菌体／细胞裂解法汇总
一、反复冻融法：1、将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。2、至少3次以上冻溶。3、IFCC推荐法：收集细胞悬液，4℃低温离心（3000rpm，5min），弃上清，加入一定量PBS（200ul），轻轻吹打混匀，-200C 冷冻30 min，370C 解冻，如此反复3次，可形成细胞裂解液。4、用液氮冻融三四次就可以了，细胞冻住后，取出放37度水浴，溶解后震荡，再冻二、超声波处理法1、要设定好超声时间和间隙时间，一般超声时间不超过5秒，间隙时间最好大于超声时间，这些都有利于保护酶的活性。我的实验超声时间5秒、间隙时间10秒、工作次数20次。2、每个样本超声时间5秒,每个间隔5秒,粉碎5次。3、100ml菌液离心，用8ml缓冲液悬浮，加8mg溶菌酶，冰浴30min，然后超声处理。750W 40％功率。5秒超声，9秒间隔。超声至少90min。4、综合冻融和超声的......阅读全文
骨裂的简介
1.直接暴力 暴力直接作用于骨骼某一部位而致该部骨折，则往往使受伤部位发生骨折，常伴有不同程度软组织破坏。 2.间接暴力 间接暴力作用时通过纵向传导、杠杆作用或扭转作用使远处发生骨折，如从高处跌下足部着地时，躯干因重力关系急剧向前屈曲，胸腰脊柱交界处椎体受折刀力的作用而发生压缩性骨折（传导
纬裂的定义
中文名称纬裂英文名称latitudinal cleavage定 义卵裂面垂直于卵轴面的卵裂方式。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞分化与发育（二级学科）
脊椎裂的简介
脊柱裂：又叫“先天性脊柱裂”、“隐性脊柱裂”，为脊椎轴线上的先天畸形。 最常见的形式为棘突及椎板缺如，椎管向背侧开放，以骶尾部多见，颈段次之，其他部位较少。病变可涉及一个或多个椎骨，有的同时发生脊柱 弯曲和足部畸形。脊柱裂常与脊髓和脊神经发育异常或其他畸形伴发，少数伴发颅裂。 少数病人到成年
脊椎裂的病理
脊髓裂可见于隐性或显性脊柱裂病例，同属于胚胎期发生障碍所致的畸形，最多发生在腰椎和胸椎，而颈椎和骶椎少见。常有(90%以上)一来自椎体背面的纵行隔障或骨梁插向椎管背侧，将脊髓或马尾分成长度不等、左右对称或不对称、完全或不完全的两半，少数可有两个隔障。有的隔障则可为软骨或纤维组织。每个半脊髓均具有
脊椎裂的检查
1．有骨梁存在，在X线片上可发现椎体背面有相应的骨质改变。 2．脊髓造影或碘水脊髓造影。 3．CT扫描及MRI。
脊椎裂的病因
主要是在胚胎期发育发生障碍所致，关键在于椎管闭合不全。 支撑人体的脊柱是由26块脊椎骨连接组成的，脊柱中央的管腔称为椎管。该管内包有脊膜、神经及脊髓等组织，如椎管先天性发有异常，则可椎管闭合不全，称为脊柱裂。此症多见于腰骶部，偶见于胸段，裂开处多在脊柱后面，少数可位于前方，正常人有20～25%
脊椎裂的症状
主要是在胚胎期发育发生障碍所致，关键在于椎管闭合不全。 支撑人体的脊柱是由26块脊椎骨连接组成的，脊柱中央的管腔称为椎管。该管内包有脊膜、神经及脊髓等组织，如椎管先天性发有异常，则可椎管闭合不全，称为脊柱裂。此症多见于腰骶部，偶见于胸段，裂开处多在脊柱后面，少数可位于前方，正常人有20～25%
经裂的定义
中文名称经裂英文名称meridional cleavage定 义卵裂面重叠于卵的主轴的面或平行于卵轴面的卵裂方式。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞分化与发育（二级学科）
λ噬菌体的局限性λ噬菌体
实验方法原理 本实验以含原λ噬菌体和缺陷噬菌体λdg的双重溶原菌gal+作为供体,经紫外线诱导后,获取能转导半乳糖发酵基因的高频转导噬菌体裂解液,然后让这些转导噬菌体将gal+基因转移到受体菌gal-中去。实验材料 供体菌 : Escherichia coli K12 F2 gal + (带有原噬菌
COD快速消解法
快速消解法 经典的标准方法是回流2h法，人们为提高分析速度，提出各种快速分析方法。主要是提高消解反应体系中氧化剂浓度，增加硫酸酸度，提高反应温度，增加助催化剂等条件来提高反应速度的方法。 优缺点：消解体系硫酸酸度由9.0mg/l 提高到10.2mg/l，反应温度由150℃提高到165℃，消解
碱裂解法原理
碱裂解法的原理是：高PH 的溶液会使细胞壁粕类从而使得DNA和蛋白质变性。将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中，会使细胞壁破裂，染色体DNA和蛋白质变性，将质粒DNA释放到上清中。尽管碱性溶剂使碱基配对完全破坏，闭环的质粒DNA双链仍不会彼此分离，这因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。只要用碱处
化学裂解法概述
化学裂解法是DNA序列分析方法之 一。其反应的基本原理是，基于某些化学试 剂可以使DNA链在1个碱基或2个碱基处 发生专一性断裂的特性，精确的控制反应强 度，使一个断裂点仅存在于少数分子中，不 同分子在不同位点断裂，从而获得一系列大小不同的DNA片段，将这些片段经聚丙烯 酰胺凝胶电泳分离。 在
碱裂解法原理
碱裂解法的原理是：高PH 的溶液会使细胞壁粕类从而使得DNA和蛋白质变性。将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中，会使细胞壁破裂，染色体DNA和蛋白质变性，将质粒DNA释放到上清中。尽管碱性溶剂使碱基配对完全破坏，闭环的质粒DNA双链仍不会彼此分离，这因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。只要用碱处
碱裂解法原理
碱裂解法是提取质粒的最常用也最有效的方法，是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异达到分离目的。原理:高pH使质粒DNA和染色体DNA变性，同时沉淀蛋白质。再将pH值调至中性，质粒DNA较小，很容易复性成双链。而染色体DNA较大，不会复性，缠结成网状不溶物质，从而可以通过离心除去。方法:依次
碱裂解法原理
碱裂解法的原理是：高PH 的溶液会使细胞壁粕类从而使得DNA和蛋白质变性。将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中，会使细胞壁破裂，染色体DNA和蛋白质变性，将质粒DNA释放到上清中。尽管碱性溶剂使碱基配对完全破坏，闭环的质粒DNA双链仍不会彼此分离，这因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。只要用碱处
单细胞转录组重要研究文献汇总（二）
4.单细胞转录组测序在植物领域崭露头角相比动物的单细胞研究，由于植物具有细胞壁的特点，使得植物的单细胞研究相比较难，但是继2月份的拟南芥根组织单细胞转录组学研究[8]，本月在《Developmental Cell》上又发表了一篇基于拟南芥根组织的单细胞转录组学研究报道[9]。来自德国图宾根大学植
单细胞转录组重要研究文献汇总（一）
1.单细胞测序用于生殖领域研究持续火热精子生成过程是一个复杂又具有严格分化过程的生理过程，继18年10月份《Cell Research》上的成年人睾丸转录组图谱研究[1]和19年2月份《Cell Reports》上新生与成年人睾丸细胞单细胞水平鉴定分类[2]的步伐，本月在《Nature
红细胞平均指数知识点汇总
【知识点名称】红细胞平均指数【进阶攻略】红细胞平均指数在考试中出现频率极高，常以A1和A2型题出现。需熟练掌握计算公式、参考值范围及临床意义。【知识点详情】红细胞平均指数：（一）检测原理 红细胞平均指数包括：红细胞平均体积（MCV），每个红细胞平均体积的大小，以飞升（fl）为单位；红细胞平均血红蛋白
用于免疫印迹的动物培养细胞、酵母和细菌的裂
基本方案 实验方法原理 去垢剂裂解细胞法通常用于培养的动物细胞。典型的离子型去垢剂SDS(如2%SDS)能充分地裂解细胞。培养的动物细胞和细菌，如可以使用这种
Lambda噬菌体
· Lambda DNA Preparation (Stanford DNA Sequence & Technology Center)Detailed protocol for lambda DNA preparation with recipes· Isolati
慢性粒细胞白血病知识点汇总
慢性粒细胞白血病的实验诊断1.血象（1）红细胞：红细胞和血红蛋白早期正常，少数甚至稍增高，随病情发展渐呈轻、中度降低，急变期呈重度降低。（2）白细胞：白细胞数显著升高，初期一般为50×109/L，多数在（100～300）×109/L，最高可达1000×109/L。可见各阶段粒细胞，其中以中性中幼粒及
3月单细胞转录组重要研究文献汇总
1.单细胞测序用于生殖领域研究持续火热 精子生成过程是一个复杂又具有严格分化过程的生理过程，继18年10月份《Cell Research》上的成年人睾丸转录组图谱研究[1]和19年2月份《Cell Reports》上新生与成年人睾丸细胞单细胞水平鉴定分类[2]的步伐，本月在《Nature
3月单细胞转录组重要研究文献汇总
1.单细胞测序用于生殖领域研究持续火热 精子生成过程是一个复杂又具有严格分化过程的生理过程，继18年10月份《Cell Research》上的成年人睾丸转录组图谱研究[1]和19年2月份《Cell Reports》上新生与成年人睾丸细胞单细胞水平鉴定分类[2]的步伐，本月在《Nature
超声波细胞破碎仪常见问题汇总
最近先欧仪器针对网友对超声波细胞破碎仪的问题进行了一定的汇总和解答，希望能给用户在今后使用超声波细胞破碎仪带来方便。问题一：超声波细胞破碎仪结构上有啥特点？ 1、超声波细胞破碎仪可储存5个控制模式。 2、定时数字显示，输出能量由光条显示，0～100%连续可调，操作直观方便。 3、超声波细胞破碎
流式细胞术数据分析知识汇总（六）
6、Caspase-3法检测细胞凋亡7、PI法检测细胞凋亡凋亡的细胞由于DNA 裂解成许多小片段， 小分子量的 DNA 片段穿过细胞膜进入乙醇溶液中造成流失，仅剩下大片段的 DNA，最终导至凋亡细胞内 DNA 含量减少。经 DNA 荧光染料碘化丙啶(PI)染色后荧光强度明显减小，形成一个 D
流式细胞术数据分析知识汇总（一）
第一章 FCM基础知识1、基本原理：一定波长的激光束直接照射到高压驱动的液流，产生的光信号被多个接收器接受，一个是机关束直线方向上接受的前向角散射光信号。其他是在激光束垂直方向上接受的光信号，包括侧向角散射光信号和荧光信号，这些光信号被相应的接受器接受后，根据接收信号的强弱就能反应出细胞的物理和化学
流式细胞术数据分析知识汇总（三）
2、二维散点图能够显示两个独立参数与细胞相对数之间的关系，横、纵坐标分别代表两个独立参数，平面上每一个点表示具有相应坐标值的细胞。3、二维等高线图用等高线来代表细胞数，在一条等高线上的细胞数相同，不同的等高线细胞数不同。4、假三维图纵轴与横轴分别代表被测细胞的两个测量参数，Z轴为细胞数。5、三维图任
流式细胞术数据分析知识汇总（五）
第四章 FCM数据分析之增殖、周期、凋亡检测1、细胞增殖检测CellTrace细胞增殖试剂盒含有细胞膜通透性非荧光酯，可通过扩散透过细胞膜进入细胞，并与胺基反应形成荧光分子。这种无荧光的酯进入细胞后，可被细胞内酯酶转化为荧光产物。活化的琥珀亚胺酯与蛋白质中的胺基基团共价结合，使染料能够长时间保留在细
流式细胞术数据分析知识汇总（四）
总结门（Gata）设置：指在某一张选定参数的直方图上，根据该图的细胞群分布选定其中想要分析的特定细胞群，并要求该样本所有其他参数组合的直方图只体现这群细胞的分布情况。第三章 FCM数据分析之蛋白检测1、测肿瘤细胞表面PD-L1的表达水平，活细胞获取2、检测肿瘤细胞表面PD-L1的表达水平关于A/W/
流式细胞术数据分析知识汇总（二）
5、常见荧光素根据激光及滤光片选取流式抗体染料6、常见的荧光素染料组合7、举例：8、双或多参数荧光抗体的标记组合1）单染2）双或多染9、流式主要实验对照及作用：空白对照（未染色细胞）：用以区分细胞的自发荧光和特异性荧光，避免假阳性的结果。同型对照：使用与实验抗体相同种属来源、相同剂量及同种免疫球蛋白