CalciumFluxMeasurementUsingIndo1
实验概要Measure the calcium in cytosol with indo-1.主要试剂DMSO, Imonomycin, RPMI1640, PBS实验步骤1. Dissolve the contents of 1 vial (50 μg indo-1) in 50 μl dry DMSO. This makes a 1mM solution. T and B cells can be loaded with 1 μM indo-1; granulocytes or monocytes with 1-3 μM and dendritic cells with 3-6 μM Indo-1. Cell concentration on loading should be 1-10 x 106/ml.2. Incubate cells at 37°Cfor 45-60 min in a waterbat......阅读全文
Calcium－Flux－Measurement－Using－Indo1
实验概要Measure the calcium in cytosol with indo-1.主要试剂DMSO, Imonomycin, RPMI1640, PBS实验步骤1. Dissolve the contents of 1 vial (50 μg indo-1) in 50 μl dry
钙离子荧光探针：比值型荧光探针
前面我们介绍了荧光指示剂法可以将Ca2+检测的实验与其他技术结合使用，如可以与流式细胞仪、荧光分光光度计、或者荧光显微镜进行联合检测 。紫外光型主要包括Quin-2、Indo-1、Fura-2等，数量较少，可见光型数目较多，包括Fluo-3、钙黄绿素、Rhod-2等。荧光指示剂根据测光原理和数据
LSCM常用的检测内容及其荧光探针
胞内游离钙 共聚焦激光扫描显微镜常用的有Fluo-3、Rhod-1、Indo-1、Fura-2等，前两者为单波长激光探针，利用其单波长激发特点可直接测量细胞内Ca2+动态变化，为钙定性探针；后两者为双波长激发探针，利用其双波长激发特点和比率技术，能定量细胞内i，为钙定量探针。定量细胞内[Ca2+]i
共聚焦荧光探针标记方法
（一）BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液，等份分装后，－20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS（含Ca2+、Mg2+）洗2遍。加入BCECF-AM（终浓度1～5μmol/L），37℃孵育30～60min。PBS（含Ca2+、M
钙离子荧光探针类型大盘点
钙离子在许多生理过程中起着复杂的作用。例如，细胞内钙离子在促进神经元从神经元中释放神经递质的信号转导途径中必不可少，并参与所有肌肉细胞收缩所需的机制。细胞离子浓度受被动和主动离子通道和泵的调节。离子通道和泵的故障可能导致离子浓度调节不当，从而产生不利于正常细胞功能的不利条件。钙离子浓度研究领域中常使
淋巴细胞信号转导研究中常用方法
信号转导是目前分子免疫学中研究的热点。免疫学中所涉及的信号转导主要包括淋巴细胞的信号转导以及细胞因子/细胞因子受体的信号转导，其研究手段多种多样，包括细胞生物学、分子生物学以及蛋白质化学等技术。本节将扼要介绍目前信号转导研究中常用的方法和技术。 一、磷酸化的信号转导分子的鉴定 在淋巴细胞信号
清华大学仪器共享平台－BD－LSR－II－D324流式细胞仪
仪器名称：流式细胞仪 LSR II D324仪器编号：10005303产地：美国生产厂家：BD型号：LSR II出厂日期：200908购置日期：201004所属单位：医学院>免疫所放置地点：医学楼E233固定电话：固定手机：固定email：联系人：吴小静（010-62796829,158105424
抗血栓药物引起的血小板钙流变化检测过程详解
血小板是从骨髓成熟的巨核细胞胞浆解脱落下来的小块胞质，虽然仅占骨髓有核细胞总数的0.05% ，但是它在血管损伤后的止血过程中起着重要作用。除了自然止血外，它还影响着血管中血栓的形成，进而形成血栓性疾病，如心梗和缺血性中风等。 正常生理条件下，未受伤的血管系统中血小板不发生粘附、活化和聚
全套荧光离子探的应用钙离子与锌离子
无机阳离子和阴离子浓度不成比例的稳态维持是活细胞的特征，对于大多数细胞功能而言，跨不同区室的这些离子梯度的稳态调节至关重要。以空间和时间分辨率来测量这些离子的浓度对于研究细胞的生理学已经变得至关重要。离子探针提供了一种将离子通道激活与细胞内离子浓度的后续变化测定相关的方法。用这些类
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用（五）
SNAP-tag技术在STED超高分辨率显微成像中的应用近十年中，显微成像技术得到了飞跃的发展，填补光学显微镜（~200 nm）到电子显微镜（~0.1 nm）分辨率缺口，打破光学衍射极限的超高分辨率显微镜也越来越趋于成熟化。其中，德国马普研究所的Stefan Hell教授凭借其研发的受激发射
新型碳量子点荧光探针或将问世－细胞钙离子检测迎利好
钙离子调节多种重要的细胞功能 钙是维持生物体生命活动的必需元素之一，在骨骼生长、肌肉活动、酸碱平衡、神经活动中起着不可替代的作用。 正常状态下，一位健康成年人体内平均钙含量为1500g，大约占其体重的1.5-2%。绝大部分人体钙存在于骨骼和牙齿中，剩下的部分存在于软组织和体液中。作为通用的第
