心肌细胞流式检测AV／PI个人经验
原代培养细胞，关键是消化，我一般酶液是新配的，要足量啊（又一次还剩三排的时候，一同学把酶液碰到水浴锅，害的我借得酶液，耽误了时间，而且组间数据紊乱，最后浪费细胞和染料，大家要注意保护好酶液啊），这样每次心理都有底，而且放入水浴37度30min，甚至扔到培养箱（不建议采用）升温。消化前，用温PBS轻洗细胞，一次，然后开始消化，24孔板加400ul酶液（0.25%胰酶和0.02%edta，如果你的edta不好，那么配好就用0.22或0.45um膜过滤），先镜下观察，放入培养箱10s，后再看，一般够了，不过正常组可能需要20-30s。然后我就轻拍手，帮助消化，镜下看细胞，飘起70%-80%，每孔加10%FBS培养基终止消化，轻吹打，孔四周和中间（俺的细胞就是中间多）。吸入流式管。离心1000转7min，其实要根据离心机质量来考虑，如果进口的就用这个设置，国产的启动和降速太慢，而且转速不确定。小心果断干脆快速的倒上清，加已经按1：4稀释......阅读全文
心肌细胞流式检测AV/PI个人经验
原代培养细胞，关键是消化，我一般酶液是新配的，要足量啊（又一次还剩三排的时候，一同学把酶液碰到水浴锅，害的我借得酶液，耽误了时间，而且组间数据紊乱，最后浪费细胞和染料，大家要注意保护好酶液啊），这样每次心理都有底，而且放入水浴37度30min，甚至扔到培养箱（不建议采用）升温。消化前，用温PBS轻洗
siRNA个人经验小结
在活体RNAi关键点：类似药物属性的引入，如稳定性、细胞内的传送、组织的生物可溶性进入合成的siRNA。授予siRNA类似药物的属性化学稳定性的胆固醇共聚的siRNA 显著的改善了其在体内和体外的药物属性。化学稳定性增强的方法：对正义和反义链进行部分的phosporothioate backbone
SDSPAGE的个人经验总结
前些日子做SDSPAGE，做了两天，犯了一大堆错误，写出来供大家借鉴：1。听有人说琼脂粉可以做封底胶，一试，漏了，还是用琼脂糖吧。2 AP用别人旧的，结果胶不干 3 A液，B液用旧的，不干。结论：不要用别人的，一定要自已配，别怕浪费。4 前后Tris 的PH值搞错，结果不凝5 电泳时长板接负极，反了
western－blotting的一些个人经验
个人经验,仅供参考:1.用脱脂奶粉封闭的效果不一定比用BSA差,不过我们试过几种奶粉,有一些奶粉不太适合.推荐使用的奶粉:雀巢高钙奶粉,多力精低脂奶粉.一般国产的奶粉的颗粒比较大,不太容易溶解.2.关于三名治:本人以前做时花很多时间在防止短路上,现在我做的时候根本没有剪齐,最主要的是赶气泡,这是关键
流式细胞仪检测细胞凋亡——Heochst－33342/PI双染色
基本原理 经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞，而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色，且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据
流式细胞仪检测细胞凋亡：PI单染色法
一、基本原理其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面：1、细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变
流式细胞仪检测细胞凋亡：PI单染色法
一、基本原理其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变zui具特征性，主要包括以下几个方面：1、细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生
流式细胞仪检测细胞凋亡：PI单染色法
一、基本原理其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面：1、细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变
流式细胞仪检测细胞凋亡——PI单染色法
基本原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面：1. 细胞核的改变：由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生
流式细胞仪检测细胞凋亡――PI单染色法
基本原理其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面：细胞核的改变：由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变。研究
流式细胞仪检测细胞凋亡——PI单染色法
基本原理其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面：1. 细胞核的改变：由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变
流式细胞仪检测细胞凋亡——PI单染色法
基本原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面：1. 细胞核的改变：由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生
流式细胞计PI染色死细胞
PI能够插入双链DNA中。它被活细胞排斥但能穿透正在死亡或已经死亡的细胞的细胞膜。Ⅰ、材料1、PI（e.g.,Cat #537059,Calbiochem,San Diego,CA）2、缓冲体系：1×PBS(Ca2+ and Mg2+ free,e.g.,Cat#9240,Irvine Scient
流式细胞计PI染色死细胞
PI能够插入双链DNA中。它被活细胞排斥但能穿透正在死亡或已经死亡的细胞的细胞膜。Ⅰ、材料1、PI（e.g.,Cat #537059,Calbiochem,San Diego,CA）2、缓冲体系：1×PBS(Ca2+ and Mg2+ free,e.g.,Cat#9240,Irvine Scient
流式细胞仪检测细胞凋亡方法(Annexin－V－法)
