血浆清蛋白的分离纯化与鉴定
实验概要1.掌握蛋白质的分离技术2.掌握分段盐析、凝胶层析及蛋白质醋酸纤维薄膜电泳的原理及操作方法3.掌握电泳方法检测分离效果实验原理 不同的蛋白质的分子量、溶解度、以及在一定条件下带电的情况有所不同,可以更据这些性质的差别,分离及提纯各种蛋白质。利用硫酸铵分段盐析法将血清中的清蛋白及球蛋白分离,清蛋白液再利用葡聚糖凝胶过滤法除盐,即可得到较纯的清蛋白。纯化后的清蛋白可利用醋酸纤维薄膜电泳法鉴定其纯度。 盐析:是指将中性盐(如硫酸铵)加入蛋白质溶液中,中和Pr蛋白质表面电荷及破坏水化膜,使蛋白质相互聚集在析出。分段盐析:各种蛋白质盐析时所需的盐浓度和PH不同,利用不同盐浓度下Pr溶解度不同,将蛋白质分段沉淀下来。半饱和硫酸铵沉淀血清中球蛋白(清蛋白溶解)将血清清蛋白和球蛋白初步分离。 ......阅读全文
血浆脂蛋白的定义
血桨脂蛋白:指哺乳动物血浆(尤其是人)中的脂-蛋白质复合物。 血浆脂蛋白可以把脂类(三酰甘油、磷脂、胆固醇)从一个器官运输到另一个器官。 血浆脂蛋白是根据密度来分类的:(1) 乳糜微粒(
血浆黏度(PV)的概述
血浆黏度约为全血黏度的1/8~1/4,是反映血液流动性的指标之一。通常血浆黏度主要依其高分子化合物的变化,诸如纤维蛋白原、球蛋白、血脂和糖类等浓度增加有关。血浆黏度增加导致血流不畅,甚至阻断,可反映淤血存在。
如何制备血清和血浆
血清和血浆均是不含细胞(包括血小板)等有形成分的血液液体部分,其主要区别是血清不含凝血因子和血小板,血浆则含有凝血因子,它们的制备方法如下:1、血清的制备:获得的血液不能抗凝,盛于离心管或可以离心的器皿中,静置或置37℃环境中促其凝固,待血液凝固后,将其平衡后离心(一般为3000rpm,离心 5~1
血浆凝固酶的金黄色葡萄球菌血浆凝固酶实验
取肉汤培养物0.3mL同0.5mL凝固酶试验兔血浆于8mm×100mm试管内充分混合,置 36±1℃培养,定时观察是否有凝块形成,至少观察6 h,以内容物完全凝固,使试管倒置或 倾斜时不流动者为阳性。试验中需同时做已知阳性和阴性对照。
白细胞过滤对新鲜冰冻血浆凝血因子及血浆蛋白的影响...
白细胞过滤对新鲜冰冻血浆凝血因子及血浆蛋白的影响研究 应用白细胞过滤器制备的少白细胞血液成分在预防发热性非溶血性输血反应(NHFR),HLA同种免疫反应及各种相关疾病的感染等方面已取得一定效果。有效白细胞滤除前后对全血及红细胞悬液性能、细胞形态及细胞免疫方面的影响研究已有报道,但对血浆制品滤除前后血
白细胞过滤对新鲜冰冻血浆凝血因子及血浆蛋白的影响
作者:杨江存1 于青 1 李芒会 2 董选玲 2 宋耀军 1 任健康 2(1.陕西省人民医院输血科,2检验科,西安710068)应用白细胞过滤器制备的少白细胞血液成分在预防发热性非溶血性输血反应(NHFR),HLA同种免疫反应及各种相关疾病的感染等方面已取得一定效果。有效白细胞滤除前后对全血及红细
血浆白蛋白的检测意义
临床上肝功能检测白蛋白的意义是根据白蛋白检测结果可对某些疾病进行判断。一般情况下,白蛋白增高主要见于血液浓缩而致相对性增高,如严重脱水和休克、严重烧伤、急性出血、慢性肾上腺皮质功能减低症。白蛋白降低常见于肝硬化合并腹水及其他肝功能严重损害(如急性肝坏死、中毒性肝炎等)营养不良、慢性消耗性疾病、糖
血浆蛋白质检查
