凝胶延长分析二型脂肪酸合成的方法

Gel-elongation assay for type II fatty acid synthesisSrinivas KodaliAndrew GalgociSheo Singh Dr.Jun Wang Dr., jun_wang2@merck.com, Merck Research LaboratoriesRelated Journal & Article InformationManuscript: 2006-01-00990C Journal: Nature Article Title: Platensimycin is a selective FabF inhibitor with potent antibiotic properties IntroductionType II fatty acid synthesis (FASII) is essential to ......阅读全文

凝胶迁移实验系列二实验操作方法

1.探针的标记:(1) 如下设置探针标记的反应体系:待标记探针 (1.75pmol/微升)                        2微升T4 Polynucleotide Kinase Buffer (10X)       1微升Nuclease-Free Water            

二维凝胶的定量分析实验(一)

仪器、耗材 开放源代码软件实验步骤 3.1 实验设计1. 平行设计不同凝胶之间部分蛋白质点的量变是不可控的。重复样品之间或从蛋白质样品制备到二维凝胶染色的任何步骤的生物学差异,都是这些不可控变化的原因。已经表明,批次效应(即不同系列同时运行电泳和染色的二维凝胶的变化)对二维电泳的结果影响很大,因此在

互补DNA第二链的合成方法介绍

  (1)自身引导法。合成的单链eDNA3’端能够形成一短的发夹结构,这就为第二链的合成提供了现成的引物。当第一链合成反应产物的DNA—RNA杂交链变性后利用大肠杆菌DNA聚合酶I Klenow片段或反转录酶合成eDNA第二链,最后用对单链特异性的S1核酸酶消化该环,即可进一步克隆。但自身引导合成法

关于cDNA第二链的合成方法介绍

  (1)自身引导法。合成的单链eDNA3’端能够形成一短的发夹结构,这就为第二链的合成提供了现成的引物。当第一链合成反应产物的DNA—RNA杂交链变性后利用大肠杆菌DNA聚合酶I Klenow片段或反转录酶合成eDNA第二链,最后用对单链特异性的S1核酸酶消化该环,即可进一步克隆。但自身引导合成法

关于三氧化二锰的合成方法介绍

  α-Mn₂O₃的制备  α-Mn2O3可由锰的氧化物进一步氧化或还原,或者由二价锰盐在空气中于600~800℃下加热制得。最简便的方法是将六水合硝酸锰或纯β-MnO2在空气中于650℃下加热至恒重。用六水合硝酸锰作原料时,需预先在190℃下加热制成固体物,将其粉碎后在650℃下加热即可。  γ-

关于共轭二烯烃的合成方法进展介绍

  1.以烯丙基二硫缩醛为原料  早在1988年,YangPingfan等人就报道了Ni催化的烯丙基二硫缩醛的偕二甲基化作用,该反应生成的是两到三种的产物,文献报道当R'的取代基从H到甲基到乙基,目标产物共轭二烯的产率呈上升趋势。  2.以N-烯丙基腙的衍生物为原料  2008年,Devon

简述三氧化二硼的合成方法介绍

  1、常压法  将硼酸送入加热釜内,升温,硼酸徐徐脱水。当温度升到107.5℃时变为偏硼酸(HBO2),升温到150~160℃时转变为四硼酸(H2B4O7),650℃以上则熔体产生大量泡沫,最终将温度保持在800~1000℃,灼烧脱水到物料呈红色并不再鼓泡为止。熔料相对密度为1.52。这时开启抽丝

定向合成聚酮的工程脂肪酸合酶

  肪酸合酶(Fatty acid synthases,FAS)是一种高分子量的蛋白复合物,由两个相同亚基首尾相连而成,亚基解聚则酶活丧失。每个亚基的肽链具有七个功能域(分别发挥缩合(KS)、转酰(AT)、酮基还原(KR)、脱水(DH)、烯基还原(ER)、承载(ACP)、水解(TE)7种酶活性)在F

