固相杂交反应的特点、问题及解决办法
杂交反应的条件类似于传统的Southern或Northern杂交。具体的选择视研究目的而定,例如,进行多态性分析或杂交测序时,要求能够区分单个碱基的变异,所以需要较高的杂交严谨性;而用于表达谱检测的芯片为了提高检测的特异性、保证较高的灵敏度,需要较长的杂交时间,高的严谨性、高的样品浓度、较低的杂交温度等。同时,杂交反应还必需考虑反应液中的盐浓度、探针序列的G+C含量、探针所带电荷情况、探针与芯片片基间连接臂的长度及种类,靶序列二级结构等因素[1]。固定于芯片表面的探针或蛋白、多肽分子与位于液相的靶分子进行生化反应(作用)的过程不完全与液相中生化反应相同。其原因在于,生物大分子与固相支持物的结合导致了溶液中的靶分子与其不能迅速地发生作用,延长了反应时间,必要时还必需提高靶分子的浓度以加快反应。而且,固相化的大分子,特别是空间体积较小的分子,很容易受到支持物对生化反应的空间阻碍作用。如何解决以上问题是生物芯片技术应用中的关键之一......阅读全文
多肽的固相合成、切割及纯化_固相肽合成技术
实验材料huBPP试剂、试剂盒氩气二甲基甲酰胺(DMF)哌啶二异丙基乙胺甲醇TFA(三氟乙酸)茚三酮甘氨酸聚乙二醇乙腈仪器、耗材Pioneer肽合成仪树脂Waters 650半制备色谱仪色谱柱Beckman gold system试管固相肽合成技术是现代蛋白质化学的一项关键技术,也是对现代分子生物学
关于固相萃取仪的特点是怎样的?
固相萃取仪由气压室、收集瓶和萃取柱连接部分组成。主要用于液体样品的前处理,萃取其中的半挥发或者不挥发性化合物,或去除样品中对分离分析造成干扰的杂质,还可以用于处理能预先溶解到溶剂的固体样品。 1.jpg 与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物与干扰组分进行分离,缩短了样品的预
旋转蒸发仪常见问题及解决办法
旋转蒸发仪是我们实验室最常用的设备,那么使用过程中出现问题如何解决呢,看到以下几段话,想必大家都能快速了解是哪方便面出现故障以及如何解决它们!一.电机飞车(只有最高速)故障现象1.检查测速发电机线圈是否断路,用万用表量七芯插头“1、2”脚(插头对正槽两边)正常电阻400Ω左右。2.发电机线圈与外壳短
旋转蒸发仪常见问题及解决办法
旋转蒸发仪是我们实验室zui常用的设备,那么使用过程中出现问题如何解决呢,看到以下几段话,想必大家都能快速了解是哪方便面出现故障以及如何解决它们!一.电机飞车(只有zui高速)故障现象1.检查测速发电机线圈是否断路,用万用表量七芯插头“1、2”脚(插头对正槽两边)正常电阻400Ω左右。2.发电机线圈
ELISA试验中常出现问题及解决办法
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。除了盒子本身质量外,操作中很多因素都影响试验的正常结果。最常出现的问题是显色淡,灵敏度偏低、重复性不佳、假阳性结果和假阴性结果,不管出现什么样的结果,不但浪费客户的金钱、样本、精力,更重要的是对临床做出了危险判断。在这里我们分析ELISA试验非正常检测结
电泳槽常见问题及解决办法
电泳槽时凝胶时间不对,那么通常胶在60min,1H内凝,如果凝的太慢,可能是TEMEN,APS剂量不够或者失效。APS应该现配现用,TEMED不稳定,容易被氧化成黄色。如果凝的太快,可能是APS和TEMED用量过多,此时胶太硬易裂,电泳时易烧胶。纹理和托尾现:由于样品溶解不佳引起的,克服的方法可以在
离心机常见问题及解决办法
1. 急停开关出现异常问题分析此类报警一般在离心机出现紧急故障按下急停开关后或设备重启时出现此类报警。处理方法只需对设备进行复位键,如复位失败需等30s后驱动变频器开关能自动切断后再进行复位即可。2. 分散单元位置不对问题分析此类报警一般在离心机开启后准备进行操作时或在分散过程中刮刀走到位后出现,由
ELISA试验中常出现问题及解决办法
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。除了盒子本身质量外,操作中很多因素都影响试验的正常结果。zui常出现的问题是显色淡,灵敏度偏低、重复性不佳、假阳性结果和假阴性结果,不管出现什么样的结果,不但浪费客户的金钱、样本、精力,更重要的是对临床做出了危险判断。在这里我们分析ELISA试验非正
COD测定中常见问题及解决办法
1、 采不到试剂或水样报警 (1)采样管堵塞造成无法提到试剂,检查堵塞位置,清洗或更换堵塞管路。 (2)如果九通阀堵塞在外部无法清除堵塞物的情况下方可拆开九通阀进行清洗。 (3)采样管漏气,检查采样管和九通阀相连的各个螺丝,是否压紧,有无漏气现象,如有请从新连接管路并压紧。 (4)高低
DNA测序常见问题分析及解决办法
常见问题 具体情况 可能的原因 处理办法 备注 样品准备问题
固相萃取过程中的常见问题有哪些?
