细胞介导的细胞毒作用(CMC)检测法:细胞的制备
CMC中效应细胞的制备1)用淋巴细胞分离液分离PBMC1.抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中,加2倍量磷酸盐(PBS)悬浮细胞。将此悬液小心加在淋巴细胞分离液上,400×g离心30分钟。2.离心后红细胞在管底,PBMC在血浆和淋巴细胞分离液的交界面。收集PBMC,用PBS洗涤细胞两次,每次离心150×g 10分钟。低速离心可以减少血小板沉淀,但细胞沉淀物较松散,去上清液时注意丢弃细胞。3.将细胞悬浮于含2%~5%人AB血清的RPMI-1640培养液中,计数细胞,用1%台盼蓝染色检测细胞活力(应>90%),再用同样培养液将细胞配成1×106~2×106/ml。 2)分离大颗粒淋巴细胞1.配制不连续Percoll梯度:取Percoll原液与10倍浓缩的PBS以9:1的比例混合,此时溶液为100% Percoll,比重是1.127,毫克分子渗透压浓度为290mOsmol/kg。将100% Percol......阅读全文
细胞毒性T淋巴细胞的诱导及检测
基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意:反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源:未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源:未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培养基H
细胞活性和细胞毒性检测的实验方法
细胞数量确定1.将细胞悬浮液(100μL/孔)接种在96洞孔板中。将板在潮湿的培养箱中预孵育(例如,在37℃,5%CO2下)。2.向板的每个孔中加入10μLCCK8溶液。注意不要在孔洞中引入气泡,因为它们会干扰O.D.读数。3.将培养板在培养箱中孵育1-4小时。4.使用酶标仪测量450 nm处的吸光
简述细胞毒t淋巴细胞(ctl)的抗毒作用
虽然nk细胞和活化的巨噬细胞有杀伤靶细胞的作用,但破坏病毒感染的靶细胞主要靠ctl,ctl由cd+8的和cd+4的杀伤细胞组成.cd+8的淋巴细胞约占成熟t淋巴细胞的30%,包括大多数ctl和抑制性t细胞(ts).当病毒抗原与宿主细胞mhc-1类抗原一起提呈给cd+8的ctl时才能增殖为活化的杀
细胞毒性药物的细胞毒性药物分类
①生物碱类:紫杉醇、长春瑞宾、多西他塞、羟基喜树碱。②代谢类:吉西他宾、阿糖胞苷、替加氟、甲氨蝶呤。③抗生素类:表柔比星、吡柔比星、伊达比星、丝裂霉素、米托蒽醌。④烷化剂类:异环磷酰胺、达卡巴嗪。⑤铂剂类:顺铂、奥沙利铂。
细胞毒性的介绍
细胞毒性是由细胞或化学物质引起的单纯细胞杀伤事件,不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。有时需要进行特定物质细胞毒性的检测,比如药物筛选。 细胞毒性检测主要是根据细胞膜通透性发生改变来进行的检测,常用以下几种方法: MTT、XTT法:利用线粒体内部酶的活性,可以将特定的四唑盐类进行转化,然后通过
细胞毒的定义
是免疫中T淋巴细胞杀灭靶细胞的一种方式。发挥细胞毒作用的是一类细胞毒T细胞(CTL),这类细胞具有高度的特异性,只杀伤表面带有特异抗原和相应组织相融性抗原复合体(MHC)的瘤细胞(主要是CD8阳性T细胞识别MHC-1分子)。这是因为CTL细胞表面具有特异性抗原受体,能与带有相应抗原的瘤细胞相结合。它
细胞毒性T细胞的分类特征
CTL是以克隆为单位的不均质的细胞群,根据其细胞表面标志(表面抗原和表面受体)可分为3类: 1、细胞毒或杀伤性T细胞(Tc):其表面抗原为CD3+,CD4+,CD8+,TCR有a和β两条多肽链组成。 2、细胞毒性T辅助细胞(CTh):其细胞表面标志为CD3+,CD4+,CD8+,TCRaβ,
什么类型的细胞具有细胞毒性?