多功能酶标仪中荧光检测技术介绍
1.概述 室温下，大多数分子处于基态的zui低振动能级，处于基态的分子吸收能量(光能、化学能、电能或热能)后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量，这种现象称为“发光现象”。分子发光包括荧光，磷光，化学发光，生物发光等。受到光照时发光，光照切断时发光立即消失的叫荧光，光
浅谈荧光在酶标仪上的应用以及新一代酶标检测系统...一
浅谈荧光在酶标仪上的应用以及新一代酶标检测系统（Paradigm+Tune）的优势前言我们知道目前生命科学及现代分子生物学主要集中在对核酸和蛋白质等生物大分子的分析以及进行一些细胞水平的研究。传统的分析方法是采用放射性同位素作为一种示踪剂，标记在各种生物大分子或者细胞中来研究它们之间的相互作用和变化
共聚焦激光扫描显微镜的应用及荧光探针
一、LSCM常用的检测内容及其荧光探针 LSCM检测内容和应用范围非常广泛，以下仅简单介绍LSCM常用的检测内容及其荧光探针。 1．细胞内游离钙 共聚焦激光扫描显微镜常用的有Fluo-3、Rhod-1、Indo-1、Fura-2等，前两者为单波长激光探针，利用其单波长激发特点可直接测量细胞内Ca
激光扫描共聚焦显微镜在细胞生物学中的应用
激光扫描共聚焦显微镜是近十年发展起来的医学图像分析仪器，与传统的光学显微镜相比，大大地提高了分辨率，能得到真正具有三维清晰度的原色图像。并可探测某些低对比度或弱荧光样品，通过目镜直接观察各种生物样品的弱自发荧光。能动态测量Ca2+ 、pH值，Na+、Mg2+等影响细胞代谢的各种生理指标，对细胞动力
酶标仪中的荧光检测技术
1.概述室温下，大多数分子处于基态的zui低振动能级，处于基态的分子吸收能量（光能、化学能、电能或热能）后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量，这种现象称为“发光现象”。分子发光包括荧光，磷光，化学发光，生物发光等。受到光照时发光，光照切断时发光立即消失的叫荧光，光照切断
酶标仪中的荧光检测技术
1.概述室温下，大多数分子处于基态的zui低振动能级，处于基态的分子吸收能量（光能、化学能、电能或热能）后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量，这种现象称为“发光现象”。分子发光包括荧光，磷光，化学发光，生物发光等。受到光照时发光，光照切断时发光立即消失的叫荧光，光照切断
多功能酶标仪中荧光检测技术介绍
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用。 1.概述 室温下，大多数分子处于基态的zui低振动能级，处于基态的分子吸收能量(光能、化学能、电能或热能)后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量
多功能酶标仪中荧光检测技术介绍
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用。 1.概述 室温下，大多数分子处于基态的zui低振动能级，处于基态的分子吸收能量(光能、化学能、电能或热能)后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量
多功能酶标仪中荧光检测技术介绍
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用。 1.概述 室温下，大多数分子处于基态的zui低振动能级，处于基态的分子吸收能量(光能、化学能、电能或热能)后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量
多功能酶标仪中荧光检测技术介绍
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用，如TECAN(M1000、M200等)，Thmeral(Varioskan Flash)，Bio-tek(Synergy 4等)，MD(M2、M5)都可以应用于荧光检测。
多功能酶标仪中荧光检测技术介绍
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用，如TECAN(M1000、M200等)，Thmeral(Varioskan Flash)，Bio-tek（Synergy 4等），MD（M2、M5）都可以应用于荧光检测。1.
激光扫描共焦显微镜技术及应用（二）
五、激光扫描共焦显微镜技术的应用定位、定量三维重组动态测量¨ 活细胞或组织内游离Ca2+浓度的测量¨ 活细胞内H+浓度（ pH值）的测量¨ 自由基的检测¨ 药物进入细胞的动态过程、定位分布及定量 应用：细胞膜电位的测量 荧光漂白恢复（FRAP）的测量 笼锁解笼锁的测量
流式细胞仪和流式细胞术指南篇2
核酸插入染料溴化乙锭(EtBr) 和碘化丙啶（PI）能够结合到DNA双螺旋的大沟。4,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）和Hoechst染料（有几种常用的）则结合小沟。请注意， 一些染料 (例如碘化丙啶)也会结合到RNA发卡结构形成的沟中，因此如果要做DNA定量，需要用染料和RNA