固相杂交反应的特点、问题及解决办法

杂交反应的条件类似于传统的Southern或Northern杂交。具体的选择视研究目的而定,例如,进行多态性分析或杂交测序时,要求能够区分单个碱基的变异,所以需要较高的杂交严谨性;而用于表达谱检测的芯片为了提高检测的特异性、保证较高的灵敏度,需要较长的杂交时间,高的严谨性、高的样品浓度、较低的杂交温度等。同时,杂交反应还必需考虑反应液中的盐浓度、探针序列的G+C含量、探针所带电荷情况、探针与芯片片基间连接臂的长度及种类,靶序列二级结构等因素[1]。固定于芯片表面的探针或蛋白、多肽分子与位于液相的靶分子进行生化反应(作用)的过程不完全与液相中生化反应相同。其原因在于,生物大分子与固相支持物的结合导致了溶液中的靶分子与其不能迅速地发生作用,延长了反应时间,必要时还必需提高靶分子的浓度以加快反应。而且,固相化的大分子,特别是空间体积较小的分子,很容易受到支持物对生化反应的空间阻碍作用。如何解决以上问题是生物芯片技术应用中的关键之一......阅读全文

固相杂交反应的特点、问题及解决办法

  杂交反应的条件类似于传统的Southern或Northern杂交。具体的选择视研究目的而定,例如,进行多态性分析或杂交测序时,要求能够区分单个碱基的变异,所以需要较高的杂交严谨性;而用于表达谱检测的芯片为了提高检测的特异性、保证较高的灵敏度,需要较长的杂交时间,高的严谨性、高的样品浓度、较低的杂

固相萃取仪的常见问题及相应的解决办法

问题及解决办法1.样品吸附于试管壁上解决办法:使用硅烷化玻璃管或EP管2.样品吸附于固体基质上解决办法:完全均质化;或使用有机溶剂冲洗3.固相萃取小柱活化不当解决办法:活化,注意:不要抽干4.被分析物保留差或不保留解决办法:比较弱溶剂稀释上样;或使用强吸附剂;或使用较大SPE柱5.基质性质改变解决办

固相多肽合成的特点及主要问题分析

固相合成法对于多肽合成的显著的优点:简化并加速了多步骤的合成;因反应在一简单反应器皿中便可进行,可避免因手工操作和物料重复转移而产生的损失;固相载体共价相联的肽链处于适宜的物理状态,可通过快速的抽滤、洗涤未完成中间的纯化,避免了液相肽合成中冗长的重结晶或分柱步骤,可避免中间体分离纯化时大量的损失;使

固相杂交的基本程序

固相杂交的基本程序是:①准备待测样本;②制备和标记探针;③固相载体的处理;④预杂交、杂交、漂洗;⑤杂交信号检测;⑥结果判断及分析。

固相萃取种类及特点

  固相萃取实质上是一种液相色谱分离,按照萃取机理的不同,固相萃取可分为正相(吸附剂极性大于洗脱液极性)、反相(吸附剂极性小于洗脱液极性)和离子交换吸附。正相固相萃取所用的吸附剂都是极性的,用来萃取(保留)极性物质可以从非极性溶剂样品中吸附极性化合物;反相固相萃取所用的吸附剂通常是非极性的或极性较弱

常用的固相杂交方法介绍

常用的固相杂交方法有斑点杂交法、夹心杂交法和原位杂交法等。下面简单介绍几种常用的核酸分子固相杂交方法。①斑点杂交法(dot blot hybridization):最常用的杂交模式.将样品DNA直接点在硝酸纤维素膜或尼龙膜上,在严格的条件下杂交后进行检测。斑点杂交法简单、迅速,不需要限制性核酸内切酶

固相萃取装置原理及特点

仪器安装调试步骤⑴ 小心地取出固相萃取装置,轻放于工作台上。⑵ 小心地取出SPE装置上盖板(轻拿轻放以免碰坏小管),将标准试管插入真空仓内隔板孔中,然后,将上干盖板盖好,并保证盖板下导流管与试管一一对应好,盖板方形密封圈与真空仓有很好的密封性。如果不易密封,可用橡皮箍箍紧,以增加密封性。如果选购了独

常规杂交反应存在的问题

  常规杂交反应由于受到探针解链温度、溶液中靶序列的初始浓度及探针长度的影响。样品中不同探针所对应的靶序列的拷贝数不尽相同,探针的解链温度也难以保持一致,这样不同位点的杂交速度并不完全与各自靶序列的拷贝数成正比,检测结果也就不具有良好的平行性。所以必需选择最理想的条件以尽可能使正确配对的序列不被遗漏