实验概要Annexin V是一种检测细胞凋亡的试剂，本实验介绍了一个用流式细胞仪检测细胞凋亡的方法(Annexin V 法)。实验原理Annexin V是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发生凋亡
流式细胞仪检测细胞凋亡实验PI单染色法
一、基本原理其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面：1、细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变
流式细胞仪检测细胞凋亡实验——PI单染色法
实验方法原理主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变，包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等进行检测。实验材料细胞试剂、试剂盒PBSPI蒸馏水乙醇仪器、耗材棕色瓶400目筛网流式细胞仪实验步骤一、收集细胞收集细胞｛数目约（1~ 5）x106个/mL｝
做血常规半年之个人经验谈（二）
事情太多了，再说就有点卖弄的味道了，还是谈谈自己对检验的看法。1，检验最重要的是要灵活。检验的基础是准，做不准，我们就没有与临床对话的资本，做得不准，谈什么都没有意义了，但是大家不要始终在一个准字上下工夫，检验的核心应该是活，灵活。这个社会什么都要活，用时髦点的语言来讲，就是不要照抄照搬，不要教条主
桡骨远端骨折手法复位小夹板固定个人经验
桡骨远端定义是腕关节近侧2-3cm以远部位发生的骨折。桡骨远端骨折是人体常见的骨折部位，约占四肢骨折的18%左右，多见于老年人。多为摔倒后手掌撑地导致。桡骨远端骨折分为克雷氏骨折（colles骨折）、史密斯骨折（smith骨折）和巴通骨折（barton骨折）。Colles骨折是骨折远端向背侧和桡侧移
做血常规半年之个人经验谈（一）
终于再一次鼓起勇气谈经验,检验版的高手总习惯潜水.作为一个后辈,在此谈自己的经验,谈自己对检验的浅薄认识,或多或少有些买弄的味道,显露出自己不谦虚的一面.好了,废话少说,买弄正式开始,先谈一下我们的工作情况:仪器是SE9500，全自动的,每天上午120个左右,最多180个,全部我一个人做,还要每天下
关于全血的保存DNA提取pcr个人经验
做了好多DNA提取保存，吃了很多亏给大家点建议吧：（有疑问可以回帖，有时间我会回答如果我知道）。 血液保存： EDTA抗凝最好，肝素也可以不过经常会影响后续试验，一般可以保存在-20和-80保存3-5年没有问题——保存时间越长似乎dna提取越少，再长时间我也没有试过，注意解冻一次大概损失20%左右（
流式细胞仪检测细胞凋亡方法(Annexin－V－法)
实验原理 Annexin V是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸(PS)由质膜内侧翻向外侧。Annexin V与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合
流式细胞仪检测细胞凋亡方法（Annexin－V－法）
实验原理Annexin V是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时早的改变之一。在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸(PS)由质膜内侧翻向外侧。Annexin V与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。由
流式细胞仪检测细胞凋亡——Heochst－33342/PI双染色法
基本原理经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞，而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色，且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据细胞
流式细胞仪检测细胞凋亡——Heochst－33342/PI双染色法
基本原理 经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞，而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色，且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据
细胞周期的流式细胞伩检测实验方法（PI，Brdu)2
B.3. COMMENTARY B.3.1 Background information The critical steps in the methodology are cell fixation, permeabilization and the concentrations of anti-
流式细胞仪检测细胞凋亡――Annexin－V/PI双染色法
基本原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Ann
细胞周期的流式细胞伩检测实验方法（PI，Brdu)1
ANALYSIS OF CELL CYCLE Miriam Capri and Daniela Barbieri Dept. Biomedical Sciences, Sect. General Pathology,Via Campi, 287, University of Modena, 4110
流式细胞仪检测细胞凋亡——Annexin－V/PI双染色法
基本原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Ann
流式细胞仪检测细胞凋亡――Heochst－33342/PI双染色法
基本原理 经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞，而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色，且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据