【知识点名称】急性时相反应蛋白【进阶攻略】急性时相反应蛋白分为两种:①正向急性时相反应蛋白;②负向急性时相反应蛋白。需加以区分。【知识点详情】1.急性时相反应和急性时相反应蛋白 机体在急性炎症(如感染性炎症,自身免疫性炎症等)和组织损伤(如创伤,手术,心肌梗死,恶性肿瘤等)时出现的非特异性的血浆蛋白
关于血浆蛋白的组成介绍
血液由有形成分红细胞、白细胞和血小板,以及无形的液体成分血浆(plasma)组成。血液凝固后析出淡黄色透明液体,称为血清(serum)。血清与血浆的区别在于血清中没有纤维蛋白原,但含有一些在凝血过程中生成的分解产物。 生理情况下,血液经血管在全身不断流动,转运各种物质与组织之间。血浆,组织间液
血浆环磷酸腺苷的概述
血浆环磷酸腺苷是一种小分子半抗原。环磷酸腺嘌呤核苷是”普遍存在于生物细胞和体液中的一种耐热小分子化合物,由ATP在腺苷酸环化酶及Ca2+参与下生成。cAMP和cGMP一起共同调节,控制细胞的生长和繁殖,并且和多种生理,生化代谢过程有密切关系,是细胞内的第二信使。
血浆白蛋白降低的鉴别
(1)血浆白蛋白浓度可以受饮食中蛋白质摄入量影响,在一定程度上可以作为个体营养状态的评价指标; (2)在血浆蛋白质浓度明显下降的情况下,可以影响许多配体在血循环中的存在形式,包括内源性的代谢物、激素和外源性的药物; (3)血浆的白蛋白增高较少见,在严重失水时,对监测血浓度有诊断意义; (4
血浆皮质类固醇的概述
皮质醇(cortisol)由肾上腺皮质束状带所分泌,在血液中以结合态和游离态两种形式存在。游离状态的皮质醇仅占10%左右,具有生物活性,并可从肾脏滤过;结合态者主要与糖皮质类固醇结合蛋白(CBG)相结合,少量与白蛋白结合,无生物活性,不被肝细胞破坏,也不能从肾小球滤过。皮质醇的分泌主要受垂体分泌
血浆醛固酮的临床意义
(1)由于肾上腺皮质的增生、腺瘤或癌变都可引起醛固酮分泌过多,称为原发性醛固酮增多症;充血性心力衰竭、肝硬化腹水、肾病综合征、特发型水肿、肾动脉狭窄或缺血以及失盐性肾病或肠病等多可引起血浆醛固酮增多,称为继发性醛固酮增多症。妊娠、大量出汗以及使用女性避孕药和雌激素时也可使醛固酮增高。 (2)垂
血浆置换的治疗前准备
1.行血浆置换前嘱咐患者治疗前进食,防止空腹治疗易发生低血糖,治疗前充分评估患者有无过敏史、血型、凝血酶原时间及基本生命体征。床旁备氧气及抢救药物多巴胺、地塞米松、肾上腺素等。做好安全防护,防止意外发生。 2.操作前准备:包括透析机的准备、抗凝血药的准备、血浆分离器、管路、新鲜血浆、生理盐水
血浆渗透压功能概述
血浆渗透压包括两种:由晶体物质形成的渗透压称晶体渗透压;由胶体物质(主要是白蛋白)形成的渗透压称为胶体渗透压。晶体渗透压的作用是保持细胞内外的水平衡,维持血细胞的正常形态和功能;血浆胶体渗透压的作用是维持血管内外的水平衡,保持一定的血浆量
肿瘤检测新指标血浆DNA
目前,人们对血浆中游离DNA作为诊断标准越来越感兴趣。尤其是,在肿瘤患者中的血浆中已经检测到了肿瘤相关DNA,在孕妇的血浆中发现了胚胎衍生的DNA。对血浆中这些DNA的发现在肿瘤检测以及非侵染性产前检查中具有重要意义。 香港中文大学李嘉诚健康研究所的K. C. Allen Chan使用
血浆解冻仪的原理介绍?
血浆解冻仪利用隔水膜袋“隔水解冻”,完全实现了血浆干式解冻的目的,解冻结束:“血浆外观干燥,透明、无水渍,污物,标签不会模糊、脱落”。 特制热交换系统能够达到“快速解冻”的效果 。专门设计的“摇匀系统”避免血浆内纤维蛋白凝结。“返回水设计”有利融化箱内水温恒定无热点。 仪器
什么是血浆复钙时间?