1、重现性差 固相萃取中重现性差通常与产品质量、流速以及操作有关。固相萃取柱中填料的质量、均匀性和松紧度都可能影响到方法的重现性,因此选择质量可靠的厂家很重要,遇到重现性差的实验,可以选择用标准溶液考察一下固相萃取柱的重现性。 固相萃取过程中流速的快慢也是影响重现性的重要因素之一
固相萃取离子交换固相萃取
离子交换固相萃取离子交换固相萃取是靠目标化合物与吸附剂之间的相互作用是静电吸引力。
固相萃取与固相微萃取比较
一 固相萃取固相萃取 (Solid Phase Extraction,SPE)是一种基于液-固分离萃取的试样预处理技术,由柱液相色谱技术发展而来。SPE技术自70年代后期问世以来,由于其高效、可靠及耗用溶剂量少等优点,在环境等许多领域得到了快速发展。在国外已逐渐取代传统的液-液萃取而成为样品预处理的
固相萃取与固相微萃取比较
固相萃取 (Solid Phase Extraction,SPE)是一种基于液-固分离萃取的试样预处理技术,由柱液相 固相萃取 (Solid Phase Extraction,SPE)是一种基于液-固分离萃取的试样预处理技术,由柱液相色谱技术发展而来。SPE技术自70年代后期问世以来,由于
固相萃取正压固相萃取装置介绍
常见的固相萃取设备可分为自动固相萃取仪和手动固相萃取装置。手动固相萃取装置又可分为负压型和正压型两大类。传统的固相萃取装置是以真空负压为动力源使载入固相萃取柱的液体通过固相萃取柱。负压型固相萃取装置简单,但由于这种装置难以控制液体通过固相萃取柱的流速,而且平行操作时柱与柱之间的流速差异较大。与之相反
固相萃取全自动固相萃取仪的分类
1、按用途可分为:小体积样品全自动固相萃取仪和大体积样品全自动固相萃取仪小体积样品指食品、药品、血液等样体,体积量一般在50ml以下;而大体样品主要指水样,一般是200ml量以上。市面上现有的全自动固相萃取仪也是通过样品量的体积不同而设计。2、按原理分可分为柱萃取和膜萃取全自动固相萃取仪膜萃取主要为
固相萃取仪的原理及应用介绍
固相萃取仪的原理固相萃取仪是基于液-固相色谱理论,采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、净化,是一种包括液相和固相人物理萃取过程;也可以将其近似地看作一种简单的色谱过程。固相萃取仪是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。较常用的方法是使液体样品溶液通过吸附剂,保留其中被测物
固相萃取柱的原理及规格
固相萃取柱的容量是指固相萃取柱填料的吸附量。对于以硅胶为基质的固相萃取柱,其容量一般在1~5 mg/100 mg,也就是柱容量是填料质量的1%~5%。而键合硅胶离子交换吸附剂填料的容量以meq/g表示,即每克填料的容量为X毫克当量。这类填料的容量通常在0.5~1.5 meq/g。固相萃取柱是从层析柱
固相萃取装置的优点及适用领域
固相萃取(Solid-Phase Extraction,简称SPE)是近年发展起来一种样品预处理技术,由液固萃取和柱液相色谱技术相结合发展而来,主要用于样品的分离、纯化和浓缩,与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率,更有效的将分析物与干扰组分分离,减少样品预处理过程,操作简单、省时、省力。广
固相萃取柱的种类及优势
常见的固相萃取柱大都以聚乙烯为材料的注射针筒型装置,该装置内装有两片以聚丙烯或玻璃纤维为材料的塞片,两个塞片中间装填有一定量的色谱吸附剂(填料)。固相萃取柱上端敞开,下端为出液口,液体经过吸附剂后从出口排出。根据经典固相萃取柱填料上方的空间体积,固相萃取柱的规格可分为1 mL、3 mL、6 mL、
固相萃取
