固相杂交反应的特点、问题及解决办法
杂交反应的条件类似于传统的Southern或Northern杂交。具体的选择视研究目的而定,例如,进行多态性分析或杂交测序时,要求能够区分单个碱基的变异,所以需要较高的杂交严谨性;而用于表达谱检测的芯片为了提高检测的特异性、保证较高的灵敏度,需要较长的杂交时间,高的严谨性、高的样品浓度、较低的杂交温度等。同时,杂交反应还必需考虑反应液中的盐浓度、探针序列的G+C含量、探针所带电荷情况、探针与芯片片基间连接臂的长度及种类,靶序列二级结构等因素[1]。固定于芯片表面的探针或蛋白、多肽分子与位于液相的靶分子进行生化反应(作用)的过程不完全与液相中生化反应相同。其原因在于,生物大分子与固相支持物的结合导致了溶液中的靶分子与其不能迅速地发生作用,延长了反应时间,必要时还必需提高靶分子的浓度以加快反应。而且,固相化的大分子,特别是空间体积较小的分子,很容易受到支持物对生化反应的空间阻碍作用。如何解决以上问题是生物芯片技术应用中的关键之一......阅读全文
顶空(固相微萃取)技术的特点
1、样本准备简单方便,能有效地避免一些高沸点基质对于质谱的污染以及液体进样前处理的多过程误差累积。 2、对于一些挥发性组分以及半挥发性组分灵敏度较好,能得到稳定可靠地定性定量结果。 3、对于一些含量较低,低挥发性的组分来说,固相微萃取技术能有效的起到一个富集的作用。 而顶空(固相微萃取)技
PCR仪关于引物的问题及解决办法?
1. 应该选择哪种纯化方法? 取决于实验目的和引物的长度 2. 为什么我订购了50nmol,但是收到却只有40nmol? 50nmol是起始量 3. 怎样制备100μM的储液? 体积(μl)=质检报告上的nmol数目×10 4. 怎样设计引物? *一般长度20-30bp; *至少
色谱图反映的问题分析及解决办法
D含量高的成分峰1、样品溶剂选择不恰当:减少样品载量E、早出的峰变形样品溶剂选择不恰当:a、减少进样体积b、运用低极性样品溶剂F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰柱外效应:a、调整系统连接(使用更短、内径更小的管路)b、使用小体积的流通池G、K′增加时,脱尾更严重1、二级保留效应,反相模式:a、加入三乙
固相萃取固相萃取活化的目的
活化的目的是创造一个与样品溶剂相容的环境并去除柱内所有杂质。通常需要两种溶剂来完成上述任务,个溶剂(初溶剂)用于净化固定相,另一个溶剂(终溶剂)用于建立一个合适的固定相环境使样品分析物得到适当的保留。每一活化溶剂用量约为1-2ml/100mg固定相。终溶剂不应强于样品溶剂,若使用太强的溶剂,将降低回
固相萃取固相萃取仪的分类
固相萃取装置的分类1.正相固相萃取正相固相萃取所用的吸附剂都是极性的.取决于目标化合物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间相互作用,其中包括了氢键,π—π键相互作用,偶极-偶极相互作用和偶极-诱导偶极相互作用以及其他的极性-极性作用。2.反相固相萃取反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合物通常是非极
分子杂交仪简介及特点
分子杂交仪(又名:分子杂交箱、分子杂交炉)广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。 核酸分子杂交仪,本仪器的各项技术指标均达到国外同类产品水平。可替代进口杂交仪,
分子杂交仪简介及特点
分子杂交仪(又名:分子杂交箱、分子杂交炉)广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。 核酸分子杂交仪,本仪器的各项技术指标均达到国外同类产品水平。可替代进口杂交仪,
分子杂交仪简介及特点
分子杂交仪分子杂交仪(又名:分子杂交箱、分子杂交炉)广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。 核酸分子杂交仪,本仪器的各项技术指标均达到国外同类产品水平。可替代
雷达物位计常见问题及解决办法