化疗药物具有细胞毒性,一旦进入体内,能区分哪些是癌细胞和正常细胞,达到了杀癌细胞,保护正常细胞的目的。但也杀了和癌细胞很像的正常细胞,在我们身体里,有些非癌症细胞和癌症细胞一样,都是快速分裂的,例如头发上的毛囊细胞、骨髓细胞、制造白细胞、红细胞、血小板的造血细胞。所以,当我们服用这些药物后,正常的快
细胞毒性T细胞杀伤靶细胞的过程
CTL杀伤靶细胞是一个连续过程,可分为三个阶段,主要研究内容如下: 1、效应靶细胞结合:CTL是通过其膜上的受体TCR,即Ti-CD3分子与靶细胞结合,此时膜上的淋巴细胞功能相关抗原Ⅰ与靶细胞膜上的配基Ⅰ,又称细胞内粘附分子相互作用,即靶细胞与效应细胞初步接触。此时亲和力低,为非特异性的,但可
细胞毒性T细胞简介
细胞毒性T淋巴细胞(CTL),是白细胞的亚部,为一种特异T细胞,专门分泌各种细胞因子参与免疫作用。对某些病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用,与自然杀伤细胞构成机体抗病毒、抗肿瘤免疫的重要防线。 细胞毒性T淋巴细胞又称杀伤性T淋巴细胞,是机体抗肿瘤机制的重要环节,也是肿瘤免疫过继疗法主要效应细
关于γδT细胞的细胞毒性的介绍
细胞毒性是γδT细胞的主要生物学效应,也是其发挥抗肿瘤作用的主要方式。TCRγδ能够识别在肿瘤细胞内积聚的异戊烯焦磷酸(IPP)和二甲基烯丙基焦磷酸,进而激活γδT细胞。激活的γδT细胞能够通过多种途径杀伤肿瘤细胞: 1、通过凋亡诱导蛋白配体途径Fas-FasL和相关凋亡诱导配体受体诱导肿瘤
细胞因子受体介导的通路的作用机制
细胞因子受体介导的通路称为JAK-STAT信号通路,基本步骤如下。首先,细胞因子的结合改变了受体的构象并导致二聚化,使各自结合的JAK相互靠近并发生交叉磷酸化,从而提高了它们的酪氨酸激酶结构域的活性。接着,活化的JAK磷酸化受体胞内段酪氨酸残基,使其成为STAT的锚定位点。STAT通过SH2结构域与
抗体依赖性细胞毒性检查作用
抗体依赖性细胞(K细胞)毒性对癌症及免疫系统疾病的诊断有作用。异常结果:K细胞的杀伤作用在肿瘤免疫、抗病毒免疫、抗寄生虫免疫、移植排斥反应及一些自身免疫性疾病中均有重要作用,产生的免疫应答有免疫防护及免疫病理两种类型。肾移植中的排斥反应,机体自身免疫性疾病的受累器官或组织的破坏,都可能与K细胞有
Raji细胞法的作用?
Raji胞表面除了有C3b受体,还有C1q和C3d受体,没有SmIg,利用这些受体与结合补体的循环免疫复合物结合,再加入放射性核素标记的抗人IgG,可检测循环免疫复合物。
细胞毒性的原理简介
细胞增殖能力分析试剂盒 原理:正常细胞代谢旺盛,其线粒体内的琥珀酸脱氢酶,可将四唑盐类物质(如 MTT、XTT、WST-1等 )还原为紫色的结晶状的物质,沉积在细胞周围,然后通过酶标仪读取OD值,从而检测到细胞增值状态 荧光素发光法细胞生存能力检测 原理:腺苷酸激酶(AK)存在于所有真核和
细胞毒性T细胞的发育过程介绍
T细胞会在胸腺成熟,成为成熟胸腺细胞。免疫系统必须有能力辨识数百万种抗原,但身体内却只有30,000对基因,所以不可能一个抗原就花费一组基因来辨识。因此,身体内采用的势必是另一套机制。骨髓中的未成熟白血球DNA会改变,制造出特定的白血球受体,而每一种白血球则可以与不同的抗原结合。但这种方式制造出来的
细胞毒性T细胞的活化方式介绍
除了一些少数细胞和没有细胞核的细胞(如红血球),宿主的细胞表面几乎都会表现第一类MHC分子。当细胞被病毒感染时(或其他胞内病原体),细胞会降解外来蛋白质,并由第一类MHC分子将蛋白质片段表现于细胞表面,以利于CD8+ T细胞辨识,此动作称为抗原呈现。细胞毒性T细胞的活化取决于T细胞表面的分子和抗原呈
细胞毒性t细胞活化后的变化
细胞毒性t细胞活化后的变化如下。1、T细胞分化成各种效应T细胞亚群,这些效应T细胞亚群要么控制细胞内病原体,要么激活B细胞以靶向细胞外病原体。2、CD8T细胞成为裂解病毒感染或肿瘤细胞的细胞毒性T细胞。3、CD4T细胞分化成辅助T细胞的各种亚群,激活其他免疫细胞(即Th1细胞激活巨噬细胞,Th2细胞
细胞毒性T淋巴细胞的细胞试验过程
