分子生物学实验诊断技术
一、酸杂交技术检验方法建立的基本要素是特异性和灵敏度，在复杂的物体中，使无法感觉的特定物质进入人类的观察范围。核酸杂交检测技术就是利用核酸碱基严格配对的特异性，核酸标记物的灵敏度而建立的检测核酸结构与功能的方法。该法建立以来已有二十年，目前研究实验室用得多，临床实验室用得较少，除成本高外，关键是操作复杂，重复性差，仅能半定量。成本高可随经济发展而缓和，但其它缺点尚需努力克服。杂交实验的探针应具有特异性，对应不同的杂交方法靶基因（被检基因）应有一定的纯度与丰度。杂交反应的开始是碰撞，探针浓度高则速率增加，一般32P标记探记探针5-100ng/ml，非放射性探针25-1000ng/ml，原位杂交无论放射还是非放射物标记，一般都需0.1-5.0μg/ml。当探针过量时，杂交速率取决于探针长度，如一个100ng/ml20个核苷酸的合成寡核苷酸探针与1-100pg 1kb长的靶基因杂交，10分钟能达到最大杂交率。而相同条件下2kb的克隆探......阅读全文
分子生物学常用实验技术（page－2)
一、RNA 制备 模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人
梅毒分子生物学实验诊断方法的研究进展
裴瑞青综述；曾铁兵，吴移谋审校(南华大学病原生物学研究所，衡阳421001)摘要：梅毒的临床表现十分复杂，诊断主要依靠实验室检测方法。传统的梅毒实验室诊断方法暴露出诸多缺点，本文综述了国外一些分子生物学技术用于梅毒实验室诊断的方法(以基因工程重组抗原的血清学方法和聚合酶链反应)的研究进展。关键词：梅
一些分子生物学实验小技术2
5．有关融合蛋白表达载体的克隆 在构建融含蛋白表达载体时除了要注意插入片段的方向、读码框架与载体保持一致外，注意以下问题可能会减少一些不必要的麻烦，当外源片的插入载体起始密码的后面，另一个基因的前面时，注意检查插入后基因的两端是否引入了新的终止密码，特别是用到Klenow mung bean
一些分子生物学实验小技术1
1．保存菌种保存菌种或长时间放置的培养板应先划板活化菌种，挑取分隔良好的单 克隆接种于2-10 ml ＬＢ中（如菌种含质粒则应加抗生素）３７摄氏度快摇 ８小时，按0.1%-0.5% 比例转种，培养基的量不应超过锥瓶的0.25容量，以 保证足够的通气。用O.D.600 测菌密度时，读数值在0.
一些分子生物学实验小技术汇编
1．保存菌种保存菌种或长时间放置的培养板应先划板活化菌种，挑取分隔良好的单 克隆接种于2-10 ml ＬＢ中（如菌种含质粒则应加抗生素）３７摄氏度快摇 ８小时，按0.1%-0.5% 比例转种，培养基的量不应超过锥瓶的0.25容量，以 保证足够的通气。用O.D.600 测菌密度时，读数值在0.1-0.