一、雷达物位计的天线结疤 常见问题:通常,介电常数较小的挂料现象,在干燥状态下对仪表测量基本没有影响,但介电常数偏高的挂料现象,常会导致测量结果不准确。 解决办法:针对这一情况,建议采用压缩空气吹扫或清水冲洗的方式解除挂料现象,如果结疤较为顽固,应及时采用酸性清洗液清洗碱性结疤污垢,但在清洗
免疫组化问题及解决办法
1、染色过强 原因 解决办法抗体的浓度过高或抗体孵育时间过长 降低抗体滴度(一般指浓缩性抗体)抗体 孵育时间:室温1小时或4℃过夜 孵育温度过高,孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB显色时间过长或DAB浓度过高 显色时间不能超过5-10分钟,以显微镜下 观察为准2、非特异性背景染色 原因
质粒提取常见问题及解决办法
涂布棒在酒精蘸一下,然后烧一下,能不能保证把所用的菌烧死? 参考见解:涂布棒可以在酒精中保藏,但是酒精不能即时杀菌。蘸了酒精后再烧一小会,烧的是酒精而不是涂布棒。建议涂布棒还是干烧较长时间后,冷却了再涂。同时作多个转化时,应用几个涂布棒免得交叉污染。原先测序鉴定没有问题的细菌,37℃摇菌后发现质粒大
全自动固相萃取仪产品特点
全自动固相萃取仪产品特点: 1.适用范围更宽泛:无需改动仪器,可使用50mL离心管作为样品管及收集管,也能使用更小的样品管; 2.萃取过程更可靠:进样针+多功能密封盖提供稳定的过柱压力,也可选择密封杆; 3.液路监控更主动:每个通道都具有液体压力传感器,无需担心压力过高导致的液体泄露; 4.
固相萃取仪常见的五大问题
固相萃取仪的整机透明有机玻璃制作,耐腐蚀性强。 真空槽其壁厚均匀故可承受-0.096Mpa以上的高负压,长期高压使用不变形。 各处受压均匀,气密性好,稳定性强。 萃取速度一致性好、控制调整方便。 多通道可独立控制,接头耐腐蚀。 固相萃取仪内部试管架由聚四氟制成故有很高的耐腐蚀性。 固相萃
固相微萃取的应用及发展
应用 在环境样品检测中的应用 固相微萃取法最早的应用就是在环境样品的检测中,至今其在环境样品的微量元素分析中仍发挥着巨大的作用。应用比较广泛的有固态(如沉积物、土壤等)、液态(饮用水和废水等)及气态(空气、香料和废气等)的样品分析。在固态样品中的应用有在底泥中丁基锡化合物的检测、土壤和沉积物
固相萃取仪的使用及维护
1 原理 固相萃取技术 在过去的二十多年中,固相萃取作为化学分离和纯化的一个强有力工具出现了。从痕量样品的前处理到工业规模的化学分离,吸附剂萃取在制药、精细化工、生物医学、食品分析、有机合成、环境和其他领域起着越来越重要的作用。 固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程。在固相萃取
固相微萃取的操作及原理
操作 其装置类似于一支气相色谱的微量进样器,萃取头是在一根石英纤维上涂上固相微萃取涂层,外套细不锈钢管以保护石英纤维不被折断,纤维头可在钢管内伸缩。将纤维头浸入样品溶液中或顶空气体中一段时间,同时搅拌溶液以加速两相间达到平衡的速度,待平衡后将纤维头取出插入气相色谱汽化室,热解吸涂层上吸附的物质
固相萃取固相萃取柱
固相萃取柱(英文, 简称SPE column,或Solid Phase extraction Cartridges,简称SPE cartridges)是从层析柱发展而来的一种用于萃取、分离、浓缩的样品前处理装置。主要应用于各种食品、农畜产品、环境样品以及生物样品中目标化合物的样品前处理。固相萃取技术
固相萃取与固相微萃取
固相萃取(Solid Phase Extraction SPE)就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的。 与液-液萃取相比固相萃取有很多优点:固相萃取不需要大量互不相溶的溶剂,处理过程中不会产生
固相萃取原理及操作步骤
固相萃取主要通过目标物与吸附剂之间的以下作用力来保留/吸附的1)疏水作用力:如C18、C8、Silica、苯基柱等2)离子交换作用:SAX,SCX,COOH、NH2等3)物理吸附:Florsil、Alumina等 pH值对固相萃取的影响 pH值可以改变目标物/吸附剂的离子化或质子化程度。对于
固相微萃取和固相萃取的区别