•固相萃取的基本原理是样品在两相之间的分配,即在固相(吸附剂)和液相(溶剂)之间的分配。•固相萃取保留或洗脱的机制取决于被分析物与吸附剂表面的活性基团,以及被分析物与液相之间的分子作用力。•洗脱模式有两种:一种是目标化合物比干扰物与吸附剂之间的亲和力更强,因而被保留,洗脱时采用对目标化合物亲和力更强
固相萃取
固相萃取(Solid-Phase Extraction,简称SPE)是近年发展起来一种样品预处理技术,由液固萃取柱和液相色谱技术相结合发展而来,主要用于样品的分离、纯化和浓缩,与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率,更有效的将分析物与干扰组分分离,减少样品预处理过程,操作简单、省时、省力。广
分子杂交仪的注意事项及特点
注意事项 1. 分子杂交仪需要安装在有良好接触的电源插座上。 [2] 2. 恒温室处于高温状态下装取杂交管时,注意不要烫伤。 3. 杂交管在装入反应液前一定要清洗干净,装入反应液及反应膜后一定要拧紧瓶盖,以免漏液。 4. 在进行同位素标记的杂交实验时,必须检查杂交管的密封情况,以免造成污
固相萃取柱容量及原理
固相萃取柱的容量是指固相萃取柱填料的吸附量。对于以硅胶为基质的固相萃取柱,其容量一般在1~5 mg/100 mg,也就是柱容量是填料质量的1%~5%。而键合硅胶离子交换吸附剂填料的容量以meq/g表示,即每克填料的容量为X毫克当量。这类填料的容量通常在0.5~1.5 meq/g。固相萃取柱容量在选择
固相萃取装置及基本操作步骤
一、固相萃取概念及基本原理:固相萃取仪是从八十年代中期开始发展起来的一项样品前处理技术。由液固萃取和液相色谱技术相结合发展而来。固相萃取仪是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的(即样品的分离,净化和富
固相萃取仪原理及操作步骤
固相萃取是一种样品预处理仪器,运用液-固相色谱理论,采用选择性吸附、洗脱的方式对样品进行富集、分离、净化处理,使样品更加纯净,从而降低样品中杂质对检测的干扰,大大提高检测的准确性。固相萃取工作原理是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。较常用的方法是使液体样品溶液通过吸附剂,保留其中被测物
固相萃取(SPE)装置应用及原理
固相萃取(SPE)装置应用及原理 装置:离线与在线SPE 离线SPE: 1.SPE与分析分别独立进行,SPE仅为以后的分析提供合适的试样。 2.为使试样溶液与填料有足够的接触,溶剂流量不能过高。 3.可由自动化仪器完成。自动SPE仪由柱架、柱塞泵、储液槽、管线和试样
液相色谱仪的常见问题及解决办法
液相色谱仪作为一种高精密仪器,如果在使用过程中不按照正确操作的话,就容易导致一些问题。其中zui常见的就是柱压问题、漂移问题和峰型异常问题。本文主要说明柱压问题。一、柱压问题柱压问题是使用液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压
ICPAES分析常见的故障问题及解决办法
1、影响等离子体温度的因素有: ①载气流量:流量增大,中心部位温度下降; ②载气的压力:激发温度随载气压力的降低而增加; ③频率和输入功率:激发温度随功率增大而增高,近似线性关系,在其他条件相同时,增加频率,放电温度降低; ④第三元素的影响:引入低电离电位的释放剂的等离子体,电子温度
真空泵油的常见问题及解决办法
一、真空管路或系统内返油 1.油蒸汽返流至真空管路或系统中 2.油蒸汽压不对 3.停泵时,油返流 4.截流阀板上的密封件损坏 5.抽气管路底部密封件腐蚀或损坏 解决方法: 1.清洗真空泵后换符合要求的油 2.清洗真空泵后换符合要求的油 3.检查并更换截流阀 4.更换截流阀