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对骨髓基质干细胞进行改造,使其在保持快速生长的同时向成骨细胞方向分化是目前国内外研究的热点。实验发现,成熟的成骨细胞可以通过细胞间的直接接触作用促进骨髓基质干细胞增殖[ 1 ] ,此外成骨细胞可产生多种生长因子促进其骨髓基质干细胞的增殖、分化[ 2 ] 。由于骨髓基质干细胞通过诱导向成骨细胞分化后,难以再与原有的成骨细胞区分开,因此,本实验将骨髓基质干细胞与成骨细胞以1∶1 的比例直接混合培养,同时将成骨细胞和骨髓基质干细胞在与混合培养细胞完全相同的条件下单独进行培养并取其平均值作为对照,以细胞计数、细胞碱性磷酸酶(ALP) 染色阳性率、细胞培养液上清中碱性磷酸酶含量、细胞形成钙结节数目为观察指标,将混合培养细胞与相应成骨细胞及骨髓基质干细胞指标的平均值进行比较,观察两者的区别。 1 材料与方法 1 .1 材料 无酚红DMEM 培养液(Hyclon 公司)、胎牛血清(杭州四季清公司)、淋巴细胞分离液......阅读全文
对骨髓基质干细胞进行改造,使其在保持快速生长的同时向成骨细胞方向分化是目前国内外研究的热点。实验发现,成熟的成骨细胞可以通过细胞间的直接接触作用促进骨髓基质干细胞增殖[ 1 ] ,此外成骨细胞可产生多种生长因子促进其骨髓基质干细胞的增殖、分化[ 2 ] 。由于骨髓基质干细胞通过诱导向成骨细胞分化后
19世纪六七十年代，Bianco等发现骨髓中含有一种能自身繁殖的间质细胞群，简称成纤维细胞集落形成单位。研究发现，这是一类广泛存在于骨髓及间叶组织中的细胞，具有多向分化潜能，学者们将此类细胞称为间充质干细胞。MSC周围的细胞和微环境精确调节间充质干细胞的动态平衡。微环境因子失调会引起间充质干细胞
骨髓间充质干细胞是存在于骨髓腔内具有很强增殖 能力及多向分化潜能的一类成体干细胞，在一定条件下其不仅可以分化为同源于中胚层的间质细胞，还可以诱导分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、上皮样细胞、 心肌细胞、肝细胞等。近年来随着组织工程技术的快速发展，骨髓间充质干细胞的体外分离、培养及其增殖特 性的相关研
材料方法 1.材料： 1.1材料来源：取自健康成人行骨髓内固定术扩髓前收集骨髓腔内骨髓。 1.2主要试剂 DMEM培养基 胎牛血清（FBS） β-甘油磷酸钠（β-GP） 维生素C 青链霉素 胰蛋白酶（1:250）-EDTA 1.3主要仪器设备 双人超净台 Farma Scientific美国 单人
准备工作（1）试管、试管架、滴管、吸管、小鼠固定架、玻璃瓶、玻璃皿、烧杯、橡皮头、剪刀、镊子、纱布、棉球、酒精灯、滴管、移液器、细胞计数器、生理盐水、PBS、双抗（青链霉素）、75%酒精、95%酒精、培养瓶（50ml，260ml）。（2）BALB/C小鼠（4~5周龄，18~22g，雌雄不限）、胎牛血
实验方法原理 采用植块培养方法时，用少量培养液孵育，使骨组织块贴附于培养瓶。骨组织块浮起后观察细胞长出情况。采用分离细胞的单层培养方法时，将松质骨切成 2~5 mm 大小，用胶原蛋白酶和胰蛋白酶消化。将混悬的细胞接种于培养瓶
实验方法原理 采用植块培养方法时，用少量培养液孵育，使骨组织块贴附于培养瓶。骨组织块浮起后观察细胞长出情况。采用分离细胞的单层培养方法时，将松质骨切成 2~5 mm 大小，用胶原蛋白酶和胰蛋白酶消化。将混悬的细胞接种于培养瓶，用 F12 培养液培养。 实验材料 骨标本
成骨细胞原代培养实验 实验方法原理 采用植块培养方法时，用少量培养液孵育，使骨组织块贴附于培养瓶。骨组织块浮起后观察细胞长出情况。采用分离细胞的单层培养方法时
近年来国内外关于干细胞的研究取得了重大的突破，而这其中最热门的研究当属间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSCs）。MSC是一类具有自我更新和多种分化潜能的成体干细胞，来源于胚胎发育早期的中胚层未成熟的胚胎结缔组织。1968年德国科学家Frieden Stei
人软骨损伤后，可用软骨组织工程进行软骨缺损修复。软骨可由间充质干细胞分化而来。因而，间充质干细胞的培养和分化具有重要作用。 间充质干细胞（MSC）可以2×10的5次方／cm2的密度接种于特定的培养液(低糖DMEM，含15％FBS，100u/L氨卡青霉素，100 mg／L链霉素，250 mg／L两