抗核抗体与间接免疫荧光技术
在自身免疫性疾病中,人体组织细胞细胞核的核膜、核内的染色质、非组蛋白,以及核糖核酸(RNA)和相关的蛋白质等都可成为自身免疫反应攻击的靶子,产生抗核抗体(ANA)。其中有不少抗体因对疾病的诊断有高度的特异性,已成为诊断某一类疾病的血清标志性抗体,如抗双链DNA抗体、抗Sm抗体之于SLE,抗SSB抗体之于SS,抗Jo-1抗体之于多发性肌炎/皮肌炎等等。 间接免疫荧光法是检测自身抗体的标准技术。其特点是特异性强,通过荧光显微镜镜检能够精确地判断组织或细胞内荧光素的有无或分布,阳性与阴性样品的信号强度对比明显。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模型,与此典型模型不相关区域的荧光均为检验地带网非特异性荧光。另外基质制备容易,不需要复杂的技术就可生产出冰冻组织、细胞和细菌涂片,也不需要纯化抗原,由于保留了原基质的完整抗原谱,因而一块基质片可同时筛查多种不同的自身抗体,获得较高的检测效率。也可以在一个反应区上组合多种基质,类似于马......阅读全文
抗核抗体与间接免疫荧光技术
在自身免疫性疾病中,人体组织细胞细胞核的核膜、核内的染色质、非组蛋白,以及核糖核酸(RNA)和相关的蛋白质等都可成为自身免疫反应攻击的靶子,产生抗核抗体(ANA)。其中有不少抗体因对疾病的诊断有高度的特异性,已成为诊断某一类疾病的血清标志性抗体,如抗双链DNA抗体、抗Sm抗体之于SLE,抗SSB抗体
间接免疫荧光抗核抗体检测怎么看
看有荧光增强标记的地方。间接免疫荧光抗核抗体检测技术是直接免疫荧光技术的改进。待检细胞首先用未标记的抗体处理,使之与特异的抗原形成复合物,然后再用抗抗体的荧光标记抗体着色,即可检测出特异抗原在细胞中的存在部位,具有荧光增强效应。间接免疫荧光法(IIF)这是进行抗核抗体、抗核仁抗体和抗胞浆抗体筛选检测
间接免疫荧光抗核抗体检测是什么意思
检测自身抗体的方法有多种,包括间接免疫荧光法、颗粒凝集法、酶联免疫吸附试验、放射免疫法、免疫双扩散法、参比对流免疫电泳法、免疫印迹法、免疫斑点法、胶体金标斑点免疫渗滤法以及速率免疫比浊法等,间接免疫荧光法即适用于检测针对原位成分也适用于可溶性成分的抗体,其余各法均适用于针对可溶性成分的抗体,可根据临
抗核抗体(ANA)与抗核抗体谱
弥漫性结缔组织病(多属于自身免疫病)的一个重要特点是血清中出现自身抗体,其中最常见且与疾病关系最密切的是抗核抗体(ANA)。ANA包含一组自身抗体,无种属和器官特异性,见于多种疾病,缺乏特异性。在自身免疫性疾病中,细胞核常成为自身免疫反应的靶子。ANA主要是指对核内成分所产生的抗体,此外也包括对
免疫荧光技术荧光抗体染色方法介绍间接法
间接法是根据抗球蛋白试验的原理,用荧光素标记抗球蛋白抗体(简称标记抗抗体)的方法(图)。间接法的检测过程分为两步:第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中在37℃下保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体;第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、
免疫荧光技术——间接法
实验方法原理基本原理是先用特异性抗体与细胞内相应抗原结合,再用荧光素标记的二抗与特异性抗体相结合,形成抗原-特异性抗体-标记荧光抗体的复合物。因为在复合物上带有比直接法更多的荧光标记物,所以比直接法更敏感。实验材料抗体试剂、试剂盒PBS伊文氏兰仪器、耗材显微镜实验步骤1. 标本固定后,PBS洗涤3
间接免疫荧光法检测自身抗体
自身抗体诊断的标准技术是间接免疫荧光法,其特点是特异性强,阳性与阴性样品的信号强度对比明显,通过显微镜观测能够精确地判断组织或细胞内荧光的分布。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模式,所有与此典型模式不相关区域的染色被认为是非特异性染色。即使偶尔伴有强的非特异性染色,但弱的特异性信号
间接免疫荧光法检测自身抗体
自身抗体诊断的标准技术是间接免疫荧光法,其特点是特异性强,阳性与阴性样品的信号强度对比明显,通过显微镜观测能够精确地判断组织或细胞内荧光的分布。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模式,所有与此典型模式不相关区域的染色被认为是非特异性染色。即使偶尔伴有强的非特异性染色,但弱的特异性信号也能够被