固相微萃取的原理及特点

  原理  以熔融石英光导纤维或其它材料为基体支持物,采取“相似相溶”的特点,在其表面涂渍不同性质的高分子固定相薄层,通过直接或顶空方式,对待测物进行提取、富集、进样和解析。然后将富集了待测物的纤维直接转移到仪器(GC或HPLC)中,通过一定的方式解吸附(一般是热解吸,或溶剂解吸),然后进行分离分析

固相萃取的特点

  1 每路配有一个进口调节阀,可根据试验要求调节流速。  2 独特的螺旋盘支架设计可自由调节高度和灵活组合不同孔径的支撑盘用来满足大多数采样试管。  3 特有的废液收集瓶将萃取部分与存放废液部分分离开,既防止了交叉污染,处理废液也更加方便。

固相萃取仪解决的问题

固相萃取仪解决的问题(1)去除基质干扰物固相萃取仪能有效去除干扰物质,从而确保高灵敏度、高选择性以及稳定可靠HPLC/MS联用结果的有效工具。(2)降低离子抑制固相萃取仪能有效除去HPLC/MS联用分析中导致离子yi制的主要物质。去除这些干扰物可提高质谱的相应,从而降低Zdi定量限。(3)富集目标分

全自动固相萃取仪特点及分类

全自动固相萃取仪的特点:一套成熟的自动固相萃取仪应该满足自动化、模块化、经济化、平行化、功能化、扩展化、可靠化这几个特点。●自动化:一套完善的自动化固相萃取系统可以真正在无人值守的情况下完成固相萃取方法的应用。有些固相萃取仪仅仅能完成部分固相萃取的步骤,不能成为自动化固相萃取仪。●模块化:可以根据不

固相微萃取的特点

  集取样、萃取、浓缩和进样于一体,操作方便,耗时短,测定快速高效[2]。  无需任何有机溶剂,是真正意义上的固相萃取,避免了对环境的二次污染[2]。  仪器简单,无需附属设备,适于现场分析,也易于操作[2]。  灵敏度高,可以实现超痕量分析,可以达到纳克每克级别的检测[1]。

固相萃取膜片的特点

固相萃取膜片是针对各种大体积水样而设计生产的一种特殊的固相萃取材料,其萃取的基本原理与经典的固相萃取柱相同。与固相萃取柱相比,其最大的特点是直径大、面积大。6 mL的固相萃取柱的直径在13 mm左右,其面积约为130 mm,而直径为47 mm的固相萃取膜片的面积约为前者的13倍。因此,样品通过47

固相萃取仪全自动固相萃取仪的技术特点

全自动固相萃取仪的技术特点1、全自动操作模式自动完成固相萃取全过程:柱活化-上样-柱淋洗-柱干燥-柱洗脱,自动完成柱切换等功能,实现批量样品的处理。2、双通道萃取双样品位上样,实现双通道的同时活化、同时上样、同时洗脱、同时干燥;根据样品数量可以升级为四通道、六通道和八通道。3、连续处理样品能力单机可

固相萃取仪常见问题

1、全自动固相萃取仪主要用于哪些物质的萃取分离?全自动固相萃取仪通过固相萃取吸附剂的吸附作用,将目标化合物与杂质物质进行分离、富集、纯化,一般常用于有机物质分析前处理过程中,主要包括农药残留、兽药残留、食品添加剂、真菌毒素、多环芳烃、多氯联苯、蛋白质除盐、核酸纯化、毒品、兴奋剂以及爆炸残留物等目标化

固相萃取仪常见问题

固相萃取仪常见问题:1、固相萃取仪主要用于哪些物质的萃取分离?固相萃取仪通过固相萃取吸附剂的吸附作用,将目标化合物与杂质物质进行分离、富集、纯化,一般常用于有机物质分析前处理过程中,主要包括农药残留、兽药残留、食品添加剂、真菌毒素、多环芳烃、多氯联苯、蛋白质除盐、核酸纯化以及爆炸残留物等目标化合物萃

固相萃取小柱常见问题

  1、目标化合物在吸附剂上保留不足;  2、目标化合物未被完全洗脱;  3、其他环节。  1、目标化合物在吸附剂上保留不足  当超过5%的目标化合物出现在样品流出液或淋洗液时即可断定“目标化合物在吸附剂上的保留不足”。  2、目标化合物未被完全洗脱  当目标化合物在样品溶液流出液和淋洗液中未出现而

导致液相色谱柱失效的常见问题及解决办法

  导致液相色谱柱失效的常见问题如下:    1 筛板堵塞    色谱柱入口筛板堵塞是zui常见的问题之一,会导致柱压升高、色谱峰拖尾、塔板数降低等问题。通常分析样品中微粒杂质zui右可能堵塞色谱柱入口,因此分析时,需要先过滤或者离心,乳浊或浑浊样品应以0.25µm滤膜处理,也可用针头过滤器过滤。进

导致液相色谱柱失效的常见问题及解决办法

导致液相色谱柱失效的常见问题如下:    1 筛板堵塞    色谱柱入口筛板堵塞是最常见的问题之一,会导致柱压升高、色谱峰拖尾、塔板数降低等问题。通常分析样品中微粒杂质zui右可能堵塞色谱柱入口,因此分析时,需要先过滤或者离心,乳浊或浑浊样品应以0.25µm滤膜处理,也可用针头过滤器过滤。进样器与泵

导致液相色谱柱失效的常见问题及解决办法

导致液相色谱柱失效的常见问题如下:    1 筛板堵塞    色谱柱入口筛板堵塞是zui常见的问题之一,会导致柱压升高、色谱峰拖尾、塔板数降低等问题。通常分析样品中微粒杂质zui右可能堵塞色谱柱入口,因此分析时,需要先过滤或者离心,乳浊或浑浊样品应以0.25µm滤膜处理,也可用针头过滤器过滤。进

气相色谱各种出峰异常问题原因及解决办法

色谱的分析过程比较复杂,诸多因素都可对结果产生影响,经常会出现预料不到的现象,出峰异常就是经常遇到的问题之一,一般表现为色谱出鬼峰,色谱峰分不开,色谱峰拖尾,色谱峰出现圆顶峰,进样后不出峰等,这些问题的出现看似无规律,认真分析大部分有迹可循。气相色谱分析测试常见问题及解决一.标定时有峰丢失可能的原因

固相微萃取技术的特点

  集取样、萃取、浓缩和进样于一体,操作方便,耗时短,测定快速高效。  无需任何有机溶剂,是真正意义上的固相萃取,避免了对环境的二次污染。  仪器简单,无需附属设备,适于现场分析,也易于操作。  灵敏度高,可以实现超痕量分析,可以达到纳克每克级别的检测。

正压固相萃取装置的特点

  目前市场上的正压型固相萃取装置主要有两种类型,一种是以MC的MULTI-SPE M08为代表的多功能正压型固相萃取装置;另一类是以Cerex System-48、J2 为代表的48位正压型固相萃取装置。  MULTI-SPE M08正压型固相萃取装置的特点是具有多种功能,适合于不同固相萃取方法的

数控固相萃取仪的特点

主要特点:  1、精确控速,单道流速0.01-7ml/min,支持大体积进样和正压洗脱,避免交叉污染;  2、无级数控操作、LED数字显示、可通过数字显示转速确定流速,并有定时功能;  3、多通道,小柱接头耐酸、碱、有机溶剂、氧化剂腐蚀;  4、操作简单,单人操作可同时进行1-8个样品的处理,大大提

自动固相萃取仪的特点

●自动化:一套完善的自动化固相萃取系统可以真正在无人值守的情况下完成固相萃取方法的应用。有些固相萃取仪仅仅能完成部分固相萃取的步骤,不能成为自动化固相萃取仪。●模块化:可以根据不同用户的应用切换不用的模块,完成不同固相萃取方法的应用,如双柱叠加。典型的如美国吉尔森公司开发的GX-27X自动化固相萃取

固相萃取仪的技术特点

  1、精确控速,单道流速0.01~10.85ml/min,支持大体积进样和正压洗脱,避免交叉污染;  2、无级数控操作、大屏幕显示、触摸屏与按键兼容操作,轻触按键、人体工程力学设计;  3、耐腐蚀顶板,机箱磷化和多层环氧树脂喷涂处理;  4、机箱结构方便维护,配有宝晶科技萃取工作软件模块,多种输出

固相萃取装置的产品特点

固相萃取装置 特点:1. 密封性好、结构简捷实用、方便控制萃取速度;2. 高回收率和高富集倍数;3. 防交叉污染、防雾化真空槽设计;4. 操作简单、快速、易于样品的批量处理;5. 无相分离操作,易于收集分析物组分,能处理小体积试样;6. 可配大容量采样器、快速浓缩干燥装置;7. 除方刚使用特硬加厚玻

圆形固相萃取仪的特点

圆形固相萃取仪的特点:一套成熟的自动固相萃取仪应该满足自动化、模块化、经济化、平行化、功能化、扩展化、可靠化这几个特点。自动化:一套完善的自动化固相萃取系统可以真正在无人值守的情况下完成固相萃取方法的应用。有些固相萃取仪仅仅能完成部分固相萃取的步骤,不能成为自动化固相萃取仪。模块化:可以根据不同用户

固相萃取仪的技术特点

  1、精确控速,单道流速0.01~10.85ml/min,支持大体积进样和正压洗脱,避免交叉污染;  2、无级数控操作、大屏幕显示、触摸屏与按键兼容操作,轻触按键、人体工程力学设计;  3、耐腐蚀顶板,机箱磷化和多层环氧树脂喷涂处理;  4、机箱结构方便维护,配有宝晶科技萃取工作软件模块,多种输出