两种虎纹捕鸟蛛昆虫毒素的分离纯化及生物学活性鉴定

摘要 结合离子交换和反相高效液相色谱从虎纹捕鸟蛛粗毒分离纯化到2 种虎纹捕鸟蛛毒素,命名为虎纹捕鸟蛛毒素2 Ⅶ和虎纹捕鸟蛛毒素2 Ⅷ. 经质谱测定这2 种毒素的分子量分别为3981102和4171112. 氨基酸序列分析发现,这2 种虎纹捕鸟蛛毒素同源性非常高,只有6 个残基位点的不同. 虎纹捕鸟蛛毒素2 Ⅶ和虎纹捕鸟蛛毒素2 Ⅷ的生物学功能相似,都能对蝗虫起到麻痹作用;对小鼠的中枢神经作用高剂量能使小鼠产生致死,但低剂量虎纹捕鸟蛛毒素2 Ⅷ能使小鼠产生惊厥反应,而低剂量虎纹捕鸟蛛毒素2 Ⅶ不能使小鼠产生惊厥反应;这2 种毒素都能阻断小鼠离体膈神经膈肌的神经肌肉传递,且与虎纹捕鸟蛛毒素2I 混合后都具协同作用.点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文

氨基酸序列测定实验

基本方案 测定通过 SDS-PAGE 转移到 PVDF 膜上样品的氨基酸序列 辅助方案 准备SDS-PAGE蛋白质样品             实验方法原理

氨基酸序列测定实验

实验方法原理 实验材料 分离胶和积层胶溶液还原型谷胱甘肽干粉试剂、试剂盒 4 × 凝胶缓冲液10 × 下槽缓冲液10 × 上槽缓冲液甲醇转移缓冲液0.1%(V/V)考马斯亮蓝的 50%甲醇溶液10%(V/V)乙酸的 50%甲醇溶液仪器、耗材 微量注射器或凝胶加样吸头PVDF 膜小型电转装置自动蛋白质

什么是氨基酸序列?

  氨基酸序列是氨基酸相互连接形成肽链(或多肽)的顺序。如果肽链是一个蛋白质,氨基酸序列就经常被叫做蛋白质主要结构。根据氨基酸的结构和它们连接在一起的方式,氨基酸序列只能按照一个方向读取,并且以特定形式形成肽。  氨基酸有100多种不同类型,其中20种常用于生产蛋白质。所有氨基酸都具有一个常规结构,

氨基酸序列的测定方法

有两种方法,一是直接测序列法,常用Edman降解法,在弱碱性条件下多肽连N端氨基酸(阿尔发)与PITC反应,标记为苯氨基硫代甲酰蛋白质。肽链中的第一个肽键变弱,在无水酸的存在下发发生降解,第一个氨基酸(AA1)经过分子重排成为PTH-AA1结合层析技术即可确定氨基酸的性质。C端氨基酸残基分析,可用;

氨基酸序列的测定方法

有两种方法,一是直接测序列法,常用Edman降解法,在弱碱性条件下多肽连N端氨基酸(阿尔发)与PITC反应,标记为苯氨基硫代甲酰蛋白质。肽链中的第一个肽键变弱,在无水酸的存在下发发生降解,第一个氨基酸(AA1)经过分子重排成为PTH-AA1结合层析技术即可确定氨基酸的性质。C端氨基酸残基分析,可用;

氨基酸序列测定实验——辅助方案

实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒1 mol/L NaHCO3 (可选)100% 冰冷乙醇(不含变性剂 USP 级)样品缓冲液 0.1% (V/V)焦宁 Y 染料仪器、耗材超滤浓缩器/Speedvac蒸发器拉细的巴斯德吸管/凝胶加样吸头1.5 ml 微量离心管离心机实验步骤1. 必要时,用1 mol/L

氨基酸序列测定实验——基本方案

测定通过 SDS-PAGE 转移到 PVDF 膜上样品的氨基酸序列实验材料分离胶和积层胶溶液还原型谷胱甘肽干粉试剂、试剂盒4 × 凝胶缓冲液10 × 下槽缓冲液10 × 上槽缓冲液甲醇转移缓冲液0.1%(V/V)考马斯亮蓝的 50%甲醇溶液10%(V/V)乙酸的 50%甲醇溶液仪器、耗材微量注射器或

什么是氨基酸序列的覆盖率

你是质谱结果么?意思就是质谱鉴定出来的能够跟数据库中的序列对的上的那一部分氨基酸占总的氨基酸序列的比值。例如,二级质谱能够找到的若干个肽段含有的总氨基酸个数是40个,而你的目标蛋白的氨基酸总过有100个,那么氨基酸序列覆盖率即为40%.

生物学术语表达序列标签的定义

表达序列标签从互补DNA(cDNA)分子所测得部分序列的短段DNA(通常300~500bp)。从cDNA文库所得到的许多表达序列标签集合组成表达序列标签数据库,代表在一定的发育时期或特定的环境条件下,特定的组织细胞基因表达的序列。可用于验证基因在特定组织中的表达,推导全长cDNA序列,或作为标签标志

生物学术语表达序列标签的方法

EST作为表达基因所在区域的分子标签因编码DNA序列高度保守而具有自身的特殊性质,与来自非表达序列的标记(如AFLP、RAPD、SSR 等)相比更可能穿越家系与种的限制,因此EST标记在亲缘关系较远的物种间比较基因组连锁图和比较质量性状信息是特别有用。同样,对于一个DNA序列缺乏的目标物种,来源于其

生物学术语表达序列标签的原理

EST是从一个随机选择的cDNA克隆进行5’端和3’端单一次测序获得的短的cDNA部分序列,代表一个完整基因的一小部分,在数据库中其长度一般从20到7000bp不等,平均长度为360±120bp 。EST来源于一定环境下一个组织总mRNA所构建的cDNA文库,因此EST也能说明该组织中各基因的表达水

RGD序列的结构和功能

RGD序列由精氨酸、甘氨酸和天冬氨酸组成,存在于多种细胞外基质中,可与11种整合素特异性结合,能有效地促进细胞对生物材料的粘附。

回文序列的特征与功能

特征有对称中心。例如,DNA序列ACCTAGGT之所以是回文序列,是因为它的互补序列是TGGATCCA,而反向互补序列是ACCTAGGT,和其原来序列一致。功能1)是限制性内切酶的识别位点;2)具有调节基因的表达作用,如色氨酸操纵子的前的弱化子;3)转录终止时的识别结构;4)基因工程的"手术刀"。

功能基因cDNA序列的分析

(一) cDNA序列的测定一.原理DNA 序列测定技术,目前主要是根据Sanger 等提出的酶法和Maxam和Gilber 提出的化学降解法,这两种方法的原理大致相同。这里主要介绍Sanger 的酶法——双脱氧链终止法。双脱氧链终止法是Sanger 等人于1977 年建立起来的。它是利用了2'

回文序列的特征与功能

特征有对称中心。例如,DNA序列ACCTAGGT之所以是回文序列,是因为它的互补序列是TGGATCCA,而反向互补序列是ACCTAGGT,和其原来序列一致。功能1)是限制性内切酶的识别位点;2)具有调节基因的表达作用,如色氨酸操纵子的前的弱化子;3)转录终止时的识别结构;4)基因工程的"手术刀"。

远侧序列的功能特点

中文名称远侧序列英文名称distal sequence定  义一般指处于基因上游200 bp以上位置的DNA序列。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

回文序列的特征和功能

特征有对称中心。例如,DNA序列ACCTAGGT之所以是回文序列,是因为它的互补序列是TGGATCCA,而反向互补序列是ACCTAGGT,和其原来序列一致。功能1)是限制性内切酶的识别位点;2)具有调节基因的表达作用,如色氨酸操纵子的前的弱化子;3)转录终止时的识别结构;4)基因工程的"手术刀"。

信号锚定序列的功能特点

中文名称信号锚定序列英文名称signal-anchor sequence定  义穿膜蛋白中的一种独特的信号序列,其作用是将这些蛋白质锚定在脂双层膜上。有两种类型。Ⅰ型序列介导穿膜蛋白的N端域移位,Ⅱ型则介导其余部分的移位。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),信号转导(二级学科)

简单重复序列的功能特点

SSR 标记具有高度重复性、丰富的多态性、共显性、高度可靠性等优点,但由于其需要对所研究物种的一系列微卫星位点进行克隆和测序分析,以便设计相应的引物,这是非常费时、费力和代价昂贵的工作,没有足够的投资、人力和时间,是不可能实现的,因而给它的利用带来了一定困难。

关于氨基酸序列分析仪的优缺点介绍

  优点  1.分析可以再设备普通的实验室里进行  2.能够分析大量的样品。因为通过仔细的计划,好几批试样可以同时分析以及为分析做好准备  3.原始数据能够容易的处理以供在计算机中进一步求值  4.检测极限也从最初的u mol, 级提高到p mol 级  5.氨基酸不用柱前衍生,直接上样进行分析,操

通过编辑SKN1A蛋白氨基酸序列来感知蛋白酶体功能障碍

  在一项新的研究中,来自美国麻省总医院的研究人员发现细胞通过编辑一种关键的传感蛋白的氨基酸序列来感知蛋白酶体功能障碍并以一种之前未描述的方式作出反应的机制。相关研究结果发表在2019年4月18日的Cell期刊上,论文标题为“Protein Sequence Editing of SKN-1A/Nr

旁侧序列的的功能特点

中文名称旁侧序列英文名称flanking sequence定  义结构基因两侧的核苷酸序列,对基因的表达及表达水平具有调控作用。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

停止转移序列的定义和功能

停止转移序列(stop transfer sequence),肽链上的一段特殊序列,与内质网膜的亲合力很高,能阻止肽链继续进入内质网腔,使其成为跨膜蛋白质。

PK120-的纯化及肽段氨基酸序列分析实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 PK-120

PK120-的纯化及肽段氨基酸序列分析实验

实验材料PK-120试剂、试剂盒Q-Sepharose 树脂S-Sepharose 树脂Hudroxyapatite 羟基磷灰石Sephacryl S-200 凝胶赖氨酸内切酶乙腈三氯醋酸仪器、耗材Applied Biosystems model 477A 气相蛋白质测定仪Applied Biosy

PK120-的纯化及肽段氨基酸序列分析实验

实验方法原理 实验材料 PK-120试剂、试剂盒 Q-Sepharose 树脂S-Sepharose 树脂Hudroxyapatite 羟基磷灰石Sephacryl S-200 凝胶赖氨酸内切酶乙腈三氯醋酸仪器、耗材 Applied Biosystems model 477A 气相蛋白质测定仪A

碱基突变对多肽链中氨基酸序列的影响类型

同义突变同义突变(same sense mutation):碱基置换后,虽然每个密码子变成了另一个密码子,但由于密码子的简并性,因而改变前、后密码子所编码的氨基酸不变,故实际上不会发生突变效应。例如,DNA分子模板链中GCG的第三位G被A取代,变为GCA,则mRNA中相应的密码子CGC就变为CGU,

内质网信号序列的功能特点

中文名称内质网信号序列英文名称ER signal sequence定  义引导合成中的蛋白质进入内质网腔的N端信号序列。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞通信与信号转导(二级学科)

高度重复序列的主要功能

a.参与复制水平的调节反向序列常存在于DNA复制起点区的附近。另外,许多反向重复序列是一些蛋白质(包括酶)和DNA的结合位点。b.参与基因表达的调控DNA的重复顺序可以转录到核内不均一RNA分子中,而有些反向重复顺序可以形成发夹结构,这对稳定RNA分子,免遭分解有重要作用.c.参与转位作用几乎所有转

支链氨基酸的功能简介

  支链氨基酸作为氮的载体,辅助合成肌肉合成所需的其它氨基酸,简单说,它是一个简单氨基酸合成复杂完整肌肉组织的过程。因此,支链氨基酸刺激胰岛素的产生,胰岛素的主要作用就是允许外周血糖被肌肉吸收并作为能量来源。胰岛素的产生也促进肌肉对氨基酸的吸收。支链氨基酸既有合成作用,也有抗分解作用,因为它们可以显