免疫荧光的技术的间接法测抗体注意事项
1)荧光染色后一般在1h内完成观察,或于4℃保存4h,时间过长 ,会使荧光减弱。 2)每次试验时 ,需设置以下三种对照: ① 阳性对照:阳性血清+荧光标记物 ②阴性对照:阴性血清+荧光标记物 ③ 荧光标记物对照:PBS+荧光标记物 3)已知抗原标本片需在操作的各个步骤中,始终保持湿润,
何为抗核抗体
抗核抗体是一组对细胞核内的DNA,RNA,蛋白或这些物质的分子复合物的自身抗体。按其核内各个分子的性能不同可将各ANA区分开来,如(一)抗DNA抗体,(二)抗组蛋白抗体,(三)抗非组蛋白抗体,(四)抗核仁抗体等。每一大类又因不同抗原特性而再分为许多种类。因此ANA在广义上是一组各有不同临床意
抗核抗体的抗体分类
抗核抗体的分类,由于核抗原不同,有多种不同的ANA 。 抗DNA抗体有抗双链DNA(ds DNA)和抗单链(ss DNA)抗体之分。抗ds DNA抗体与SLE的关系密切,且随疾病的活动度而升降,病情好转者其滴度多下降甚或转阴。抗ss DNA抗体则与抗ds DNA不同,可在多种疾病出现,包括一些非自身
抗核抗体的抗体意义
抗核抗体谱包括抗核抗体(ANA)、抗DNA抗体、抗核内可溶性抗原抗体(ENA)。ENA又包括抗史密斯抗体(Sm)、抗核糖核蛋白体(RNP)抗体、抗干燥综合征A(SSA/Ro)抗体、抗干燥综合征B(SSB/La)抗体、抗硬皮病-70(Scl-70)抗体。临床意义为:[1]ANA:ANA为一系列抗细胞核
抗核抗体的抗体分类
抗核抗体的分类,由于核抗原不同,有多种不同的ANA 。 抗DNA抗体有抗双链DNA(ds DNA)和抗单链(ss DNA)抗体之分。抗ds DNA抗体与SLE的关系密切,且随疾病的活动度而升降,病情好转者其滴度多下降甚或转阴。抗ss DNA抗体则与抗ds DNA不同,可在多种疾病出现,包括一些非自身
简述免疫荧光的技术的间接法测抗体的实验步骤
1)滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于已知抗原标本片,10min后弃去,使标本片保持一定湿度。 2)滴加以0.01mol/L,pH7.4的PBS适当稀释的待检抗体标本,覆盖已知抗原标本片。将玻片置于有盖搪瓷盒内,37℃保温30min。 3)取出玻片,置于玻片架上,先用0.01mol
关于免疫荧光的技术的间接法测抗体的原理介绍
⑴基本原理 染色程序分为两步,第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体。第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应,标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体
间接免疫荧光术的技术特点
中文名称间接免疫荧光英文名称indirect immunofluorescence定 义直接免疫荧光技术的改进。待检细胞首先用未标记的抗体处理,使之与特异的抗原形成复合物,然后再用抗抗体的荧光标记抗体着色,即可检测出特异抗原在细胞中的存在部位,具有荧光增强效应。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞
抗核抗体(ANA)或抗核因子(ANF)简介
抗核抗体(ANA)是最常出现于自身免疫性风湿病(结缔组织病)患者血清中的一组自身抗体的总称,其靶抗原为真核细胞的核成分,但也包括某些细胞质和细胞骨架成分。核染色质中的抗原有DNA、组蛋白、高活动组(highmobilitygroup,HMG)蛋白、DNA拓朴异构酶-1、增殖细胞核抗原(PCNA/
间接免疫荧光
实验方法原理固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片 产生一抗种属的二抗
间接免疫荧光
实验方法原理固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片产生一抗种属的二抗猪血清或其他封闭剂D-PBSA试剂、试剂盒新鲜制备的固定剂用含10%的FBS培养液封固剂实验步骤1. 用 D-PBSA 洗涤长有细胞的盖玻片,置于合适的培养皿中。如 13 mm 盖玻片可用24 孔
间接免疫荧光
方案16.11 间接免疫荧光实验方法原理固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片产生一抗种属的二抗猪血清或其他封闭剂D-PBSA试剂、试剂盒新鲜制备的固定剂用含10%的FBS培养液封固剂实验步骤1. 用 D-PBSA 洗涤长有细胞的盖玻片,置于合适的培养皿中。如 1
间接免疫荧光
中文名称间接免疫荧光英文名称indirect immunofluorescence定 义直接免疫荧光技术的改进。待检细胞首先用未标记的抗体处理,使之与特异的抗原形成复合物,然后再用抗抗体的荧光标记抗体着色,即可检测出特异抗原在细胞中的存在部位,具有荧光增强效应。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞
抗核抗体小问答
抗核抗体(Antinuclear antibody,ANA)Q:ANA的靶抗原都位于细胞核内?A:不尽然。目前ANA的靶抗原不局限于细胞核成分,而是包括核酸和核蛋白,它们的分布可以位于胞核内,也可以位于胞浆内。比如抗rRNP抗体,识别的位点位于核糖体大亚基上,核糖体最初产生于核仁,然后转运至胞浆中,
抗核抗体检测
抗核抗体(ANA)是能与细胞核或者其组成成分反应的自身抗体,主要出现在红斑狼疮等一类自身免疫病,是诊断红斑狼疮的主要手段之一。过去多用测定血液中狼疮细胞(血液中多核白细胞吞噬抗核抗体和核蛋白结合后形成的复合物称为狼疮细胞)来确定病人的抗核抗体,检出率低且没有特异性,需要有经验的技术员才能辨认出
小鼠抗核抗体,小鼠抗核抗体试剂盒使用说明
小鼠抗核抗体,小鼠抗核抗体试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中抗核抗体(ANA)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠抗核抗体(ANA)水平。用纯化的小鼠抗核抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入抗核抗体(ANA),再与HRP标记的抗核抗原
自身抗体检测项目介绍抗核抗体(ANA)或抗核因子(ANF)
抗核抗体(ANA)或抗核因子(ANF)介绍: 抗核抗体(ANA)是最常出现于自身免疫性风湿病(结缔组织病)患者血清中的一组自身抗体的总称,其靶抗原为真核细胞的核成分,但也包括某些细胞质和细胞骨架成分。核染色质中的抗原有DNA、组蛋白、高活动组(high mobility group,HMG)蛋白、D
人抗核抗体(ANA)试剂盒技术原理
检测范围: 48T 25 ng/L -800 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本抗核抗体(ANA)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人抗核抗体(ANA)水平。用纯化的人抗核抗体(ANA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
抗核抗体是指什么
抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)又称抗核酸抗原抗体,是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白(DNP)、DNA、可提取的核抗原(ENA)和RNA等作为靶抗原的自身抗体的总称,能与所有动物的细胞核发生反应,主要存在于血清中,也可存在于胸水、关节滑膜液和尿液中。抗核抗体在
抗核抗体(ANA)检査
[临床意义]抗核抗体(ANA)对很多自身免疫性疾病有诊断价值。 在不同疾病中,特别是风湿性疾病,其抗体谱有一定的特征性。ANA阳性已被美国风湿病学会列为SLE的诊断标准之一。 肿瘤标志物检测(AFP、CEA、CA125)
抗核抗体阳性说明什么
由于某些原因ANA可呈假阳性和假阴性.ANA主要用于自身免疫性结缔组织病的筛选试验,低滴度的ANA可在感染,肿瘤及正常人中出现,未加稀释的正常人血清约1/3也可呈阳性反应
抗核抗体检测方法
ANA的检测方法 由于ANA的复杂性及多样性,故测定方法繁多。目前ANA常用的方法有免疫荧光法、放射免疫法、ELISA、免疫双扩散、对流免疫电泳及免疫印迹技术等。 1.免疫荧光法检测血清总ANA最常用的方法是荧光免疫组化法。多用小鼠肝切片或印片作为细胞核基质,结果比较稳定可靠,在荧光显微镜下见到