脆性X综合征实验诊断的分子生物学检查
（1）Southern 印迹杂交：FMRl基因5’端非编码区CGG异常扩增和其上游CpG岛异常甲基化，使特异性的甲基化酶切位点无法被甲基化敏感的限制性内切酶识别。应用甲基化敏感的限制性内切酶酶切并与探针进行杂交，分析杂交后DNA片段大小，了解CGG重复次数和CpG岛甲基化程度，从而对脆性X综合征
分子生物学实验的品质选择——分子生物学实验用水
Merck Millipore 是世界*超纯水生产品牌，生产产品具有始终如一的高品质，实验重复性优异。纯水是一种生化试剂，为了给广大实验者在日常实验中提供便利，保证无意外发生，Millipore推出了分子生物学瓶装水。该瓶装水具有以下特点可以保证您的分子生物学实验顺利进行：
分子生物学实验设备
分子生物学实验设备 1) 温度控制系统：冰箱：4 ℃、-20℃、-70 ℃--样品、 试剂 和材料等的保存 2) 恒温培养箱：细菌平板的培养 3) 恒温空气摇床；菌体的培养 4) 灭菌器: 培养基、 试剂 、耗材等的灭菌 5) PCR仪：PCR 扩增、保温实验等 6) 恒温水浴及微量加热器：保证实验
沙眼衣原体实验诊断技术进展
1907年，捷克学者Halberstaeder和Prowazek发现沙眼包涵体，1956年我国学者汤飞凡等分离沙眼衣原体成功，引起了全世界对其进行广泛深入的研究［1］。沙眼衣原体(chlamydia trachomatis, Ct)与人类疾病关系密切，且目前已成为许多国家和地区常见的性传播疾
分子生物学技术都包括哪些技术
分子生物学技术： PCR、分子克隆、核酸电泳、琼脂糖凝胶电泳测序、DNA， RNA 提取、转化外源DNA、体外转录、逆转录、cDNA文库构建、原位杂交、酵母双杂交、差减杂交、扣除杂交、蓝白斑筛选、抗生素筛选 、基因工程技术大部分都是依据分子生物学原理设计出来的。 分子生物学的基本含义
分子生物学概念的发展与检验诊断—分子生物学到生物...
分子生物学概念的发展与检验诊断—分子生物学到生物... 经过了免疫学的热潮，20世纪中叶开始兴起了又一门新的学科“分子生物学”。人们怀着满腔热忱，期待这一学科能够对那些机理不清的疾病予以新的认识。众多科学家经过了半个世纪的努力，终于用分子生物学方法整理出一批单基因病等和基因相关的疾病。随着基因基础
常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍
核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性，它已成为分子生物学中最常用的基本技术，被广泛应用于基因克隆的筛选，酶切图谱的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下（适宜的温室度及离子强度等）可按碱基互补原成双链。杂交的
常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍！
常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍！ 核酸分子杂交技术 由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性，它已成为分子生物学中最常用的基本技术，被广泛应用于基因克隆的筛选，酶切图谱的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定
生物化学与分子生物学最常用的实验技术
分子细胞生物学研究所用的实验技术有哪些分子诊断学的研究范畴包括：利用遗传学、病理学、免疫学、生物化学、基因组学、蛋白质组学和分子生物学的理论和方法探讨疾病发生和发展的分子机制。为整个疾病过程寻求特异的分子诊断指标，以及利用分子生物学技术为这些分子诊断指标建立临床实用的检测方法。细胞培养技术指的是细胞
常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍！
核酸分子杂交技术 由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性，它已成为分子生物学中最常用的基本技术，被广泛应用于基因克隆的筛选，酶切图谱的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下（适宜的温室度及离子强度等）可按碱基互补原成
分子生物学技术的分类
目前，常用的分子生物学技术有如下几种[1]： PCR单链构象多态性分析 PCR-单链构象多态性分析(PCR -single strand conformation analysis,PCR -SSCP) 是近年来在基因突变检测中运用最广泛的方法之一。PCR -SSCP 技术凭借突变可引起单链
分子生物学技术的分类
目前，常用的分子生物学技术有如下几种 ： PCR- 单链构象多态性分析(PCR- single strand conformation analysis,PCR- SSCP) 是近年来在基因突变检测中运用最广泛的方法之一。PCR- SSCP 技术凭借突变可引起单链DNA三级构象改变,通过观察单链DN