研究发现调节脂肪酸合成的新机制

  2月7日,国际学术期刊《自然-通讯》(Nature Communications)在线发表了中国科学院上海营养与健康研究所李于研究组的最新研究成果“Post-translational regulation of lipogenesis via AMPK-dependent phosphoryl

脂肪酸合成酶系的内容简介

  脂肪酸合成酶是一个具有多种功能的酶系统,在哺乳动物中,其分子量高达272kDa。在脂肪酸合成酶中,底物和中间产物分子在各个功能结构域(可以位于同一酶分子,也可以位于不同酶分子)中传递直到完成脂肪酸的整个合成过程。  在低等生物中,脂肪酸合成酶系是一种由1分子脂酰基载体蛋白(ACP)和7种酶单体所

关于脂肪酸合成酶系的结构介绍

  脂肪酸合成酶组构的传统模型(“头对尾”模型)大部分是基于双功能试剂1,3-dibromopropanone(DBP)能够将一个脂肪酸合成酶单体上的酮脂酰合成酶结构域活性位点上的半胱氨酸(Cys161)的巯基和另一个单体上的载体蛋白结构域中的磷酸泛酰巯基乙胺辅基联接在一起的现象。  但对脂肪酸合成

关于脂肪酸合成酶系的基本介绍

  脂肪酸合成酶是一个具有多种功能的酶系统,在低等生物中,脂肪酸合成酶系是一种由1分子脂酰基载体蛋白(ACP)和7种酶单体所构成的多酶复合体;但在高等动物中,则是由一条多肽链构成的多功能酶,通常以二聚体形式存在,每个亚基都含有一ACP结构域。在脂肪酸合成酶中,底物和中间产物分子在各个功能结构域(可以

凝胶成像概述(二)

  凝胶成像一般操作步骤   1.打开凝胶成像系统开关。   2.打开电脑,系统自动打开并进入成像软件。   3.打开凝胶成像系统前面板,选择使用紫外透射光源或者白光透射光源,将相应光源安放到位。   4.将样品放置在透射光源的样品台上。   5.在成像操作界面里面选择使用Upper wh

如何选择凝胶?(二)

11.纯化------中草药有效成分 中药的化学成分极其复杂。传统中药多是煎熬后服用,有效成份多较为亲水,包括生物碱、黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸、多糖、肽和蛋白质。灵活及综合性地利用多种层析方法。如离子交换、分子筛、反相层析,更容易分离到单一活性成分。Sephadex LH-20葡聚糖凝胶同时

凝胶成像概述(二)

凝胶成像一般操作步骤1.打开凝胶成像系统开关。2.打开电脑,系统自动打开并进入成像软件。3.打开凝胶成像系统前面板,选择使用紫外透射光源或者白光透射光源,将相应光源安放到位。4.将样品放置在透射光源的样品台上。5.在成像操作界面里面选择使用Upper white光源,点击绿色(即时成像)按钮。常见问

EMSA凝胶迁移(二)

实验步骤生物素标记探针:1. 按如下顺序加入反应物,温和混匀,切勿涡漩    超纯水                                   25μl5×TdT Reaction Buffer           10μl探针(1μM)                          

关于二乙醇胺的合成方法的介绍

  由环氧乙烷与氨反应得到二乙醇胺,同时也得到一乙醇胺和三乙醇胺。将环氧乙烷;氨水送入反应器中,在反应温度30-40℃,反应压力70.9-304kPa下,进行缩合反应生成一;二;三乙醇胺混合液,在90-120℃下经脱水浓缩后,送入三个减压精馏塔进行减压蒸馏,按不同沸点截取馏分,则可得纯度达99%的一

RNAi的作用机制及siRNA的合成方法(二)

2.3 倍增阶段    siRNA在RNA依赖性RNA聚合酶(RdRP)的作用下,以mRNA为模板,siRNA为引物,扩增产生足够数量的dsRNA作为底物提供给Dicer酶,产生更多的siRNA, 可再次形成RISC,并继续降解mRNA,从而产生级联放大效应。并作用于靶mRNA。如此反复

