶于水的结晶紫与碘的大分子复合物。G+ 细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖

锥虫蓝染色剂的染色原理

正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞

什么是巴氏染色?什么是HE染色?

  (1)巴氏染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。其适用于上皮细胞及间皮组织的标本。是阴道脱落细胞检查中最常用的染色方法。该染色法不但具有显示细胞核结构清晰,分色明显,透明度好,胞浆受色鲜艳等特点,而且所染标本不易脱色,可长久保存。  (2)HE染色(又称苏木精-伊红染色),是组织学最常用的染色方

铁染色时正常血细胞的染色反应

  1)细胞外铁:观察骨髓小粒中的铁,呈弥散蓝色、颗粒状、小珠状或块状。根据骨髓小粒中铁的存在方式及量将细胞外铁分为(-)、(+)、(++)、(+++)、(++++)。  2)细胞内铁:观察100个中幼红细胞和晚幼红细胞计算出铁粒幼红细胞的百分比。铁粒幼红细胞是指胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细胞,根据

结缔组织染色实验——胶原纤维染色

结缔组织广泛分布于入体和动物体内,而疏松结缔组织在组织损伤后的修复过程中,纤维细胞可转化为活跃的成纤维细胞。成纤维细胞能形成胶原纤维、弹力纤维和网状纤维以及基质等成分。致密结缔组织的间质内含有大量纤维,排列紧密,细胞和基质比较少,主要含有弹性纤维,又称为弹性致密结缔组织。网状结缔组织由网状细胞和网状

鞭毛染色实验——硝酸银染色法

细菌的鞭毛很纤细,其直径通常为 0.01 ~0.02 μm, 所以,除了很少数能形成鞭毛束(由多根鞭毛构成)的细圈可以用相差显微镜直接观察到鞭毛束的存在外,一般细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到,而只能用电子显微镜观察。要用普通光学显微镜观察细菌的鞭毛,必须用鞭毛染色法。鞭毛染色方法很多,本实验

异染色质与常染色的区别

  常染色质易被碱性染料染成浅色,或对福尔根反应呈弱阳性。异染色质易被碱性染料染成深色,或对福尔根反应呈阳性。  异染色质着色较深,常位于细胞核的边缘和核仁周围,构成核仁相随染色质的一部分。可以分为结构性异染色质(constitutive heterochromatin)和兼性异染色质(facult

细菌染色技术(单染技术与革兰氏染色)

细菌  个体微小,普通光学显微镜下不易直接观察,故常用染色技术使细菌细胞着色。包括细菌单染技术、细菌的革兰氏染色技术、细菌的芽孢染色技术、细菌的荚膜染色技术和细菌的鞭毛染色技术 Ⅰ、细菌的单染技术 简单染色通常只用一种染色剂,使细菌整个细胞染上颜色。但看不清结构。所以只便于检查细菌的形态

超活染色染色法的方法介绍

超活染色又称体外活染。活体染色是指对生活有机体的细胞或组织某些结构能着色但又不影响细胞的生命活动和产生任何物理化学变化以致引起细胞的死亡的一种染色方法。

锥虫蓝染色剂的染色步骤

步骤:1、4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。(也可买Gibco的成品);2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。(终浓度0.04%)4、计数

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法的染色步骤

1.用Hanks液漂洗盖玻片3次;2.用甲醛钙固定液固定20min;3.用蒸馏水漂洗盖玻片3次;4.用70%乙醇将盖玻片冲洗3次;5.用苏丹红Ⅲ染色液覆盖盖片样品,染色10—30min;6.用70%乙醇漂洗盖片3次;7.用甘油明胶封片后观察;

血细胞化学染色的染色法—α醋酸萘酚酯酶染色(αNAE)的介绍

  (1)血细胞化学染色的染色法—α-醋酸萘酚酯酶染色(α-NAE)的原理:α-醋酸萘酚酯酶能将基质液中的α-醋酸萘酚水解,产生α-萘酚,再与重氮染料偶联,可形成不溶性的有色沉淀,沉淀于细胞质中。  (2)血细胞化学染色的染色法—α-醋酸萘酚酯酶染色(α-NAE)的操作方法:将甲醛生理盐水滴加在2张

革兰氏染色技巧

   何为革兰氏染色:  革兰氏染色是细菌鉴别染色方法中最常使用的,染色结果可区分革兰氏阳性菌及阴性菌,是鉴定细菌最重要的分类依据之一。  染色有4种试剂:  初染剂:结晶紫,步骤中最先使用的试剂,把细菌染成蓝紫色。  媒染剂:革兰氏碘液,可与初染剂结合,形成结晶紫及碘复合物(CV-I),加强染料颜

核酸染色实验

实验方法原理 在一般情况下,通过盐酸水解后使 DNA 残基分解碱基,然后从碳键处打断糖苷键而游离出醛基,再与无色复红液(Schiff)进行反应,形成紫红色的复合物(DNA)。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法(孚尔根染色法)。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 Schiff 试剂染色

Hoechst染色实验

Hoechst染色时无需用DAB来显色,它直接结合细胞的DNA ,经过紫外光激发后发出蓝色荧光。试剂、试剂盒Hoechst染料二甲基亚砜染料二苯亚胺甲基水杨酸仪器、耗材荧光显微镜水浴锅烘箱培养箱实验步骤1.  用水按1:500稀释1 mg/ml 的Hoechst 染液至终浓度2 μg/ml。将稀释染

FE染色介绍

实验原理  正常人骨髓中的贮存铁主要存在于骨髓小粒和幼红细胞中,骨髓中的铁在酸性环境下与亚铁氰化钾作用,形成普鲁士蓝反应,形成蓝色的亚铁氰化铁沉淀,定位于含铁的部位,从而反映骨髓中铁的储存量。化学反应过程为:  4Fe3++3K4[Fe(CN)6]→Fe4〔Fe(CN)6〕3+12K+  (含铁物质