分子生物学技术的应用
分子生物学技术：可应用于遗传性疾病的研究和病原体的检测及肿瘤的病因学、发病学、诊断和治疗等方面的研究提高到了基因分子水平。 生物学定义：生物学是研究生命现象和生物活动规律的科学。 据研究对象分为动物学、植物学、微生物学、古生物学等；依研究内容，分为分类学、解剖学、生理学、细胞学、分子生物学、
基因诊断的分子生物学基础（一）
基因诊断操作的对象为基因或其片段。基因是遗传学上的一个概念，是在染色体上占有一定的位置，表现一定功能的基本单位。基因的物质基础是脱氧核糖核酸（DNA）（有些病毒的基因是核糖核酸，RNA）。原核细胞（如细菌和病毒）的基因单位较小，其排布一般是连续的。真核细胞的基因一般较大，其排布是不连续的，它被称为插
基因诊断的分子生物学基础（二）
三、RNA分子结构 （一）RNA类型 细胞内含有三类主要的RNA，即核蛋白体RNA（Ribosomal RNA， rRNA）、转运RNA（Transfer RNA，tRNA）及信使（Messenger RNA，mRNA）。 1．rRNA。是核蛋白体的组成部分，含量最多，约占细胞内全部RNA
结核病实验室诊断技术
1 结核病实验室检测方法1. 1 病原学检测 1. 1. 1 痰涂片镜检 是确诊的依据, 也是发现结核病最经典、最有效的手段( 尤其是对肺结核) 。优点是操作简单, 快速。但此法受限制较多, 比如: 标本采集时间, 标本质量好坏, 是否停抗结核药都直接影响结核菌阳性结果, 对于含
常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍（二）
核酸原位杂交用特定标记的已知顺序核酸作为探针与细胞级或组织切片中核酸进行复性杂交并对其实行检测的方法，称为核酸原位杂交（nucleic acid hybridization in situ）。用来检测DNA在细胞核或染色休上的分布，与细胞内RNA进行杂交以研究该组织细胞中特定基因表达水闰；还
常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍（一）
核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性，它已成为分子生物学中最常用的基本技术，被广泛应用于基因克隆的筛选，酶切图谱的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下（适宜的温室度及离子强度等）可按碱基互补原成双链。杂交的
31项与免疫学有关的分子生物学实验技术（二）
十二、大肠杆菌感受态细胞（E.coli DH5α）制备E.coli DH5α制备主要操作步骤：1）挑取受体菌（DH5或DH10B）的单菌落于LB培养基中37℃摇床培养过夜（约16小时）；2）取1ml过夜培养物转接于100ml LB培养基中，在37℃摇床上剧烈振荡培养约2.5-3小时（250-30
盘点：31项与免疫学有关的分子生物学实验技术
现代分子生物学和免疫学的进展加深了我们对许多疾病的了解，并且导致了免疫新策略的产生，免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫测定。本文盘点了与免疫学有关的分子生物学实验技术汇总。 一、GST pull-down实验 GST是指谷胱甘肽巯基转移酶，GST pull-down实验是一个行之有效的验
31项与免疫学有关的分子生物学实验技术（一）
现代分子生物学和免疫学的进展加深了我们对许多疾病的了解，并且导至了免疫新策略的产生，免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫测定。本文盘点了与免疫学有关的分子生物学实验技术汇总。一、GST pull-down实验GST是指谷胱甘肽巯基转移酶，GST pull-down实验是一个行之有效的验证酵母双杂交
分子生物学实验基础知识
分子生物学是在生物化学基础上发展起来的，以研究核酸和蛋白质结构、功能等生命本质的学科，在核酸、蛋白质分子水平研究发病、诊断、治疗和预后的机制。其中基因工程（基因技术，基因重组）是目前分子生物学研究热点，这些技术可以改造或扩增基因和基因产物，使微量的研究对象达到分析水平，是研究基因调控和表达的方法，也
分子生物学实验基础知识
分子生物学是在生物化学基础上发展起来的，以研究核酸和蛋白质结构、功能等生命本质的学科，在核酸、蛋白质分子水平研究发病、诊断、治疗和预后的机制。其中基因工程（基因技术，基因重组）是目前分子生物学研究热点，这些技术可以改造或扩增基因和基因产物，使微量的研究对象达到分析水平，是研究基因调控和表达的方法，也
分子生物学实验常用试剂配置
一. 常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（ammon
分子生物学实验常用试剂配置
一. 常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（ammo