磷酸二氢铵-用途与合成方法

性质磷酸二胺是一种广泛适用于蔬菜、水果、水稻和小麦的高效肥料。水中溶解度(g/100ml)不同温度(℃)时每100毫升水中的溶解克数:22.7g/0℃;39.5g/10℃;37.4g/20℃;46.4g/30℃;56.7g/40℃82.5g/60℃;118g/80℃;173g/100℃含量分析精确称

药物晶型的分析方法介绍

药物晶型的分析方法介绍审评五部审评十室 李志万周艺光搜集物质在结晶时由于受各种因素影响,使分子内或分子间键合方式发生改变,致使分子或原子在晶格空间排列不同,形成不同的晶体结构。同一物质具有两种或两种以上的空间排列和晶胞参数,形成多种晶型的现象称为多晶现象(polymorphism)。虽然在一

凝胶迁移实验(EMSA)之二:实验方法原理

凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通

电泳分析常用方法凝胶电泳

以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法 称为凝胶电泳。其中聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大,对一般蛋白质不起分子筛作用,但适用于分离同工酶及其亚型,

沥青分析凝胶色谱仪分类方法

沥青分析凝胶色谱仪分类方法有多种。1、按分离目的可分:实验室沥青分析凝胶色谱仪和工业沥青分析凝胶色谱仪。2、按进样自动性可分:自动进样沥青分析凝胶色谱仪和手动进样沥青分析凝胶色谱仪。3、按产地可分:国产沥青分析凝胶色谱仪和进口沥青分析凝胶色谱仪。4、按应用范围可分:专用型沥青分析凝胶色谱仪和通用型沥

延长色谱柱寿命的方法

一根色谱柱到了不可使用的时候应更换。“不可挽救”这个概念在许多色谱工作者的认识上不完全相同,有人认为只有当色谱柱的压力增高到系统不可承受的地步才考虑报废,只要压力在可接受的范围内总要设法修补,以延长色谱柱的寿命。另外也可以从分析高要求的样品改作分析低要求的样品,从分离多组分的样品改作分离单组分的样品

延长色谱柱寿命的方法

    一根色谱柱到了不可使用的时候应更换。“不可挽救”这个概念在许多色谱工作者的认识上不完全相同,有人认为只有当色谱柱的压力增高到系统不可承受的地步才考虑报废,只要压力在可接受的范围内总要设法修补,以延长色谱柱的寿命。另外也可以从分析高要求的样品改作分析低要求的样品,从分离多组分的样品改作分离单组

丙二醇脂肪酸酯的毒性

1. LD50 大鼠口服大于10g/kg(bw);2. GRAS FDA-21CFR 172.856及172.862,172.866,173.340;3. ADI 0~25g/kg(bw)(FAO/WHO,1994)。丙二醇脂肪酸酯(porpylene glycol fatty acid ester

丙二醇脂肪酸酯的用途

丙二醇脂肪酸酯丙二醇脂肪酸酯是由脂肪酸和1,2一丙二醇酯化反应而得,所得产物是单酯和双酯的混合物,再经分子蒸馏可得到丙二醇单脂肪酸酯。丙二醇脂肪酸酯具有良好的发泡性和乳化性能,它的发泡能力取决于单酯含量,单酯含量越高,性能越好。它常用作糕点和奶油蛋糕的发泡剂,也常与单双脂肪酸甘油酯配合使用,以起增效

丙二醇脂肪酸酯的介绍

丙二醇脂肪酸酯(porpylene glycol fatty acid ester)由丙二醇和脂肪酸,以碳酸钾、生石灰和对甲苯磺酸(约0.1%)为催化剂,在120~180℃下加热6~l0h进行酯化反应,反应完毕后除去催化剂即得1。丙二醇脂肪酸酯是由脂肪酸和1,2一丙二醇酯化反应而得,所得产物是单酯和