固相微萃取技术是一项新颖的样品前处理与富集技术,属于非溶剂型选择性萃取法。固相微萃取是近年来国际上兴起的一项试样分析前处理新技术,是在固相萃取基础上发展起来的,它保留了其所有的优点,摒弃了其需要柱填充物和使用溶剂进行解吸的弊病,只要一支类似进样器的固相微萃取装置即可完成全部前处理和进样工作。固相萃取
固相萃取与固相微萃取的区别
固相微萃取技术是一项新颖的样品前处理与富集技术,属于非溶剂型选择性萃取法。固相微萃取是近年来国际上兴起的一项试样分析前处理新技术,是在固相萃取基础上发展起来的,它保留了其所有的优点,摒弃了其需要柱填充物和使用溶剂进行解吸的弊病,只要一支类似进样器的固相微萃取装置即可完成全部前处理和进样工作。
固相萃取固相萃取装置的萃取步骤
固相萃取装置的萃取步骤如下: 1、固相萃取柱的预处理 在萃取样品之前,吸附剂经过适当的预处理,一足为了润湿和活化固相萃取填料,以使目标萃取物与固相表面紧密接触,易于发生分子间相互作用;二是为了除去填料中可能存在的杂质.减少污染。采取的方法是用量溶剂冲洗萃取柱。 反相类型的固相萃取硅
固相萃取与固相微萃取的区别
固相萃取(SPE)有三个重要的过程:首先,样品通过吸附床,样品中的分析物被固体吸附剂完全萃取出来;其次,使用一种溶剂将干扰组分从吸附剂中洗脱下来;最后,使用另一种溶剂将分析物从吸附剂上洗脱下来,得到的溶液再进行蒸发、浓缩等。固相微萃取(SPME)是利用平衡萃取和选择性吸附的原理将分析物从样品体系
固相微萃取和固相萃取的区别
固相微萃取和固相萃取的工作原理区别固相萃取技术基于液相色谱的原理,可近似看作一个简单的色谱过程。吸附剂作为固定相,而流动相是萃取过程中的水样。当流动相与固定相接触时,其中的某些痕量物质(目标物)就保留在固定相中。这时用少量的选择性溶剂洗脱,即可得到富集和纯化的目标物。固相萃取可分为在线萃取和离线萃取
固相萃取固相萃取仪的维护知识
固相萃取仪的维护知识: 1、请把本机放置在水平的实验台上或通风橱内使用,请勿让本机接近热源,不要让物品遮盖正面板和底板的通风孔; 2、请保持环境的整洁,灰尘过多、高温高湿环境会影响本机使用寿命; 3、油脂、非极性溶剂等可能对仪器造成损害,应避免其接触; 4、清洁本机前,请从交流电源插座上拔下
聚同固相萃取仪的主要特点
聚同固相萃取仪的主要特点1、每路配有一个进口调节阀,可根据试验要求调节流速。2、 独特的螺旋盘支架设计可自由调节高度和灵活组合不同孔径的支撑盘用来满足大多数采样试管。3 、特有的废液收集瓶将萃取部分与存放废液部分分离开,既防止了交叉污染,处理废液也更加方便。4、高回收率和高富集倍数。5、操作简单、快
固相放射免疫测定的技术特点
中文名称固相放射免疫测定英文名称solid-phase radioimmunoassay定 义将抗原或抗体吸附在固相载体上进行反应和检测的一种放射免疫分析技术。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
ELISA试验中常出现问题及解决办法
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。除了盒子本身质量外,操作中很多因素都影响试验的正常结果。zui常出现的问题是显色淡,灵敏度偏低、重复性不佳、假阳性结果和假阴性结果,不管出现什么样的结果,不但浪费客户的金钱、样本、精力,更重要的是对临床做出了危险判断。在这里我们分析ELISA试验非正
离心机常见问题及解决办法
1. 急停开关出现异常问题分析此类报警一般在离心机出现紧急故障按下急停开关后或设备重启时出现此类报警。处理方法只需对设备进行复位键,如复位失败需等30s后驱动变频器开关能自动切断后再进行复位即可。2. 分散单元位置不对问题分析此类报警一般在离心机开启后准备进行操作时或在分散过程中刮刀走到位后出现,由
COD测定中常见问题及解决办法
1、 采不到试剂或水样报警 (1)采样管堵塞造成无法提到试剂,检查堵塞位置,清洗或更换堵塞管路。 (2)如果九通阀堵塞在外部无法清除堵塞物的情况下方可拆开九通阀进行清洗。 (3)采样管漏气,检查采样管和九通阀相连的各个螺丝,是否压紧,有无漏气现象,如有请从新连接管路并压紧。 (4)高低