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兔成骨细胞与骨髓基质干细胞混合培养的实验研究

对骨髓基质干细胞进行改造,使其在保持快速生长的同时向成骨细胞方向分化是目前国内外研究的热点。实验发现,成熟的成骨细胞可以通过细胞间的直接接触作用促进骨髓基质干细胞增殖[ 1 ] ,此外成骨细胞可产生多种生长因子促进其骨髓基质干细胞的增殖、分化[ 2 ] 。由于骨髓基质干细胞通过诱导向成骨细胞分化后,难以再与原有的成骨细胞区分开,因此,本实验将骨髓基质干细胞与成骨细胞以1∶1 的比例直接混合培养,同时将成骨细胞和骨髓基质干细胞在与混合培养细胞完全相同的条件下单独进行培养并取其平均值作为对照,以细胞计数、细胞碱性磷酸酶(ALP) 染色阳性率、细胞培养液上清中碱性磷酸酶含量、细胞形成钙结节数目为观察指标,将混合培养细胞与相应成骨细胞及骨髓基质干细胞指标的平均值进行比较,观察两者的区别。 1 材料与方法 1 .1 材料 无酚红DMEM 培养液(Hyclon 公司)、胎牛血清(杭州四季清公司)、淋巴细胞分离液......阅读全文

兔成骨细胞与骨髓基质干细胞混合培养的实验研究

对骨髓基质干细胞进行改造,使其在保持快速生长的同时向成骨细胞方向分化是目前国内外研究的热点。实验发现,成熟的成骨细胞可以通过细胞间的直接接触作用促进骨髓基质干细胞增殖[ 1 ] ,此外成骨细胞可产生多种生长因子促进其骨髓基质干细胞的增殖、分化[ 2 ] 。由于骨髓基质干细胞通过诱导向成骨细胞分化后,

成骨细胞原代培养实验

实验方法原理采用植块培养方法时,用少量培养液孵育,使骨组织块贴附于培养瓶。骨组织块浮起后观察细胞长出情况。采用分离细胞的单层培养方法时,将松质骨切成 2~5 mm 大小,用胶原蛋白酶和胰蛋白酶消化。将混悬的细胞接种于培养瓶,用 F12 培养液培养。 实验材料骨标本试剂、试剂盒Hams F1

成骨细胞原代培养实验

成骨细胞原代培养实验             实验方法原理 采用植块培养方法时,用少量培养液孵育,使骨组织块贴附于培养瓶。

成骨细胞原代培养实验

            实验方法原理 采用植块培养方法时,用少量培养液孵育,使骨组织块贴附于培养瓶。骨组织块浮起后观察细胞长出情况。采用分离细胞的单层培养方法时,将松质骨切成 2~5 mm 大小,用胶原蛋白

大鼠乳鼠成骨细胞培养实验

酶消化法             实验方法原理 取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养

大鼠乳鼠成骨细胞培养实验

大鼠乳鼠成骨细胞培养培养可以:(1)获得大鼠乳鼠成骨细胞;(2)用于骨修复的细胞学机制研究。实验方法酶消化法实验方法原理取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快

大鼠乳鼠成骨细胞培养实验

酶消化法             实验方法原理 取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养

“喂”腺苷助多能干细胞分化为成骨细胞

  美国加州大学圣地亚哥分校研究人员开发出一种简单高效的方法,通过给人类多能干细胞“喂”腺苷,诱使其分化为成骨细胞,进而生成骨骼组织。实验表明,利用该方法生成的骨骼组织可很好地修复小鼠的颅骨缺陷,而不会发展出肿瘤或造成感染。   多能干细胞有能力变成任何类型的细胞,这一过程被称为分化。正因为多能干细

“喂”腺苷助多能干细胞分化为成骨细胞

  美国加州大学圣地亚哥分校研究人员开发出一种简单高效的方法,通过给人类多能干细胞“喂”腺苷,诱使其分化为成骨细胞,进而生成骨骼组织。实验表明,利用该方法生成的骨骼组织可很好地修复小鼠的颅骨缺陷,而不会发展出肿瘤或造成感染。   多能干细胞有能力变成任何类型的细胞,这一过程被称为分化。正因为多能干细

正常骨内成骨细胞原代培养

实验材料:1. 骨组织来源:新生或胚胎大鼠、兔、人类胚胎或手术切除之骨组织;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg/mlⅡ型胶原酶溶液;4. 培养液:RPMI 1640培养基,配制培养液