该试验测定被特定抗原攻击后抗原特异性CD8+T淋巴细胞的裂解或者引起的炎症反应。用细胞毒性T淋巴细胞(CTL)测试细胞介导免疫需要成功的抗原呈递,以及随之产生的细胞因子、细胞接触依赖的信号转导来产生记忆T淋巴细胞,这是T细胞应答的基础。CTL试验曾用于小鼠和大鼠,也用于大型动物模型,但标准的临床前评
Th细胞的细胞仪检测法
流式细胞术(flow cytometery,FCM)其基本原理是:用刺激剂PMA、ionomycin(离子霉素)体外激活淋巴细胞,用蛋白转运抑制如莫能霉素(monensin)阻止细胞因子分泌到细胞外,细胞内蛋白质转运方式被打乱,引起细胞因子向高尔基体积聚,用流式细胞仪便可测出增强细胞因子。这一技
细胞培养——细胞生长和细胞毒性
Articles posted in the Method Froum Cell Viability AssayDye exclusion method Viable Cell Counts Using Trypan Blue (Gibco) Soft Agar Assay For Colo
细胞介导免疫的概念
细胞介导免疫(英语:Cell-mediated immunity)是一种不涉及抗体的免疫应答;相对于体液免疫,可简称细胞免疫、胞介免疫。细胞介导免疫会活化巨噬细胞和自然杀伤细胞使它们能破坏胞内病原体、激活抗原特异性细胞毒性T细胞(CD8+),并释放各种细胞因子对抗原做出应答。不像体液免疫,其中没有抗
细胞介导免疫的定义
细胞免疫又称细胞介导免疫。狭义的细胞免疫仅指T细胞介导的免疫应答,即T细胞受到抗原刺激后,分化、增殖、转化为致敏T细胞,对抗原的直接杀伤作用及致敏T细胞所释放的细胞因子的协同杀伤作用。广义的细胞免疫还应该包括原始的吞噬作用以及NK细胞介导的细胞毒作用。细胞免疫是清除细胞内寄生微生物的最为有效的防御反
关于细胞毒性T淋巴细胞的细胞试验介绍
该试验测定被特定抗原攻击后抗原特异性CD8+T淋巴细胞的裂解或者引起的炎症反应。用细胞毒性T淋巴细胞(CTL)测试细胞介导免疫需要成功的抗原呈递,以及随之产生的细胞因子、细胞接触依赖的信号转导来产生记忆T淋巴细胞,这是T细胞应答的基础。CTL试验曾用于小鼠和大鼠,也用于大型动物模型,但标准的临床
细胞毒性T淋巴细胞的分类特征
CTL是以克隆为单位的不均质的细胞群,根据其细胞表面标志(表面抗原和表面受体)可分为3类:1、细胞毒或杀伤性T细胞(Tc):其表面抗原为CD3+,CD4+,CD8+,TCR有a和β两条多肽链组成。2、细胞毒性T辅助细胞(CTh):其细胞表面标志为CD3+,CD4+,CD8+,TCRaβ,它是原来的T
细胞毒性T淋巴细胞的分类特征
CTL是以克隆为单位的不均质的细胞群,根据其细胞表面标志(表面抗原和表面受体)可分为3类:1、细胞毒或杀伤性T细胞(Tc):其表面抗原为CD3+,CD4+,CD8+,TCR有a和β两条多肽链组成。2、细胞毒性T辅助细胞(CTh):其细胞表面标志为CD3+,CD4+,CD8+,TCRaβ,它是原来的T
淋巴细胞细胞毒试验的技术特点
中文名称淋巴细胞细胞毒试验英文名称lymphocytotoxicity test;LCT定 义通过细胞毒性T细胞与靶细胞直接接触而测定其特异性杀伤活性。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
具有细胞毒性的淋巴细胞有几种
三种具有细胞毒性的淋巴细胞为:细胞毒性T细胞(CTL细胞)自然杀伤细胞(NK细胞)自然杀伤T细胞(NKT细胞)
关于细胞毒性T淋巴细胞的简介
细胞毒性T淋巴细胞(CTL),是白细胞的亚部,为一种特异T细胞,专门分泌各种细胞因子参与免疫作用。对某些病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用,与自然杀伤细胞构成机体抗病毒、抗肿瘤免疫的重要防线。 细胞毒性T淋巴细胞又称杀伤性T淋巴细胞,是机体抗肿瘤机制的重要环节,也是肿瘤免疫过继疗法主要效应细
淋巴细胞介导的细胞裂解的定义
中文名称淋巴细胞介导的细胞裂解英文名称lymphocyte-mediated cell lysis定 义即细胞毒性T细胞或NK细胞可通过颗粒胞吐而分泌穿孔素和颗粒酶等效应分子,损伤靶细胞膜并使之裂解。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)