复钙时间即血浆再钙化时间,是去掉钙的血浆中重新加入钙,使内源性凝血过程重现,标本与正常对照相差大于正常对照的40%,即可认为异常,测定内源凝血系统缺陷的一种实验检查,用草酸钠抗凝的血浆,使抗凝剂与血浆中的钙离子结合而凝血过程中断,这种血浆加入适当的钙溶液后,血液的凝固过程则继续进行钙化,正常人血
血浆纤连蛋白的简介
为可溶性的二聚体,由两条肽链末端形成二硫键交联组成,整个分子呈“V”形。FN参与凝血、创伤愈合、增强吞噬细胞功能等活动。正常人血浆中纤连蛋白的浓度约为0.3mg/mL,男人和老人的水平略高,妇女在行经期及妊娠后升高,分娩时达到高峰。暴发性肝损伤者血浆纤连蛋白急剧下降,某些癌症患者血浆纤连蛋白升高
血浆渗透压的组成
包括晶体溶质颗粒(无机盐和小分子有机物)形成的晶体渗透压和胶体溶质颗粒(血浆蛋白质)形成的胶体渗透压。
什么是血浆肝素含量测定
血浆肝素含量测定是测定血液透析及抗凝治疗患者血浆中游离肝素,并动态检测抗凝治疗患者血浆中游离肝素与凝血因子的变化。血浆肝素含量的测定可以保证肝素的疗效及降低出血的危险性,且可以进行实验室监测。血浆肝素含量测定一般包括肝素辅转因子II活性测定和低分子肝素测定(LMWH)。
血浆抗凝血酶Ⅲ
抗凝血酶Ⅲ是血液抗凝系统的重要成分之一,可以对抗凝血酶和多种凝血因子的活性,生理作用是防止凝血过度、血栓形成。本试验有助于了解抗凝系统的机能状态。 [英文缩写] 抗凝血酶Ⅲ活性:AT—Ⅲ:C 抗凝血酶Ⅲ抗原:AT—Ⅲ:Ag [参考值] AT—Ⅲ:C103.2
血浆脂蛋白指的是什么?
血浆脂蛋白指哺乳动物血浆,尤其是人中的脂-蛋白质复合物。血浆脂蛋白可以把脂类(三酰甘油、磷脂、胆固醇)从一个器官运输到另一个器官。脂蛋白中脂质与蛋白质之间没有共价键结合,多数是通过脂质的非极性部分与蛋白质组分之间以疏水性相互作用而结合在一起。一般认为血浆脂蛋白都具有类似的结构,呈球状,在颗粒表面
血浆渗透压的组成
包括晶体溶质颗粒(无机盐和小分子有机物)形成的晶体渗透压和胶体溶质颗粒(血浆蛋白质)形成的胶体渗透压。
什么是血浆复钙时间?
复钙时间即血浆再钙化时间,是去掉钙的血浆中重新加入钙,使内源性凝血过程重现,标本与正常对照相差大于正常对照的40%,即可认为异常,测定内源凝血系统缺陷的一种实验检查,用草酸钠抗凝的血浆,使抗凝剂与血浆中的钙离子结合而凝血过程中断,这种血浆加入适当的钙溶液后,血液的凝固过程则继续进行钙化,正常人血
血浆醛固酮的注意事项
(1)标本留取同血清皮质醇。但饮食要控制钠和钾,标准饮食为:钠100mmol/d,钾60-100mmol/d。 (2)服用某些药物可影响醛固酮测定结果,如口服避孕药、雌激素类、呋塞米、血管紧张素等药可使测定结果偏高;服用利舍平、脱氢皮质酮、普萘洛尔、甲基多巴及使用肝素等,可使测定结果降低。
血浆蛋白S测定的原理
(1)血浆总蛋白S测定1)原理:血浆总蛋白S(total protein S,TPS)包括游离PS(FPS)和与补体C4结合的PS(C4bp-PS)。由于二者对于抗人蛋白S抗体有相似反应,因此用免疫学方法(如火箭电泳、酶联免疫法)检测的是TPS。2)临床意义:减低见于先天性和获得性PS缺陷症,后者见
血浆凝固酶实验——试管法
浆凝固酶是一种能使含有枸橼酸钠或肝素等抗凝剂的入或兔血浆发生凝固的酶类物质。多数致病性葡萄球菌产生此酶,而非致病菌一般不产生,故测定凝固酶可作为鉴别葡萄球菌有无致病性的重要依据之一。凝固酶有二种:一种是分泌至菌体外的,称为游离凝固酶(free coagulase),其作用类似于凝血酶原物质,可被人或
血浆凝固酶的性质介绍
血浆凝固酶分子量为80449.3,等电点为8.82,耐热性强,100℃ 30min仍然保持活性,可被蛋白酶破坏。金黄色葡萄球菌血浆凝固酶有两种分布:一种分泌至菌体外的,称为游离凝固酶(free coagulase);另一种存在于菌体细胞壁上,称为结合凝固酶(bound coagulase)或凝聚
血浆凝固酶试验的原理
血浆凝固酶实验原理 病原性葡萄球菌能产生血浆凝固酶,使血浆中纤维蛋白原变为不溶性纤维蛋白,附于细菌表面,生成凝块,因而具有抗吞噬的作用。凝固酶试验对于判定该菌株是否具有致病力,很有帮助。葡萄球菌凝固酶试验被广泛地用于常规鉴定金黄色葡萄球菌与其他葡萄球菌。 葡萄球菌所产生的凝固酶有以下两种: